本文關(guān)鍵詞：磷酸鞘氨醇通路及相關(guān)抑制劑對胰腺癌惡性生物學(xué)行為的影響機制研究

  更多相關(guān)文章： S1P 胰腺癌 ABL2 N-Cadherin nilotinib 遷移侵襲

【摘要】：研究目的:磷酸鞘氨醇(Sphingosine-1-phosphate,S1P)通路作為調(diào)控腫瘤惡性行為機制的重要組成部分,其對胰腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響尚不清楚。作為重要的促腫瘤發(fā)展因子,N-Cadherin、ABL2的表達(dá)活化機制和S1P關(guān)系仍有待研究。作為在白血病中應(yīng)用的重要的靶向治療藥物,ABL2激酶抑制劑尼洛替尼(nilotinib)對胰腺癌細(xì)胞株的增殖、遷移侵襲能力的影響也是我們研究的重要方向。研究方法:體外培養(yǎng)人胰腺癌細(xì)胞株,采用S1P作用于胰腺癌PANC-1細(xì)胞后,采用劃痕實驗和transwell實驗對細(xì)胞的遷移侵襲能力進(jìn)行觀察,進(jìn)一步檢測遷移侵襲關(guān)鍵分子ABL2和N-Cadherin的mRNA和蛋白的表達(dá)情況,然后通過VPC23019阻滯S1P受體S1PR1/3進(jìn)而對下游分子表達(dá)的改變進(jìn)行檢測。同時我們應(yīng)用ABL2激酶的抑制劑nilotinib作用于胰腺癌細(xì)胞株,并對細(xì)胞株的凋亡形態(tài)進(jìn)行了觀察,并應(yīng)用CCK-8和流式細(xì)胞技術(shù)對尼洛替尼的細(xì)胞毒性進(jìn)行檢測,再通過聯(lián)合S1P刺激后對細(xì)胞遷移能力、以及關(guān)鍵分子ABL2和N-Cadherin的表達(dá)情況進(jìn)行進(jìn)一步的對比研究。研究結(jié)果:S1P作用于PANC-1細(xì)胞后,劃痕實驗和Transwell顯示S1P刺激后PANC-1遷移距離和穿膜細(xì)胞數(shù)均增加(P均0.05),隨著刺激濃度的升高,ABL2的mRNA表達(dá)量與S1P濃度成正相關(guān)趨勢,N-Cadherin的mRNA表達(dá)量變化呈鐘型曲線變化,采用100nmol/L的S1P刺激時,ABL2和N-Cadherin的表達(dá)同時升高(P均0.05)。應(yīng)用VPC23019對PANC-1進(jìn)行阻滯后,ABL2、N-Cadherin的mRNA和蛋白表達(dá)均出現(xiàn)下降趨勢(P均0.05),VPC23019的應(yīng)用可以顯著抑制遷移侵襲能力;ABL2激酶抑制劑nilotinib的刺激濃度和胰腺癌細(xì)胞株凋亡率成正相關(guān),并可以有效抑制S1P誘導(dǎo)增強的遷移能力,同時也降低了N-Cadherin的蛋白表達(dá)。結(jié)論:1、S1P可以提高PANC-1遷移侵襲能力,明顯增強PANC-1的N-Cadherin和ABL2的表達(dá),而該作用可以被特異的S1PR1/3受體抑制劑VPC23019予以阻滯。2、ABL2激酶抑制劑nilotinib可以有效誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,抑制S1P誘導(dǎo)增強的PANC-1遷移能力和N-Cadherin高表達(dá)情況,ABL2可能為N-Cadherin的上游調(diào)節(jié)基因,該作用可能和S1P信號通路的調(diào)控有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：S1P 胰腺癌 ABL2 N-Cadherin nilotinib 遷移侵襲
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.9
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 縮略詞表8-9
• 前言9-11
• 材料和方法11-17
• 一、胰腺癌細(xì)胞株11
• 二、實驗設(shè)備與儀器11-13
• 三、部分試劑的配制13-14
• 四、實驗方法14-17
• 實驗結(jié)果17-24
• 一、S1P通路及相關(guān)受體抑制劑對PANC-1細(xì)胞遷移侵襲能力及相關(guān)分子影響17-20
• 二、nilotinib對PANC-1細(xì)胞惡性生物學(xué)行為及相關(guān)蛋白分子影響20-24
• 討論24-29
• 結(jié)論29-30
• 全文總結(jié)30-32
• 一、主要研究結(jié)果30
• 二、創(chuàng)新性30
• 三、實驗不足之處及改進(jìn)方向30-32
• 參考文獻(xiàn)32-37
• 綜述 S1P通路及其與腫瘤惡性生物學(xué)行為相關(guān)的研究進(jìn)展37-51
• 參考文獻(xiàn)44-51
• 攻讀碩士期間文章51-52
• 致謝52

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本文編號：819819