本文關(guān)鍵詞：p53調(diào)節(jié)EGFR-TKI對三陰性乳腺癌細(xì)胞敏感性研究

  更多相關(guān)文章： 三陰性乳腺癌 MDA-MB-468細(xì)胞系 p53基因突變 重組人p53腺病毒 表皮生長因子受體 酪氨酸激酶抑制劑

【摘要】：目的與背景：乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤,亦是女性主要的癌癥死亡原因。根據(jù)雌激素受體(Estrogen receptor, ER)、孕激素受體(Progesterone receptor, PR)、人表皮生長因子受體(Human epidermal growth factor receptor 2, HER-2)及Ki-67表達(dá)不同將乳腺癌分為不同的分子亞型。三陰性乳腺癌(Triple-negative breast cancer, TNBC)是一種特殊的乳腺癌分子亞型,其主要特點為ER、PR、HER2均陰性表達(dá)。目前,TNBC缺乏內(nèi)分泌和針對HER-2靶向治療機會,化療是治療TNBC的主要策略,預(yù)后比其他類型的乳腺癌差。乳腺癌中表皮生長因子受體(Epidermal growth factor receptor, EGFR)過度表達(dá)與腫瘤體積大、分化差以及預(yù)后不良有關(guān),乳腺癌各種分子亞型均可見EGFR的過度表達(dá),但TNBC中EGFR的表達(dá)率(約70%)明顯高于其他各分子亞型。吉非替尼為小分子酪氨酸激酶抑制劑(TKI),目前臨床主要應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌的治療,其在乳腺癌中的應(yīng)用已經(jīng)展開臨床研究,但是療效不明顯。乳腺癌患者對EGFR-TKI耐藥是該類藥物應(yīng)用于乳腺癌的重要障礙。乳腺癌中約30%的患者表現(xiàn)為p53基因突變,而80%TNBC存在p53高表達(dá)。有研究稱p53基因突變可能與非小細(xì)胞肺癌對EGFR-TKI耐藥有關(guān)。MDA-MB-468細(xì)胞系為TNBC細(xì)胞系,其特點為p53基因突變及EGFR過度表達(dá),該細(xì)胞系對EGFR-TKI不敏感。本課題旨在運用p53腺病毒(攜帶野生型p53)轉(zhuǎn)導(dǎo)MDA-MB-468細(xì)胞系,觀測EGFR-TKI對TNBC細(xì)胞系MDA-MB-468細(xì)胞的敏感性影響。方法首先收集2012年1月至2013年8月就診于山東省腫瘤防治研究院乳腺病中心行手術(shù)治療初治浸潤性乳腺癌病例共264例。分析各種分子亞型乳腺癌中p53與EGFR的表達(dá)及二者的相關(guān)性。然后采用Ad-p53(重組p53腺病毒)和EGFR-TKI(吉非替尼)處理MDA-MB-468細(xì)胞系,四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測細(xì)胞增殖的變化；克隆形成實驗檢測細(xì)胞的克隆形成能力；流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的變化；Westernblot檢測p53及EGFR的表達(dá),PI3K/Akt通路及凋亡通路相關(guān)蛋白的表達(dá)；裸鼠移植瘤實驗觀察Ad-p53聯(lián)合吉非替尼抗裸鼠移植瘤的作用。結(jié)果臨床病理資料分析顯示,TNBC中p53突變表達(dá)與EGFR過度表達(dá)明顯高于二者在其他分子分型中的表達(dá),p53突變與EGFR過度表達(dá)在TNBC中呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)。MTT結(jié)果顯示,Ad-p53感染MDA-MB-468細(xì)胞系后,該細(xì)胞對吉非替尼敏感性增加。流式細(xì)胞技術(shù)檢測結(jié)果顯示：對照組、Ad-p53組、吉非替尼組及聯(lián)合組細(xì)胞凋亡率分別為8.5%、17.4%、20.5%及32.6%,細(xì)胞G2/M周期比率分別為21.9%、31.5%、45.4%及65.3%。Ad-p53聯(lián)合吉非替尼處理細(xì)胞后細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期檢測結(jié)果顯示：細(xì)胞凋亡明顯增加,G2/M期周期阻滯明顯,具有統(tǒng)計學(xué)差異(均P0.05)。Western blot檢測結(jié)果顯示,Ad-p53聯(lián)合吉非替尼,p-Akt蛋白水平明顯下調(diào)(F=105.7,P0.01),caspase-9以及cleaved caspase-3蛋白活性增加(均P0.01)。裸鼠乳腺癌移植瘤中Ad-p53組、吉非替尼組及聯(lián)合組抑瘤率(Tumor inhibition rate, TIR)分別為35.7%、28.7%及74.4%。Ad-p53及吉非替尼聯(lián)合用藥能夠明顯縮小腫瘤體積,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.p53基因突變與EGFR在TNBC過度表達(dá),且二者表達(dá)呈明顯的正相關(guān)。2.p53突變可能是三陰性乳腺癌對TKI耐藥的重要因素。3.野生型p53基因可能通過下調(diào)PI3K/Akt通路活性增加MDA-MB-468細(xì)胞系對TKI的敏感性,并啟動caspase級聯(lián)反應(yīng)促進(jìn)細(xì)胞凋亡。4.修飾p53基因表達(dá)可以調(diào)節(jié)TNBC細(xì)胞對TKI的靶向耐藥。
【關(guān)鍵詞】：三陰性乳腺癌 MDA-MB-468細(xì)胞系 p53基因突變 重組人p53腺病毒 表皮生長因子受體 酪氨酸激酶抑制劑
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 研究生導(dǎo)師和課題指導(dǎo)小組介紹5-7
• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 主要符號表11-12
• 第一章 前言12-15
• 第二章 材料與方法15-23
• 2.1 實驗試劑與儀器15-16
• 2.2 實驗資料與方法16-23
• 第三章 結(jié)果23-30
• 3.1 臨床資料分析結(jié)果23-25
• 3.2 體外實驗結(jié)果25-28
• 3.3 體內(nèi)實驗結(jié)果28-30
• 第四章 討論30-35
• 4.1 三陰性乳腺癌的認(rèn)識30
• 4.2 浸潤性乳腺癌p53突變與EGFR過度表達(dá)及其相關(guān)性分析30-31
• 4.3 p53調(diào)節(jié)EGFR-TKI對三陰性乳腺癌細(xì)胞敏感性的研究31-35
• 第五章 結(jié)論35-36
• 第六章 參考文獻(xiàn)36-40
• 綜述40-49
• 參考文獻(xiàn)47-49
• 攻讀學(xué)位期間取得的研究成果49-50
• 致謝50

