本文關(guān)鍵詞：PRMT2在乳腺癌細胞tamoxifen耐藥性中的作用初步研究

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【摘要】：目的:研究PRMT2對乳腺癌細胞TAM耐藥產(chǎn)生的影響,并對其機制進行初步探討,為耐藥性乳腺癌的治療提供新思路。方法:以體外培養(yǎng)的MDA-MB-231細胞和MCF-7細胞為研究對象,研究PRMT2在TAM誘導(dǎo)乳腺癌細胞凋亡過程中的作用及其相關(guān)機制。實驗包括3部分(1)通過流式細胞術(shù),從細胞水平檢測TAM對乳腺癌細胞凋亡的影響;(2)通過激光共聚焦技術(shù)明確PRMT2及ER-ɑ36的亞細胞定位;(3)利用蛋白質(zhì)免疫印跡法,從蛋白水平分析TAM對乳腺癌細胞PRMT2、ER-ɑ36及P-Akt表達的影響。結(jié)果:1.流式細胞術(shù)結(jié)果顯示:MCF-7細胞株經(jīng)不同濃度TAM處理4小時后,與對照組相比,2μM、5μM、7.5μM藥物處理組細胞的凋亡率明顯增加,且TAM具有劑量依賴性的促細胞凋亡效應(yīng),有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。然而,在相同藥物濃度作用下,MDA-MB-231細胞的凋亡率要明顯低于MCF-7細胞,說明MDA-MB-231細胞對TAM相對耐藥。2.免疫熒光、激光共聚焦結(jié)果顯示:在MDA-MB-231乳腺癌細胞中,PRMT2及ER-ɑ36的亞細胞定位在細胞核及細胞質(zhì)中,表明PRMT2和ER-ɑ36在該細胞系中存在共定位。3.WB結(jié)果顯示,在對TAM相對敏感的MCF-7細胞株中,不同濃度TAM(0μM、2μM、5μM、7.5μM)處理細胞4小時后,P-Akt表達水平明顯下調(diào),且呈劑量依賴性,而此細胞株中PRMT2及ER-ɑ36的表達水平無明顯變化;然而,在對TAM相對耐藥的MDA-MB-231細胞株中,PRMT2的表達水平下調(diào),伴隨著ER-ɑ36與P-Akt表達水平明顯上調(diào),三者變化都具有劑量依賴性特點。進一步利用兩種乳腺癌細胞進行TAM時效研究,結(jié)果與各自TAM量效處理組相一致。結(jié)論:1.PRMT2與ER-α36在乳腺癌MDA-MB-231細胞中存在共定位。2.在MDA-MB-231細胞中,PRMT2可能參與TAM耐藥,機制與TAM下調(diào)PRMT2表達,提高ER-ɑ36表達及Akt磷酸化水平有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：蛋白質(zhì)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信號通路 乳腺癌細胞 他莫昔芬耐藥 雌激素受體-ɑ36
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-12
• 第1章 前言12-14
• 第2章 實驗材料14-20
• 2.1 細胞株14
• 2.2 質(zhì)粒構(gòu)建14
• 2.3 主要試劑、耗材及來源14-15
• 2.4 主要溶液配制15-18
• 2.5 主要儀器18-20
• 第3章 實驗方法20-26
• 3.1 細胞培養(yǎng)20
• 3.2 流式細胞術(shù)20-21
• 3.3 激光共聚焦顯微鏡21-22
• 3.4 蛋白質(zhì)免疫印跡22-25
• 3.5 統(tǒng)計學(xué)處理25-26
• 第4章 實驗結(jié)果26-32
• 4.1 TAM對乳腺癌細胞凋亡的影響26-28
• 4.2 PRMT2及ER-ɑ36在MDA-MB-231細胞中的亞細胞定位28
• 4.3 TAM對乳腺癌細胞PRMT2、ER-ɑ36及P-Akt表達的影響28-32
• 第5章 討論32-36
• 第6章 結(jié)論36-38
• 參考文獻38-44
• 綜述44-54
• 參考文獻51-54
• 碩士期間發(fā)表的論文54-56
• 論文資助情況56-58
• 致謝58

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