本文關(guān)鍵詞：FBXW7在腎癌細(xì)胞凋亡機(jī)制中的初步研究

  更多相關(guān)文章： FBXW7 腎細(xì)胞癌 周期 凋亡 增殖

【摘要】：研究目的:(1)探究腎癌組織和癌旁組織中FBXW7表達(dá)情況。探討FBXW7在腎癌組織和癌旁組織中有無差異,以及對病人預(yù)后的影響。(2)通過CCK8、平板克隆實(shí)驗(yàn),流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期和凋亡,檢測過表達(dá)FBXW7的腎癌細(xì)胞系的細(xì)胞活力和增殖能力。(3)通過q PCR、Western blot來探究FBXW7和c-myc,c-Jun之間的關(guān)系。方法:收集105例來自于中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院和暨南大學(xué)華僑醫(yī)院2008年到2012年腎癌和對應(yīng)的癌旁組織的病理樣本,應(yīng)用免疫組化技術(shù),對樣本進(jìn)行染色,通過樣本染色的深淺來判斷FBXW7表達(dá)量的多少。通過q PCR來檢測腎癌細(xì)胞系A(chǔ)CHN,A704對照組和實(shí)驗(yàn)組FBXW7的m RNA表達(dá)量。用Western blot來檢測腎癌細(xì)胞系A(chǔ)CHN,A704對照組和實(shí)驗(yàn)組FBXW7的蛋白表達(dá)的量,以及c-myc,c-Jun的蛋白表達(dá)的量。通過平板克隆、CCK8等功能實(shí)驗(yàn)比較對照組和實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞克隆數(shù),以及OD值,還有細(xì)胞的凋亡和細(xì)胞周期的變化來判斷高表達(dá)FBXW7對腎癌細(xì)胞的增殖能力的影響。結(jié)果:病理樣本免疫組化檢測蛋白表達(dá)發(fā)現(xiàn),癌組織多呈淡染,癌旁組織多呈深染,通過免疫組化積分比較(P0.0001)這表明癌組織中FBXW7表達(dá)遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于癌旁正常組織。腎透明細(xì)胞癌FBXW7低表達(dá)組(n=22)和高表達(dá)組(n=59)的術(shù)后的生存。高表FBXW7組的生存率要明顯好于低表達(dá)組(log-rank test,P0.001)。通過western和Real-Time q PCR在細(xì)胞系中的檢測發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)染FBXW7質(zhì)粒的ACNH,A704細(xì)胞FBXW7 m RNA和蛋白比對照組明顯增多,而c-myc,c-Jun蛋白比對照組明顯減少。轉(zhuǎn)染入FBXW7質(zhì)粒的細(xì)胞450nm波長的吸光度值明顯要低于轉(zhuǎn)染入空質(zhì)粒的對照組,細(xì)胞增殖活力明顯變?nèi)?Vector vs Plasmid A704:1.327±0.036vs1.035±0.042 P0.05;ACHN:1.403±0.024vs1.166±0.029 P0.05)。實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞克隆數(shù)超過50個的數(shù)量明顯少于對照組,轉(zhuǎn)入FBXW7質(zhì)粒的細(xì)胞的增殖能力受到了明顯的抑制。(Vector vs Plasmid ACHN:567±19 vs 412±21P0.05;A704:279±13 vs144±7 P0.05)。流式細(xì)胞儀用PI法檢測細(xì)胞周期,高表達(dá)FBXW7的ACHN,A704 G0/G1期所占的比例要高于對照組(Vector vs Plasmid ACHN 51.93%vs 63.25%P0.05;A704 60.31%vs68.32%P0.05)。高表達(dá)FBXW7的ACHN,A704細(xì)胞早期和晚期凋亡比對照組多(Vector vs Plasmid ACHN 5.1%vs 8.5%P0.05;A704 14.1%vs20.4%P0.05)結(jié)論:(1)FBXW7在癌組織中表達(dá)水平低于癌旁組織,高表達(dá)FBXW7的腎癌細(xì)胞系的活力和增殖能力明顯低于對照組。腎透明細(xì)胞癌FBXW7低表達(dá)組(n=22)和高表達(dá)組(n=59)的術(shù)后的生存。高表FBXW7組的生存率要明顯好于低表達(dá)組(log-rank test,P0.001)。結(jié)果表明FBXW7可能發(fā)揮某種抑癌作用。(2)通過western發(fā)現(xiàn),c-myc,c-Jun的表達(dá)量隨著FBXW7 的增多而減少。表明FBXW7可能通過減少c-myc,c-Jun來發(fā)揮抑癌作用。
【關(guān)鍵詞】：FBXW7 腎細(xì)胞癌 周期 凋亡 增殖
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 中英文縮略詞表11-13
• 前言13-17
• 材料與方法17-26
• 結(jié)果26-32
• 討論32-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 文獻(xiàn)綜述 過表達(dá)FBXW7抑制腎癌細(xì)胞的增殖促進(jìn)凋亡42-52
• 參考文獻(xiàn)50-52
• 成果附錄52-53
• 致謝53