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1 陸書生;孫德彬;孫蕾;;吉非替尼治療肺癌16例臨床分析[J];臨床肺科雜志;2008年01期

2 鐘延霞;陳艷雪;王寶君;;反相高效液相色譜法測定吉非替尼的含量[J];河北師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2010年04期

3 許坤;;吉非替尼在老年非小細(xì)胞肺癌中的療效觀察[J];中華全科醫(yī)學(xué);2012年12期

4 玄香蘭;安昌善;周彩存;;肝細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)敏感非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞對吉非替尼耐藥及機制的研究[J];中國肺癌雜志;2013年01期

5 李小龍;黨亞正;陸婉玲;;低分割放療聯(lián)合吉非替尼治療老年非小細(xì)胞肺癌療效觀察[J];西部醫(yī)學(xué);2013年09期

6 王燕;王穎;王彬;王子平;張湘茹;儲大同;孫燕;;吉非替尼治療非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移的初步結(jié)果[J];中國肺癌雜志;2006年05期

7 陳玲;陳強;葉韻斌;;吉非替尼敏感性預(yù)測指標(biāo)的研究現(xiàn)狀[J];中國新藥與臨床雜志;2006年11期

8 David W Sharp;接英;馬建華;;由吉非替尼所引發(fā)的持續(xù)性討論[J];科學(xué)觀察;2006年06期

9 徐朝江;王卓;姚遠(yuǎn)兵;;吉非替尼治療肺癌的研究進(jìn)展[J];醫(yī)藥導(dǎo)報;2007年03期

10 王春敏;李煒;仇綴百;;靶向抗腫瘤藥物吉非替尼的臨床研究進(jìn)展[J];中國臨床藥學(xué)雜志;2007年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李陶;李玉;;吉非替尼,厄羅替尼,埃克替尼在濟(jì)南地區(qū)2家三甲醫(yī)院的應(yīng)用調(diào)查[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

2 徐瑞彤;束永前;;氟維司群逆轉(zhuǎn)耐吉非替尼非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株耐藥性的機制探討[A];2010’全國腫瘤分子標(biāo)志及應(yīng)用學(xué)術(shù)研討會暨第五屆中國中青年腫瘤專家論壇論文匯編[C];2010年

3 張琳琳;吳志浩;尤嘉琮;李洋;劉彬;祖玲玲;李雪冰;常銳;周清華;;上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在尼古丁誘導(dǎo)肺癌吉非替尼獲得性耐藥中的作用及分子機制[A];第13屆全國肺癌學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2013年

4 陳良安;孔進(jìn);田慶;范保星;劉又寧;;吉非替尼治療中晚期非小細(xì)胞肺癌30例分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國呼吸病學(xué)術(shù)會議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

5 陳雪琴;陳達(dá)棟;李鑫;潘月龍;;吉非替尼所致嚴(yán)重肝損害后再使用一例[A];2013年第六屆國家級分子靶點藥物治療新進(jìn)展學(xué)習(xí)班暨浙江省腫瘤化療學(xué)術(shù)年會論文集[C];2013年

