本文關(guān)鍵詞：木犀草素對(duì)胃癌MGC803細(xì)胞增殖抑制作用及其機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 木犀草素 胃癌 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡 自噬

【摘要】：目的:研究木犀草素對(duì)胃癌MGC803細(xì)胞的增殖抑制作用及其機(jī)制。方法:1、MTT法和克隆形成抑制試驗(yàn)檢測(cè)木犀草素對(duì)胃癌MGC803細(xì)胞的增殖抑制作用。2、碘化丙錠(PI)單染色法檢測(cè)細(xì)胞周期,判斷細(xì)胞周期阻滯情況;Western Blot檢測(cè)周期蛋白的表達(dá)。3、Annexin V-PI雙染法測(cè)定細(xì)胞凋亡:分別以藥物濃度0,12.5,25,50μmol/L作用于胃癌MGC803細(xì)胞,同時(shí)設(shè)DMSO對(duì)照組,檢測(cè)48 h后細(xì)胞早期凋亡率及晚期凋亡率。Western-Blot技術(shù)檢測(cè)Bcl-2家族蛋白和Caspase的蛋白表達(dá)情況:以0,12.5,25,50μmol/L藥物濃度作用于胃癌MGC803細(xì)胞,同時(shí)設(shè)DMSO對(duì)照組,檢測(cè)蛋白表達(dá)情況.4、Western blot檢測(cè)后自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:1、MTT法檢測(cè)發(fā)現(xiàn):木犀草素作用于MGC-803細(xì)胞24h、48h和72h后,IC50分別為127.37umol/L、76.12umol/L、16.84umol/L�？寺⌒纬梢种圃囼�(yàn)表明木犀草素作用于胃癌MGC803細(xì)胞7天后,隨著藥物濃度增加克隆逐漸減小,且克隆數(shù)量逐漸減少,產(chǎn)生明顯的克隆形成抑制作用。2、流式細(xì)胞儀PI單染結(jié)果:不同濃度的木犀草素作用于胃癌MGC803細(xì)胞48后,G0/G1期細(xì)胞逐漸減少,S期細(xì)胞變化不大,G2/M期細(xì)胞明顯增加,提示細(xì)胞周期阻滯于G2期;Western Blot的檢測(cè)結(jié)果也證明木犀草素作用于胃癌MGC803細(xì)胞后,MGC803細(xì)胞阻滯于G2期。3、流式細(xì)胞儀Annexin V-FITC/PI雙染色和Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:不同濃度的木犀草素作用于胃癌MGC-803細(xì)胞后,隨濃度增加,早期凋亡率和晚期凋亡率均增加。Mcl-1,Bcl-xl,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9總蛋白隨藥物濃度增加而減少,Bcl-2蛋白量變化不大,Bax蛋白量增加,因而引起B(yǎng)cl-2/Bax,Mcl-1/Bax和Bcl-xl/Bax的比例明顯下降。同時(shí)可見(jiàn)到Caspase-3和PARP出現(xiàn)了切割的條帶。4、Western Blot結(jié)果提示,不同濃度的木犀草素作用于胃癌MGC-803細(xì)胞后,總P62表達(dá)下降,Beclin-1表達(dá)增加,而LC3 II表達(dá)增加。結(jié)論1、木犀草素使胃癌MGC803細(xì)胞阻滯于G2期,誘導(dǎo)自噬發(fā)生從而抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)。2、木犀草素通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)胃癌MGC803細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：木犀草素 胃癌 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡 自噬
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-8
• 前言8-18
• 實(shí)驗(yàn)材料和方法18-26
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-33
• 討論33-36
• 結(jié)論36-37
• 展望37-38
• 參考文獻(xiàn)38-43
• 縮略詞表43-44
• 發(fā)表文章44-45
• 致謝45

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：830814