本文關(guān)鍵詞：白介素-2聯(lián)合不同劑量索拉菲尼對腎癌細胞的體內(nèi)外殺傷效應(yīng)的初步研究

  更多相關(guān)文章： 腎癌細胞株 白細胞介素-2/索拉菲尼 免疫抑制因子 腫瘤血管

【摘要】：目的:觀察白細胞介素-2(IL-2)聯(lián)合不同劑量的索拉菲尼對腎癌786-O細胞的體內(nèi)殺傷效應(yīng)及對荷瘤小鼠生長情況的影響,為腎癌的臨床治療策略提供新的參考。方法:取腎癌786-O細胞體外培養(yǎng)至培養(yǎng)對數(shù)生長期,24h后以IL-2(20umol/l)分別聯(lián)合索拉菲尼(6.9,13.8,20.8umol/l)作用于腎癌786-O細胞株,MTT(噻唑藍)比色法檢測IL-2聯(lián)合不同劑量索拉菲尼對腎癌786-0細胞株增值的影響,流式細胞儀檢測各組對腎癌細胞凋亡率的影響。再取對數(shù)生長期的腎癌細胞株,胰蛋白酶消化離心后調(diào)整細胞濃度至5×104cell/ml,取細胞懸液分別接種于裸鼠后項中間皮下,0.3ml/只。成瘤后,分為空白對照組、索拉菲尼低劑量組、索拉菲尼中劑量組,索拉菲尼高劑量組,分別觀察它們對裸鼠移植瘤生長的抑制作用和荷瘤小鼠的耐受性。取荷瘤小鼠外周血,雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定各組小鼠血清IL-10的分泌量。然后用活檢針取腫瘤組織,免疫組化法檢測VEGF因子和CD31的表達情況。結(jié)果:MTT法發(fā)現(xiàn)各組均表現(xiàn)出對腎癌細胞的抑制作用,與單用IL-2相比,兩藥聯(lián)合應(yīng)用時抑制作用更明顯,且隨著處理時間的延長和濃度的增加,各組對腎癌細胞增殖的抑制也是逐漸增加,呈現(xiàn)出時間-劑量依賴性。各組間差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其中以高劑量組48h的抑制率最高,達到(74.67±1.87)%。在誘導(dǎo)細胞凋亡方面,流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)各組之間沒有顯著性差異(P0.01)。荷瘤小鼠模型成功建立,體外實驗中觀察到高劑量組小鼠腫瘤生長緩慢,明顯低于其他各組,但隨著劑量的增加小鼠的藥物耐受性也下降明顯。高劑量組與中劑量組、低劑量組及單用IL-2組荷瘤小鼠的體質(zhì)量差異有統(tǒng)計學(xué)意(P0.01)。ELISA結(jié)果顯示,與對照組相比,IL-10存在明顯差異(P0.01),且在三組之間內(nèi)部之間也有顯著性差異(P0.01)。進一步的免疫組化結(jié)果發(fā)現(xiàn),各組小鼠腫瘤組織內(nèi)部的VEGF因子、CD31分子的差異也存在統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:兩藥聯(lián)合能顯著抑制腎癌786-O細胞的增殖,但對腫瘤細胞凋亡無明顯影響。體外實驗也顯示荷瘤小鼠腫瘤生長減慢。這些作用可能是由于兩藥聯(lián)合使用及不同劑量影響腫瘤內(nèi)部免疫抑制因(IL-10等)的表達及腫瘤血管的生長而實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：腎癌細胞株 白細胞介素-2/索拉菲尼 免疫抑制因子 腫瘤血管
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 英文縮寫詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 1 引言10-13
• 2 材料和研究方法13-22
• 3 結(jié)果22-30
• 4 討論30-35
• 5 結(jié)論35
• 6.創(chuàng)新35
• 7.不足之處35-36
• 8 參考文獻36-43
• 附錄43-44
• 致謝44-46
• 綜述46-54
• 參考文獻51-54

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