本文關(guān)鍵詞：順鉑聯(lián)合乳酸桿菌在宮頸癌治療中對免疫因子IL-10、TGF-β1影響的實驗研究

  更多相關(guān)文章： 順鉑 乳酸桿菌 宮頸癌 白細(xì)胞介素-10 轉(zhuǎn)化生長因-β1

【摘要】：目的:.宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤,是導(dǎo)致女性死亡的第二大癌癥。目前中、晚期宮頸癌的治療仍無統(tǒng)一有效的方法。目前,大部分的觀點認(rèn)為由于腫瘤微環(huán)境中免疫抑制因素的存在,使得傳統(tǒng)的放、化療無法降低患者的死亡率,且其無法避免的毒副作用大大降低了患者的生存質(zhì)量。腫瘤細(xì)胞處在腫瘤微環(huán)境中可以分泌出各種免疫抑制性因子,比如IL-10以及TGF-β1等;而怎樣才能夠有效減少或消除腫瘤微環(huán)境里面的免疫抑制因素,提高治療效果,是當(dāng)前腫瘤治療領(lǐng)域亟待解決的重要問題。乳酸桿菌為女性陰道的正常優(yōu)勢菌群,對維持陰道正常生態(tài)平衡起著關(guān)鍵作用,多項研究結(jié)果顯示,陰道微生態(tài)平衡失調(diào)與宮頸癌的發(fā)生具有密切的聯(lián)系。在乳酸桿菌數(shù)量降低的情況下,會使得陰道混合性厭氧菌或者是加德納菌增殖速度加快,形成大量有害物質(zhì),并和其他致癌因素(如HPV)聯(lián)合作用于宮頸,加速了宮頸癌的發(fā)展。那么乳酸桿菌聯(lián)合順鉑治療宮頸癌是否可以降低或消除腫瘤微環(huán)境中免疫抑制因素、增強治療效果?本次研究將為宮頸癌的治療提供新的視角。方法:1體外實驗1.1培養(yǎng)宮頸癌U14細(xì)胞及乳酸桿菌。1.2用順鉑、乳酸桿菌、順鉑+乳酸桿菌刺激宮頸癌U14細(xì)胞,對照組為PBS。24h、48h、72h收集細(xì)胞,觀察U14細(xì)胞中TGF-β1、IL-10m RNA的表達(dá)。2體內(nèi)實驗取4?6周齡的雌性C57BL/6小鼠40只,隨機分為4組,每組10只。取對數(shù)生長期U14細(xì)胞2×10~6個/0.2ml分別接種于每組小鼠,部位為背部皮下。在接種第八天之后進行抑瘤實驗。對照組腹腔注射PBS0.2ml/只,乳酸桿菌組給予乳酸桿菌2.25*10~6/0.2ml/只腫瘤周邊進行多部位注射,順鉑組給予順鉑腹腔注射0.2ml/只,乳酸桿菌和順鉑聯(lián)合組,給予順鉑腹腔注射0.2ml+乳酸桿菌2.25*10~6/0.2ml/只腫瘤周邊進行多部位注射。荷瘤小鼠注射等量的PBS作為對照,每天一次,治療14天。每天檢測小鼠體重并使用游標(biāo)卡尺測量腫瘤大小。停藥一天后,處死取瘤。稱量瘤重并使用游標(biāo)卡尺對腫瘤的徑線進行測量,根據(jù)腫瘤體積計算公式:體積V=長徑(L)·短徑(W)2/2,對腫瘤體積進行計算。繪制腫瘤體積與生長時間曲線,然后把腫瘤切開,觀察腫瘤切面及內(nèi)部組織。根據(jù)公式計算出抑瘤率(IR);10%多聚甲醛固定液固定后,以免疫組化的方法進行TGF-β1、IL-10因子表達(dá)的檢測。結(jié)果:1體外實驗:在相應(yīng)刺激宮頸癌U14細(xì)胞48小時后,在m RNA水平順鉑組與聯(lián)合組TGF-β1、IL-10的表達(dá)量各自和對照組、乳酸桿菌組對比均明顯減少,具備顯著性差異(P0.05)。聯(lián)合組比順鉑組TGF-β1、IL-10的表達(dá)量減少,對比具備顯著性差異(P0.05),乳酸桿菌組與對照組對比,減少不明顯,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)2體內(nèi)實驗:各組荷瘤小鼠的生長狀態(tài):各組小鼠在荷瘤之后的前10天里都具有良好的生長狀態(tài),然而在第15天之后差異開始顯現(xiàn),對照組體重有所降低,存在活動量減少以及逐漸消瘦的表現(xiàn);在用藥7天之后順鉑組小鼠有食欲降低表現(xiàn),并在用藥14天后開始出現(xiàn)心動遲緩以及精神萎靡等的現(xiàn)象;至于乳酸桿菌與聯(lián)合組小鼠的生長狀態(tài)則相對較好,沒有觀察到明顯體重降低情況。