本文關(guān)鍵詞：c-Myc調(diào)節(jié)低氧微環(huán)境下結(jié)腸癌細(xì)胞的5-氟尿嘧啶敏感性試驗

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【摘要】：結(jié)腸癌是西歐、北美等發(fā)達(dá)國家最常見的惡性腫瘤,也是我國九大常見惡性腫瘤之一。在過去30多年的時間里,包括我國在內(nèi)的多數(shù)國家或地區(qū)結(jié)腸癌發(fā)病率呈上升趨勢。以5-氟尿嘧啶(5-Fu)為基礎(chǔ)的化療有效降低了結(jié)腸癌患者的死亡率,但對5-氟尿嘧啶敏感性下降卻給結(jié)腸癌的化療帶來了新的挑戰(zhàn)和困難。另外,隨著結(jié)腸癌腫瘤快速生長將不可避免發(fā)生腫瘤中心區(qū)的壞死和低氧狀態(tài),這種低氧微環(huán)境也將降低腫瘤細(xì)胞的化療敏感性。我們前期另外研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),慢性低氧微環(huán)境下,在低氧誘導(dǎo)因子和泛素化的調(diào)節(jié)下,結(jié)腸癌細(xì)胞中c-Myc的表達(dá)明顯下降,提示低氧環(huán)境中c-Myc的表達(dá)可能與腫瘤敏感性有關(guān)。 本課題采用現(xiàn)代細(xì)胞與分子生物學(xué)技術(shù),闡明低氧微環(huán)境下結(jié)腸癌細(xì)胞株5-氟尿嘧啶的敏感性下降的現(xiàn)象,并通過建立過表達(dá)c-Myc的結(jié)腸癌細(xì)胞系,了解結(jié)腸癌細(xì)胞過表達(dá)c-Myc與對5-氟尿嘧啶敏感性的關(guān)系。 方法和材料： 1.檢測常氧和低氧環(huán)境下不同濃度梯度5-Fu對結(jié)腸癌細(xì)胞的抑制率,計算ICso,比較常氧和低氧下不同濃度5-Fu作用于結(jié)腸癌細(xì)胞敏感性的差異。 2.選擇結(jié)腸癌細(xì)胞株RKO,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染c-Myc質(zhì)�；蛲庠葱蕴砑臃核鼗种苿㎝G132,觀察慢性低氧微環(huán)境下5-氟尿嘧啶敏感性的影響,并分析其可能機(jī)制。 結(jié)果： 1.結(jié)果提示低氧(1%02)培養(yǎng)條件下,5-Fu對結(jié)腸癌細(xì)胞(包括HT29, HCT116, SW480, SW620, RKO和Lovo)作用的IC50較常氧(21%02)培養(yǎng)時顯著升高。 2. c-Myc表達(dá)水平與5-Fu藥物敏感性相關(guān),穩(wěn)定轉(zhuǎn)染c-Myc的結(jié)腸癌細(xì)胞RKO細(xì)胞中c-Myc表達(dá)明顯增加,伴隨著5-Fu化療敏感性的增強(qiáng)。 3.0.1uM泛素化抑制劑MG132加入RKO細(xì)胞后c-Myc表達(dá)增加,低氧下結(jié)腸癌細(xì)胞對5-Fu敏感性亦增強(qiáng)。 結(jié)論： 1.低氧比較常氧條件下,結(jié)腸癌細(xì)胞(包括HT29, HCT116, SW480, SW620, RKO, Lovo)對5-Fu的敏感性下降。 2.c-Myc基因表達(dá)水平與結(jié)腸癌細(xì)胞低氧條件下對5-Fu敏感性有關(guān),過表達(dá)c-Myc基因或使用抑制泛素-蛋白酶體降解藥物MG132可提高細(xì)胞周期化療藥物5-Fu的增敏作用。
【關(guān)鍵詞】：c-Myc 結(jié)腸癌 低氧 5-氟尿嘧啶 敏感性
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.35
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 目次9-11
• 前言11-13
• 第一部分 低氧下結(jié)腸癌細(xì)胞對5-Fu耐藥性的影響13-22
• 1. 材料和方法14-17
• 1.1 主要試劑與儀器14-15
• 1.2 細(xì)胞培養(yǎng)15-16
• 1.3 研究方法和手段16-17
• 2 結(jié)果17-19
• 3 討論19-21
• 4 結(jié)論21-22
• 第二部分 結(jié)腸癌細(xì)胞穩(wěn)定過表達(dá)c-Myc后對5-Fu的敏感性的影響22-37
• 1. 材料和方法23-31
• 1.1 主要試劑與儀器23-24
• 1.2 研究方法和手段24-31
• 2 結(jié)果31-34
• 2.1 不同結(jié)腸癌細(xì)胞株c-Myc的表達(dá)31
• 2.2 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染c-Myc的RKO細(xì)胞克隆WB結(jié)果31-32
• 2.3 c-Myc穩(wěn)定過表達(dá)后細(xì)胞活性變化32
• 2.4 MG132加入后5-Fu耐藥的變化32-34
• 3 討論34-36
• 4 結(jié)論36-37
• 全文結(jié)論37-38
• 創(chuàng)新點38-39
• 研究不足之處39-40
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 綜述44-56
• 參考文獻(xiàn)50-56
• 作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果56-57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 樊占兵;;術(shù)前區(qū)域動脈灌注生長抑素和黃芪對結(jié)腸癌細(xì)胞增殖和凋亡及血管形成的影響[J];河北醫(yī)藥;2012年02期

2 李國元;格日力;;腫瘤細(xì)胞低氧反應(yīng)的分子機(jī)制[J];中華腫瘤防治雜志;2006年17期

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本文編號：770036