本文關鍵詞：siRNA干擾EPCAM基因表達抑制結腸HCT116細胞株增殖和侵襲的研究

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【摘要】：實驗目的：結腸癌在我國是最常見的胃腸道惡性腫瘤之一,在我國,因結腸癌死亡者,男性死亡率占所有腫瘤的第5位,女性居第6位,結腸癌的發(fā)生與社會現(xiàn)狀、生活習慣(尤其是飲食習慣、缺少體力活動)、遺傳因素等有關。高齡、結直腸息肉病史、潰瘍性結腸炎以及膽囊切除史也是結腸癌的高危因素。但總的來說,結腸癌的病因還不十分清楚。本研究旨在觀察siRNA干擾EPCAM基因表達后對結腸癌HCT116細胞增殖和侵襲的影響,從而初步探討EPCAM基因與結腸癌發(fā)生發(fā)展的關系。實驗方法：將針對EPCAM基因不同位點的3個siRNA(分別命名為EPCAM-siRNA-1、EPCAM-siRNA-2、 EPCAM-siRNA-3)以及陰性對照(NC)分別轉染結腸癌HCT116細胞,利用RT-PCR和Western-blot方法檢測各組細胞轉染后EPCAM mRNA及蛋白的表達水平。選取干擾效率最強的的一組siRNA轉染結腸癌細胞,MTT法檢測轉染前后細胞的增殖活性,transwell實驗檢測轉染前后細胞的侵襲能力變化。實驗結果：3條EPCAM siRNA均能有效抑制EPCAM基因的表達,RT-PCR顯示各干擾組mRNA表達量分別為0.18±0.02、0.43±0.03、0.68±0.02,均顯著低于空白對照組的0.98±0.02以及陰性對照組的0.96±0.03(P=0.008),Western-blot結果顯示各干繞組EPCAM蛋白表達量分別為0.22±0.03、0.43±0.02、0.71±0.03,均低于空白是對照組0.93±0.02和陰性對照組0.89±0.02(P=0.005)。選用干擾效率最高的EPCAM-siRNA-1轉染結腸癌HCT116細胞后,MTT結果表明干擾組HCT116細胞生長活性受到抑制,轉繞后48h后最明顯,抑制率41%,與對照組相比差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.013)。Transwell結果顯示轉染組細胞平均每視野侵襲至transwell膜上的個數(shù)為19個,明顯低于空白對照組45個和陰性對照組41個(P=0.03)。結論：EPCAM siRNA可以有效抑制結腸癌HCT116細胞EPCAM的表達,可以抑制HCT116細胞的增殖和侵襲。
【關鍵詞】：結腸癌 上皮細胞粘附分子 RNA干擾 增殖 侵襲
【學位授予單位】：濱州醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.35
【目錄】：

• 研究背景4-6
• 中文摘要6-7
• 英文摘要7-9
• 英文縮略詞9-10
• 前言10-11
• 文獻回顧11-21
• 參考文獻17-21
• 前言21-23
• 實驗材料23-24
• 方法24-27
• 結果27-30
• 討論30-33
• 全文總結33
• 參考文獻33-35
• 論文發(fā)表35-36
• 致謝36

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：831562