發(fā)布時(shí)間：2017-08-30 17:37

  本文關(guān)鍵詞：口腔鱗癌中上皮—間充質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的初探

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【摘要】：目的運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法分析在口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中E-鈣黏蛋白、波形蛋白、β-聯(lián)蛋白及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1的表達(dá)情況,并結(jié)合運(yùn)用免疫熒光和Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)體外培養(yǎng)的SCC-9和Tca8113兩種口腔鱗癌細(xì)胞中上述四種標(biāo)記物的表達(dá)與其侵襲性的相關(guān)性,探討口腔鱗狀細(xì)胞癌中上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的基本表現(xiàn),為進(jìn)一步探究上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象及研究口腔鱗狀細(xì)胞癌預(yù)防提供理論基礎(chǔ)。方法(1)組織學(xué)實(shí)驗(yàn):收集89例口腔鱗狀細(xì)胞癌組織石蠟標(biāo)本及20例正�？谇火つ�(biāo)本,將89例口腔鱗癌分為I級(jí)(25例)、II級(jí)(34例)、III級(jí)(30例),分別進(jìn)行E-鈣黏蛋白、波形蛋白、β-聯(lián)蛋白及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1四種蛋白的免疫組化染色。用半定量法評(píng)價(jià)免疫組化結(jié)果,統(tǒng)計(jì)分析各項(xiàng)指標(biāo)與口腔鱗狀細(xì)胞癌分化程度之間的關(guān)系,以及各項(xiàng)指標(biāo)間的相關(guān)性;(2)細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn):①體外培養(yǎng)SCC-9及Tca8113口腔鱗癌細(xì)胞,制作細(xì)胞爬片,進(jìn)行上述四種蛋白的免疫熒光染色,在熒光顯微鏡下每張爬片隨機(jī)選擇5個(gè)視野拍照。計(jì)算每張照片的平均熒光強(qiáng)度,統(tǒng)計(jì)分析兩種細(xì)胞間各蛋白表達(dá)的差異;②體外饑餓培養(yǎng)SCC-9及Tca8113口腔鱗癌細(xì)胞12小時(shí)后種于Transwell上室內(nèi),在下室加入10%胎牛血清培養(yǎng)液。培養(yǎng)36小時(shí)后用結(jié)晶紫染色,計(jì)算細(xì)胞穿過小室膜底部的數(shù)目。結(jié)果(1)組織學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:①每組數(shù)據(jù)經(jīng)S-W檢驗(yàn),P0.05,顯示數(shù)據(jù)不服從正態(tài)分布,則用中位數(shù)加減四分位數(shù)間距(M±QR)表示。E-鈣黏蛋白在正常黏膜中評(píng)分中位數(shù)為9.00,OSCC組中評(píng)分分別為9.00、6.00和6.00,正常組與OSCC組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.211,P=0.000),評(píng)分與分化程度有關(guān)(P=0.000);波形蛋白在正常組織中評(píng)分為0.00,在OSCC I、II、III級(jí)組中評(píng)分分別為0.00、0.00和4.00,正常組與OSCC組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.675,P=0.000),評(píng)分與分化程度有關(guān)(P=0.000);β-聯(lián)蛋白在正常組織中評(píng)分為9.00,在OSCC I、II、III級(jí)組中評(píng)分分別為3.00、4.00和3.00,正常組與OSCC組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-6.300,P=0.000),評(píng)分與分化程度有關(guān)(P=0.017);TGF-β1在正常組織中評(píng)分為2.00,在OSCC I、II、III級(jí)組中評(píng)分分別為3.00、4.00和6.00,正常組與OSCC組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.329,P=0.000),評(píng)分與分化程度有關(guān)(P=0.000);②四個(gè)指標(biāo)相關(guān)關(guān)系:E-鈣黏蛋白與β-聯(lián)蛋白之間存在顯著正相關(guān)(r=0.327,P=0.002),與波形蛋白間存在顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.386,P=0.001),與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1間存在顯著負(fù)相關(guān)性(r=-0.304,P=0.004);波形蛋白與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1間存在顯著正相關(guān)(r=0.401,P=0.000);(2)細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:①體外培養(yǎng)癌細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光實(shí)驗(yàn)中,SCC-9中E-鈣黏蛋白未觀察到陽性熒光表達(dá),波形蛋白、β-聯(lián)蛋白和轉(zhuǎn)換生長(zhǎng)因子-β1平均熒光強(qiáng)度均數(shù)分別為0.0531、0.0570和0.0575;Tca8113中E-鈣黏蛋白、波形蛋白、β-聯(lián)蛋白和轉(zhuǎn)換生長(zhǎng)因子-β1平均熒光強(qiáng)度均數(shù)分別為0.00145、0.0421、0.0500和0.0499;E-鈣黏蛋白在SCC-9及Tca8113中的表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-1.395,P=0.176);波形蛋白在SCC-9及Tca8113中的表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.125,P=0.003);β-聯(lián)蛋白在SCC-9及Tca8113中的表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.581,P=0.014);轉(zhuǎn)換生長(zhǎng)因子-β1在SCC-9及Tca8113中的表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.495,P=0.016);②癌細(xì)胞Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)中,SCC-9及Tca8113穿過基質(zhì)膠進(jìn)入小室底的細(xì)胞均數(shù)分別為57.93和42.47,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.309,P=0.003)。結(jié)論(1)E-鈣黏蛋白和β-聯(lián)蛋白在口腔鱗癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào),波形蛋白表達(dá)上調(diào),轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1總體表達(dá)有上調(diào)趨勢(shì),提示在口腔腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中出現(xiàn)了上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象;(2)口腔鱗癌細(xì)胞膜上,β-聯(lián)蛋白與E鈣黏蛋白之間表達(dá)有顯著的正相關(guān)性,與波形蛋白之間有負(fù)相關(guān)趨勢(shì);轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1與E-鈣黏蛋白之間有顯著的負(fù)相關(guān)性,與波形蛋白之間有顯著正相關(guān)性,提示β-聯(lián)蛋白和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1在口腔鱗癌的EMT進(jìn)程中發(fā)揮著重要的作用。(3)與Tca8113細(xì)胞相比,SCC-9中波形蛋白、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1和胞核及胞漿中β-聯(lián)蛋白的熒光表達(dá)增加,E-鈣黏蛋白表達(dá)減少,結(jié)合Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)SCC-9穿過基質(zhì)膠的細(xì)胞數(shù)較多的結(jié)果,提示與Tca8113細(xì)胞相比,SCC-9細(xì)胞的間質(zhì)表型更強(qiáng),為進(jìn)一步研究口腔癌細(xì)胞中上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象提供了良好的細(xì)胞模型。
【關(guān)鍵詞】：口腔鱗狀細(xì)胞癌 上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化 免疫組織化學(xué) 免疫熒光 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.8
【目錄】：