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 席志軍,俞莉章,郭應(yīng)祿,張凱,姜學(xué)軍,張志文;白細(xì)胞介素-6與腎癌細(xì)胞生長關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2000年04期

2 葉雄俊,張志文,林桂亭,金桂花,陳培拉,韓亮,黃世思,艾軍魁,辛殿祺,郭應(yīng)祿,常智杰;激活轉(zhuǎn)錄因子5在腎癌細(xì)胞系中的表達(dá)及意義[J];中華泌尿外科雜志;2003年04期

3 宋東奎,潘周輝,楊太森;人反義血管內(nèi)皮生長因子基因表達(dá)對腎癌細(xì)胞的影響[J];中華泌尿外科雜志;2003年08期

4 楊風(fēng)光;葉烈夫;林樂;李濤;何延瑜;張志文;郭應(yīng)祿;;過氧化物酶體增殖激活物受體γ配體對腎癌細(xì)胞血管生成的影響[J];福建醫(yī)藥雜志;2009年06期

5 龔明軍;;一種腎癌細(xì)胞基因復(fù)制表達(dá)順序研究的新方法[J];中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新;2012年26期

6 潘李珍，，張漪;人體腎癌細(xì)胞培養(yǎng)1例報(bào)告[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1996年01期

7 吳偉成,巖村正嗣,小柴健;甲狀旁腺素相關(guān)蛋白在腎癌細(xì)胞中的表達(dá)及調(diào)節(jié)作用[J];中華泌尿外科雜志;1997年07期

8 許寧,石愛平,趙忠文,王乃義;腎癌細(xì)胞的凋亡與調(diào)控因子的表達(dá)[J];中華外科雜志;1998年07期

9 王威,劉梁,董雪,徐香蘭,沈彬,寇慧珠,劉濤,吳明明,虞頌庭;鈣粘蛋白E在腎癌細(xì)胞中的表達(dá)[J];中國腫瘤臨床;2000年04期

10 施浩強(qiáng);于德新;;干擾素在腎癌細(xì)胞中的生物學(xué)效應(yīng)[J];國際泌尿系統(tǒng)雜志;2006年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 王威;劉;董雪;徐香蘭;沈彬;寇慧珠;劉濤;吳明明;虞頌庭;;鈣粘蛋白E在腎癌細(xì)胞中的表達(dá)[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會論文集[C];2000年

2 王志華;胡志全;葉章群;莊乾元;楊為民;陳志強(qiáng);劉繼紅;;樹突狀細(xì)胞的體外擴(kuò)增及培養(yǎng)上清液對腎癌細(xì)胞的作用[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

3 申文江;孫凌飛;孫新臣;朱麗紅;邵彥;黃淵;;安替可對腎癌細(xì)胞的放射敏感性影響[A];第八屆全國中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2000年

4 章小平;錢曉輝;李炎生;曾四平;肖亞軍;趙軍;曾甫清;肖傳國;;VHL表達(dá)逆轉(zhuǎn)腎癌細(xì)胞的TRAIL耐受性[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

5 楊清滔;谷江;張永春;楊永安;王楠;朱致暉;祝慶亮;;高表達(dá)HIF-1α對腎癌細(xì)胞增殖及細(xì)胞內(nèi)STC-1、Ca2+水平影響的研究[A];2013年貴州省泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

