發(fā)布時(shí)間：2017-09-10 18:33

  本文關(guān)鍵詞：人肺癌細(xì)胞系NCI-H1650中干細(xì)胞的分離及鑒定

  更多相關(guān)文章： 肺癌干細(xì)胞 SFM培養(yǎng) 免疫磁珠分選

【摘要】：研究背景肺癌發(fā)病率高,惡性程度高,預(yù)后差,死亡率高,占腫瘤相關(guān)死亡的首位。CSCs是一群異質(zhì)性細(xì)胞,能自我更新并有無(wú)限增殖和多向分化潛能。肺癌干細(xì)胞與肺癌的發(fā)生發(fā)展,維持,侵襲轉(zhuǎn)移,復(fù)發(fā),耐藥等密切相關(guān)。因此,對(duì)肺癌干細(xì)胞的研究可為肺癌提供更多的治療方向。然而肺癌中肺癌干細(xì)胞含量極少,有效分離得到肺癌干細(xì)胞是進(jìn)行肺癌干細(xì)胞研究的重要基礎(chǔ)。我們將采用兩種不同的方式來(lái)分離人肺癌細(xì)胞系NCI-H1650中的干細(xì)胞。目的分離出人肺癌細(xì)胞系NCI-H1650中的干細(xì)胞并進(jìn)行鑒定。方法1.應(yīng)用無(wú)血清培養(yǎng)聯(lián)合紫杉醇刺激的方法誘導(dǎo)NCI-H1650干細(xì)胞。2.流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光檢測(cè)誘導(dǎo)細(xì)胞表面CD133和C D326表達(dá);采用RT-PCR和Western blot檢測(cè)干性基因Oct-4、Nanog、Sox-2。3.應(yīng)用免疫磁珠分選法分選NCI-H1650干細(xì)胞。4.免疫熒光檢測(cè)磁珠分選細(xì)胞表面CD133和CD326表達(dá);采用RT-PCR和Western blot檢測(cè)干性基因Oct-4、Nanog、Sox-2。結(jié)果1.誘導(dǎo)NCI-H1650干細(xì)胞在SFM中呈球形生長(zhǎng)。2.誘導(dǎo)NCI-H1650干細(xì)胞表達(dá)干細(xì)胞表面標(biāo)志C D133和CD326。3.誘導(dǎo)NCI-H1650干細(xì)胞表達(dá)干性基因Oct-4、Nanog、Sox-2。4.磁珠分選細(xì)胞在SFM中呈球形生長(zhǎng)。5.磁珠分選細(xì)胞表達(dá)干細(xì)胞表面標(biāo)志C D133和C D326。6.磁珠分選細(xì)胞表達(dá)干性基因Oct-4、Nanog、Sox-2。結(jié)論1.無(wú)血清培養(yǎng)聯(lián)合紫杉醇刺激能有效誘導(dǎo)NCI-H1650干細(xì)胞,并高表達(dá)CSCs表面標(biāo)志CD133和CD326,高表達(dá)CSCs相關(guān)基因Oct-4、Nanog和Sox-2。2.免疫磁珠分選法能有效分選出NCI-H1650干細(xì)胞,并高表達(dá)CSCs表面標(biāo)志CD133和CD326,高表達(dá)CSC s相關(guān)基因Oct-4、Nanog和Sox-2。
【關(guān)鍵詞】：肺癌干細(xì)胞 SFM培養(yǎng) 免疫磁珠分選
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R734.2
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表4-6
• 英文摘要6-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-13
• 第二章 SFM聯(lián)合紫杉醇刺激法分離及鑒定NCI-H1650中CSCs13-27
• 2.1 材料與方法13-21
• 2.2 結(jié)果21-25
• 2.3 討論25-27
• 第三章 免疫磁珠分選法分離及鑒定NCI-H1650中CSCs27-36
• 3.1 材料與方法27-31
• 3.2 結(jié)果31-34
• 3.3 討論34-36
• 全文結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-39
• 文獻(xiàn)綜述 肺癌干細(xì)胞的研究進(jìn)展39-52
• 參考文獻(xiàn)46-52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文52-53
• 致謝53

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1 記者 鄭穎t牎∥飧，

本文編號(hào)：825967