本文關(guān)鍵詞：莪術(shù)醇聯(lián)合5-氟尿嘧啶對人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖、凋亡的影響

  更多相關(guān)文章： 莪術(shù)醇 5-氟尿嘧啶 SGC-7901細(xì)胞 增殖 凋亡

【摘要】：目的：研究莪術(shù)醇(Curcumol)及5-氟尿嘧啶(5-FU)對人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖、凋亡的影響,并初步探討其可能的作用機(jī)制。研究對象：人胃癌SGC-7901細(xì)胞方法：首先,配制莪術(shù)醇的母液,把結(jié)晶體溶解在無水乙醇中,得到的母液的濃度為5mg/ml。一共設(shè)置5組莪術(shù)醇用藥組,其莪術(shù)醇的濃度分別是0μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μ g/ml、64μg/ml,其中第1組,是溶劑對照組,是含有1%無水乙醇的1640的培養(yǎng)液。其次,設(shè)莪術(shù)醇及5-氟尿嘧啶聯(lián)合用藥組1、2、3、4組,分別為對照組(0μg/ml)、莪術(shù)醇培養(yǎng)液組(32μg/ml)、5-氟尿嘧啶培養(yǎng)液組(5μg/ml)、莪術(shù)醇(32μg/ml)+5-氟尿嘧啶(5μg/ml)聯(lián)合培養(yǎng)液組。在正常條件下,我們培養(yǎng)SGC-7901細(xì)胞,培養(yǎng)48小時(shí)后,采用臺(tái)盼藍(lán)(Trypan blue)拒染法,檢測其活性。用莪術(shù)醇和5-氟尿嘧啶以不同濃度、不同時(shí)間以及各種組合處理SGC-7901細(xì)胞后,采用噻唑藍(lán)(MTT)法,檢測細(xì)胞的增殖抑制率。采取流式細(xì)胞儀技術(shù)來檢測胃癌SGC-7901細(xì)胞的凋亡率；免疫印跡法(Western Blot)檢測Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表達(dá)水平；通過Caspase-3活性檢測試劑盒來檢測Caspase-3的酶活性的表達(dá)水平高低。結(jié)果：1. Trypan blue拒染實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,此胃癌細(xì)胞,符合本次實(shí)驗(yàn)的使用要求。各藥物濃度培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞后,胃癌細(xì)胞的增殖抑制率與溶劑對照組細(xì)胞相比,有明顯的差異(P0.05),隨著藥物濃度的增高,胃癌細(xì)胞的增殖抑制率亦越高。其中,藥物培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞48h,對細(xì)胞的生長抑制作用最為明顯。莪術(shù)醇與5-氟尿嘧啶聯(lián)合用藥組比單藥處理組的細(xì)胞增殖抑制率明顯上升(P0.05)。2、藥物作用細(xì)胞48h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示,對照組細(xì)胞凋亡率約為2.37%,單用莪術(shù)醇組為13.43%,單用5-氟尿嘧啶組為10.59%,聯(lián)合用藥組凋亡率為24.11%,提示莪術(shù)醇有促進(jìn)5-氟尿嘧啶誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡的作用(P0.05)。3、Western Blot檢測結(jié)果表明,莪術(shù)醇及5-氟尿嘧啶作用于SGC-7901細(xì)胞48h后,均能促進(jìn)Bax蛋白的表達(dá),抑制Bcl-2蛋白的表達(dá),聯(lián)合用藥組對蛋白的促進(jìn)和抑制作用明顯高于單獨(dú)使用化療藥組(P0.05)。4、Western Blot以及Caspase-3活性檢測結(jié)果表明,莪術(shù)醇和5-氟尿嘧啶處理胃癌細(xì)胞48h后,均能促進(jìn)Caspase-3蛋白和酶活性的表達(dá),聯(lián)合用藥組蛋白及酶表達(dá)水平明顯高于單獨(dú)使用化療藥組(P0.05)。結(jié)論：1、莪術(shù)醇可以明顯抑制SGC-7901細(xì)胞的增殖,促進(jìn)凋亡,與5-氟尿嘧啶聯(lián)合應(yīng)用對胃癌細(xì)胞的增殖抑制及促凋亡作用更加明顯。結(jié)果表明,莪術(shù)醇能增強(qiáng)胃癌細(xì)胞對化療藥物的敏感性。2、莪術(shù)醇及5-氟尿嘧啶可以通過調(diào)節(jié)凋亡蛋白bax/bcl-2的比例,激活Caspase-3,導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,聯(lián)合用藥效應(yīng)更明顯。結(jié)果提示,提示莪術(shù)醇可能通過線粒體介導(dǎo)的內(nèi)源性凋亡通路,促進(jìn)5-氟尿嘧啶誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：莪術(shù)醇 5-氟尿嘧啶 SGC-7901細(xì)胞 增殖 凋亡
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-9
• 符號說明9-10
• 前言10-13
• 第一部分：莪術(shù)醇及5-氟尿嘧啶對SGC-7901細(xì)胞增殖的影響13-21
• 1 材料和儀器13-14
• 2 實(shí)驗(yàn)方法14-16
• 3 結(jié)果16-21
• 第二部分：莪術(shù)醇及5-氟尿嘧啶對SGC-7901細(xì)胞凋亡率的影響21-25
• 1 材料和儀器21-22
• 2 實(shí)驗(yàn)方法22
• 3 結(jié)果22-25
• 第三部分：Western Blot檢測莪術(shù)醇及5-氟尿嘧啶對SGC-7901細(xì)胞Bax、Bcl-2表達(dá)的影響25-32
• 1 材料和儀器25-26
• 2 實(shí)驗(yàn)方法26-29
• 3 結(jié)果29-32
• 第四部分：莪術(shù)醇及5-氟尿嘧啶對SGC-7901細(xì)胞Caspase-3蛋白和酶活性表達(dá)的影響32-39
• 1 材料和儀器32-33
• 2 實(shí)驗(yàn)方法33-36
• 3 結(jié)果36-39
• 討論39-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 綜述46-53
• 參考文獻(xiàn)51-53
• 致謝53-54
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄54-55

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本文編號：819262