6 丁曉飛;沈茂;嚴(yán)巧娣;陳光;;pVHL調(diào)控NEK-8維持腎癌細(xì)胞原纖毛結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的機(jī)制研究[A];2013醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十三屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2013年

7 李金鋒;王國民;戎瑞明;朱同玉;;SiRNA對腎癌細(xì)胞系COX-2基因的抑制作用及其質(zhì)粒載體的構(gòu)建[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

8 朱致暉;谷江;肖海濤;張永春;羅明俊;楊永安;王楠;楊清滔;;人類斯鈣素蛋白1對腎癌細(xì)胞中STC-1、HIF-1α及Ca2+影響的研究[A];2013年貴州省泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

9 申文江;孫凌飛;孫新臣;朱麗紅;邵彥;黃淵;;安替可對腎癌細(xì)胞FasR、FasL和Bel-2基因表達(dá)的影響及意義[A];第八屆全國中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2000年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 記者 王丹;維生素C可讓腎癌細(xì)胞因“饑餓”死亡[N];健康報(bào);2014年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮陳陳;自噬聯(lián)合mTOR通路或磷酸戊糖途徑雙重抑制對腎細(xì)胞癌治療的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 陳鵬亮;miR-199靶向調(diào)控ROCK1影響腎癌細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡的機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

3 王志峰;索拉非尼對腎癌細(xì)胞系786-0干性相關(guān)表達(dá)影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

4 洪正東;Rock2通過β-catenin/TCF4信號通路調(diào)控SCARA5表達(dá)影響腎癌細(xì)胞增殖的研究[D];南昌大學(xué);2016年

5 朱小軍;5-氮雜-2’-脫氧胞苷和順鉑通過去甲基化作用及增強(qiáng)凋亡酶激活因子1的活性協(xié)同誘導(dǎo)腎癌細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

6 張洪俠;miR-137在腎細(xì)胞癌中生物學(xué)功能及相關(guān)機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2016年

7 杜賢進(jìn);藍(lán)舌病毒湖北株選擇性誘導(dǎo)腎癌細(xì)胞死亡及其機(jī)制的研究[D];武漢大學(xué);2010年

8 楊林;腎癌細(xì)胞來源exosomes的提取鑒定及對腎癌惡性演進(jìn)的影響和機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

9 畢建斌;腎癌細(xì)胞中環(huán)氧合酶-2的表達(dá)及非甾體類抗炎藥NS398對腎癌細(xì)胞生長抑制作用的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

10 張琦;紫杉醇或γ線放射介導(dǎo)的自噬現(xiàn)象對Folliculin基因缺陷腎癌細(xì)胞放化療敏感性影響的研究[D];山東大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐榮;腎癌細(xì)胞中內(nèi)源性Wnt以自分泌的方式刺激Fzd7的胞吞作用[D];蘇州大學(xué);2015年

2 吳本鶴;白介素-2聯(lián)合不同劑量索拉菲尼對腎癌細(xì)胞的體內(nèi)外殺傷效應(yīng)的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李麗;NFATs-ET1通路在腎癌細(xì)胞786O增殖和遷移中的作用及其機(jī)制[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

4 韓慶杰;siRNA沉默DAD1基因表達(dá)對腎癌細(xì)胞A498增殖與侵襲能力的影響[D];南華大學(xué);2015年

5 熊虎;沉默ACTN1基因表達(dá)能抑制腎癌細(xì)胞的生長且誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[D];蘭州大學(xué);2016年

6 史培X;Keap1在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)及其作用的研究[D];山東大學(xué);2016年

7 黃巧麗;來氟米特對腎癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D];浙江師范大學(xué);2016年

8 張瓊;白藜蘆醇對腎癌細(xì)胞的影響及機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

9 付鈺;FBXW7在腎癌細(xì)胞凋亡機(jī)制中的初步研究[D];南華大學(xué);2016年

10 張黎明;熱休克腎癌細(xì)胞凍融瘤苗特異性殺傷效應(yīng)的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

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