本文關鍵詞：人肺癌細胞系NCI-H1650中干細胞的分離及鑒定

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【摘要】：研究背景肺癌發(fā)病率高,惡性程度高,預后差,死亡率高,占腫瘤相關死亡的首位。CSCs是一群異質性細胞,能自我更新并有無限增殖和多向分化潛能。肺癌干細胞與肺癌的發(fā)生發(fā)展,維持,侵襲轉移,復發(fā),耐藥等密切相關。因此,對肺癌干細胞的研究可為肺癌提供更多的治療方向。然而肺癌中肺癌干細胞含量極少,有效分離得到肺癌干細胞是進行肺癌干細胞研究的重要基礎。我們將采用兩種不同的方式來分離人肺癌細胞系NCI-H1650中的干細胞。目的分離出人肺癌細胞系NCI-H1650中的干細胞并進行鑒定。方法1.應用無血清培養(yǎng)聯(lián)合紫杉醇刺激的方法誘導NCI-H1650干細胞。2.流式細胞術和免疫熒光檢測誘導細胞表面CD133和C D326表達;采用RT-PCR和Western blot檢測干性基因Oct-4、Nanog、Sox-2。3.應用免疫磁珠分選法分選NCI-H1650干細胞。4.免疫熒光檢測磁珠分選細胞表面CD133和CD326表達;采用RT-PCR和Western blot檢測干性基因Oct-4、Nanog、Sox-2。結果1.誘導NCI-H1650干細胞在SFM中呈球形生長。2.誘導NCI-H1650干細胞表達干細胞表面標志C D133和CD326。3.誘導NCI-H1650干細胞表達干性基因Oct-4、Nanog、Sox-2。4.磁珠分選細胞在SFM中呈球形生長。5.磁珠分選細胞表達干細胞表面標志C D133和C D326。6.磁珠分選細胞表達干性基因Oct-4、Nanog、Sox-2。結論1.無血清培養(yǎng)聯(lián)合紫杉醇刺激能有效誘導NCI-H1650干細胞,并高表達CSCs表面標志CD133和CD326,高表達CSCs相關基因Oct-4、Nanog和Sox-2。2.免疫磁珠分選法能有效分選出NCI-H1650干細胞,并高表達CSCs表面標志CD133和CD326,高表達CSC s相關基因Oct-4、Nanog和Sox-2。
【關鍵詞】：肺癌干細胞 SFM培養(yǎng) 免疫磁珠分選
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 英文摘要6-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-13
• 第二章 SFM聯(lián)合紫杉醇刺激法分離及鑒定NCI-H1650中CSCs13-27
• 2.1 材料與方法13-21
• 2.2 結果21-25
• 2.3 討論25-27
• 第三章 免疫磁珠分選法分離及鑒定NCI-H1650中CSCs27-36
• 3.1 材料與方法27-31
• 3.2 結果31-34
• 3.3 討論34-36
• 全文結論36-37
• 參考文獻37-39
• 文獻綜述 肺癌干細胞的研究進展39-52
• 參考文獻46-52
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文52-53
• 致謝53

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1 記者 鄭穎t牎∥飧，

本文編號：825967