• 中文摘要3-6
• 英文摘要6-10
• 前言10-20
• 1. E-cadherin的研究現(xiàn)狀10-12
• 2. Vimentin的研究現(xiàn)狀12-14
• 3. β-catenin的研究現(xiàn)狀14-17
• 4. TGF-β1 的研究現(xiàn)狀17-19
• 5. 本研究的目的及意義19-20
• 實(shí)驗(yàn)材料及方法20-31
• 1. 組織學(xué)實(shí)驗(yàn)20-24
• 2. 細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)24-27
• 3. 結(jié)果分析27-28
• 4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理28-29
• 5. 實(shí)驗(yàn)流程圖29-31
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-37
• 1 石蠟切片免疫組化結(jié)果31-34
• 2 癌細(xì)胞免疫熒光結(jié)果34-36
• 3 癌細(xì)胞Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果36-37
• 討論37-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-53
• 附錄一53-55
• 附錄二55-66
• 在校期間發(fā)表的文章66-67
• 致謝67

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 毛靜芳,韓枋;819例口腔鱗癌病理臨床分析[J];診斷病理學(xué)雜志;2000年02期

2 保森竹,孫[?[?,翁巧鳳,陳永賢;341例口腔鱗癌病例臨床分析[J];青海醫(yī)藥雜志;2001年07期

3 張雷,唐f展，

本文編號(hào)：760700