6 王芳;付占昭;顧濤;高立明;;吉非替尼耐藥的非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移繼續(xù)原藥治療有效的4例報道[A];中國腫瘤內(nèi)科進(jìn)展 中國腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

7 傅健飛;王蓓;;吉非替尼治療晚期非小細(xì)胞肺癌敏感性預(yù)測指標(biāo)[A];腫瘤化學(xué)治療新進(jìn)展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2007年

8 莊洪卿;秦培艷;袁智勇;王平;;吉非替尼不同給藥時間放射增敏作用體外研究[A];中華醫(yī)學(xué)會放射腫瘤治療學(xué)分會六屆二次暨中國抗癌協(xié)會腫瘤放療專業(yè)委員會二屆二次學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

9 肖西祥;;以吉非替尼為例淺談我國藥企的專利布局策略[A];發(fā)展知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)業(yè)，，支撐創(chuàng)新型國家建設(shè)-2012年中華全國專利代理人協(xié)會年會第三屆知識產(chǎn)權(quán)論壇論文選編(第一部分)[C];2011年

10 張國毅;;吉非替尼相關(guān)皮疹1例[A];華東六省一市第八次皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;吉非替尼：對東方人群情有獨鐘[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2005年

2 記者 靖九江;我國研究肯定吉非替尼治療肺癌效果[N];中國醫(yī)藥報;2006年

3 馮友根;靶向治療腫瘤藥吉非替尼[N];中國醫(yī)藥報;2004年

4 凌棟;國際臨床腫瘤專家高度評價埃克替尼[N];中國醫(yī)藥報;2011年

5 盛文;吉非替尼增加腫瘤出血發(fā)生率[N];中國醫(yī)藥報;2007年

6 ;吉非替尼治療晚期非小細(xì)胞肺癌有成本效益[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2004年

7 本報特約撰稿人 陸志誠;進(jìn)入靶向抗癌新時代[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2004年

8 侯嘉;關(guān)于吉非替尼的SIGN研究[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2005年

9 廣東省人民醫(yī)院副院長 廣東省肺癌研究所所長 吳一龍　本報記者 吳剛;別讓醫(yī)學(xué)研究遠(yuǎn)離患者[N];健康報;2011年

10 張旭;阿斯利康腫瘤靶向藥物在歐洲獲批[N];中國醫(yī)藥報;2009年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 董嵩;依維莫司聯(lián)合吉非替尼抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系的效果和機制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

2 潘馳;吉非替尼耐藥型非小細(xì)胞肺癌中順鉑聯(lián)合吉非替尼的協(xié)同作用機制研究[D];浙江大學(xué);2015年

3 平偉;MicroRNA-181a通過靶向GAS7對非小細(xì)胞肺癌吉非替尼敏感性的影響及機制研究[D];華中科技大學(xué);2015年

4 王平;吉非替尼治療非小細(xì)胞肺癌的臨床療效和預(yù)測因素分析及其致肺纖維化作用的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

5 陳佳;成纖維細(xì)胞對NSCLC細(xì)胞HCC827吉非替尼敏感性的影響及相關(guān)機制的探討[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

6 王燕;吉非替尼靶向治療晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床療效預(yù)測和預(yù)后因素研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

7 劉雨桃;吉非替尼治療晚期非小細(xì)胞肺癌的療效與生存分析[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

8 楊小兵;扶正抗癌方對吉非替尼治療晚期非小細(xì)胞肺癌的增效研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2014年

9 廖瑜倩;凋亡通路及藥物代謝酶基因多態(tài)與吉非替尼治療的進(jìn)展期非小細(xì)胞肺癌患者療效及生存的相關(guān)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

10 周麗娜;18F-FDG microPET-CT用于監(jiān)測裸鼠移植瘤吉非替尼療效的實驗研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

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1 鄭悅;康萊特注射液聯(lián)合吉非替尼對人肺腺癌NCI-H1975細(xì)胞株的作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 李煥煥;塞來昔布聯(lián)合吉非替尼在非小細(xì)胞肺癌中的實驗研究[D];石河子大學(xué);2015年

3 武玲;不同氧濃度下吉非替尼對人肺癌細(xì)胞的影晌[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

4 鄭杰;表皮生長因子受體（EGFR）酪氨酸激酶抑制劑吉非替尼的合成與優(yōu)化[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 沈明輝;6-位修飾的吉非替尼衍生物的合成與活性研究[D];黑龍江大學(xué);2015年

6 劉亮;吉非替尼按時辰給藥對荷瘤裸鼠的藥效學(xué)影響及機制研究[D];青島大學(xué);2015年

7 紀(jì)潔;吉非替尼對奧沙利鉑體外抗睪丸癌作用的影響及可能機制[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2015年

8 李建軍;抗腫瘤藥物吉非替尼的合成[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 邱華成;伊立替康與吉非替尼聯(lián)合應(yīng)用治療肝癌的藥效學(xué)及機制研究[D];浙江工業(yè)大學(xué);2015年

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本文編號：771840