3小鼠移植瘤生長狀況及抑瘤率比較:接種瘤細(xì)胞之后的前9天里,各組里小鼠腫瘤生長大體保持一致;在第10~14天,對照組小鼠腫瘤生長速度超過另外3組,其中腫瘤生長速度最慢的是聯(lián)合組小鼠;第15~24天,對照組小鼠腫瘤生長速度最快,要遠(yuǎn)超過其他3組,而順鉑組與聯(lián)合組的小鼠出現(xiàn)腫瘤開始變小的情況,其中最顯著的是聯(lián)合組。對照組、乳酸桿菌組、聯(lián)合組以及順鉑組的腫瘤稱重各自是(3.158±0.004)g、乳酸桿菌組(2.901±0.005)g、順鉑組(2.070±0.004)g、聯(lián)合組(1.576±0.003)g,對照組瘤重大于其他各用藥組,各治療組之間的瘤重兩兩對比都具備顯著性差異;基于抑瘤率公式能夠求解到,乳酸桿菌組、聯(lián)合組以及順鉑組的抑瘤率各自是8%,50%,34%。其中最高的聯(lián)合組,最低的是乳酸桿菌組。4體內(nèi)實驗的免疫組化結(jié)果:在對照組、乳酸桿菌組、順鉑組以及聯(lián)合組當(dāng)中,TGF-β1平均光密度值各自是(0.466±0.003)、(0.438±0.002)、(0.144±0.001)、(0.122±0.005);IL-10平均光密度值各自是(0.480±0.005)、(0.472±0.003)、(0.152±0.006)、(0.128±0.002);順鉑組與聯(lián)合組的TGF-β1、IL-10表達(dá)量和對照組、乳酸桿菌組進行兩兩對比均降低,有顯著性差異(P0.05);聯(lián)合組比順鉑組降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而對照組和乳酸桿菌組對比則差異不明顯,無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:聯(lián)合組小鼠的一般狀況包括活動、食欲及精神狀態(tài)要優(yōu)于對照組,并且腫瘤體積要明顯小于對照組,在使用順鉑聯(lián)合乳酸桿菌作用于荷瘤小鼠之后,能夠有效下調(diào)腫瘤組織中免疫抑制因子TGF-β1及IL-10的表達(dá)水平,提示有可能降低腫瘤微環(huán)境中免疫抑制效應(yīng)。二者聯(lián)合相對于單用化療藥物治療會更高效且毒副作用少。所以其臨床研究價值較高。
【關(guān)鍵詞】：順鉑 乳酸桿菌 宮頸癌 白細(xì)胞介素-10 轉(zhuǎn)化生長因-β1
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-12
• 材料和方法12-20
• 結(jié)果20-22
• 附圖22-26
• 附表26-28
• 討論28-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 綜述 腫瘤微環(huán)境與腫瘤免疫耐受36-49
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 致謝49-50
• 個人簡歷50

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 肖冰冰;廖秦平;;陰道微生態(tài)研究進展[J];國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2011年06期

2 薛e，

本文編號：790517