本文關鍵詞：乳腺癌中MTH1的表達分析及影響上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的機制研究

  更多相關文章： MTH1 乳腺癌 遷移 增殖 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化

【摘要】：研究背景:以往的研究已證實MTH1可以修復活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)造成的損傷,在多種腫瘤細胞中具有較高水平,但是否存在于乳腺癌細胞并對其生物學行為產(chǎn)生影響,尚沒有具體的研究。研究目的:本研究首先探討MTH1在不同惡性程度的乳腺癌細胞系中的表達情況。隨后探究MTH1對于乳腺癌細胞包括遷移能力、侵襲能力以及增殖能力在內(nèi)的生物學行為的影響。最后分析MTH1對乳腺癌細胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial to mesenchymal transition,EMT)的作用。研究方法:本研究首先利用Western Blot、Real-time PCR等方法,探究MTH1在乳腺癌不同惡性程度細胞系中的表達情況,篩選出MTH1高表達與低表達的細胞系。隨后構(gòu)建MTH1過表達質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染MTH1低表達細胞系,并結(jié)合si RNA轉(zhuǎn)染MTH1高表達細胞系,通過MTT比色法、平板克隆形成實驗、Edu細胞增殖實驗以及Transwell遷移實驗分析MTH1對于乳腺癌細胞增值能力、遷移能力和侵襲能力等生物學行為的影響。最后通過Western Blot和免疫熒光等實驗方法探討MTH1對乳腺癌細胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的作用。研究結(jié)果:通過研究發(fā)現(xiàn)MTH1在乳腺癌細胞中的表達水平要明顯高于其在正常乳腺上皮細胞中的表達,并且隨著乳腺癌細胞系惡性程度的提高表達水平呈上升趨勢。通過轉(zhuǎn)染MTH1過表達質(zhì)粒進入MCF-7(MTH1低表達細胞系)提高MTH1的表達水平和轉(zhuǎn)染siRNA進入MDA-MB-231(MTH1高表達細胞系)抑制MTH1的表達,從正方兩方面證明MTH1的表達可以促進乳腺癌細胞的遷移和增值能力,從而提高乳腺癌的生物學惡性程度。除此之外,MTH1還可以上調(diào)間質(zhì)標志蛋白N-cadherin和Vimentin,下調(diào)上皮標志蛋白E-cadherin和cytokeratin,促進乳腺癌細胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。研究結(jié)論:MTH1在乳腺癌細胞中高表達,并且表達水平與腫瘤細胞惡性程度成正相關。此外,MTH1還可促進乳腺癌細胞遷移運動、增殖以及發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。因此MTH1是一種促進乳腺腫瘤發(fā)生并提高其生物學惡性程度的物質(zhì)。
【關鍵詞】：MTH1 乳腺癌 遷移 增殖 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-14
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-14
• 一、MTH1在乳腺癌中高表達14-25
• 1.1 對象和方法14-21
• 1.1.1 細胞系14
• 1.1.2 抗體與試劑14-15
• 1.1.3 耗材與儀器設備15-16
• 1.1.4 實驗所需試劑的配置16-18
• 1.1.5 實驗步驟18-21
• 1.2 結(jié)果21-23
• 1.2.1 MTH1在乳腺癌中的表達水平升高21-22
• 1.2.2 MTH1在不同乳腺癌細胞系中表達水平不同22-23
• 1.3 討論23-24
• 1.3.1 MTH1在乳腺癌中的表達水平升高23
• 1.3.2 MTH1在不同乳腺癌細胞系中表達水平不同23-24
• 1.4 小結(jié)24-25
• 二、MTH1促進乳腺癌細胞的增殖與遷移25-47
• 2.1 對象和方法25-38
• 2.1.1 細胞系25
• 2.1.2 抗體與試劑25-26
• 2.1.3 耗材與儀器設備26-27
• 2.1.4 實驗所需試劑的配置27-28
• 2.1.5 實驗步驟28-38
• 2.2 結(jié)果38-45
• 2.2.1 提高MTH1的表達水平可促進乳腺癌細胞的增殖和遷移38-42
• 2.2.2 降低MTH1的表達水平可抑制乳腺癌細胞的增殖和遷移42-45
• 2.3 討論45-46
• 2.4 小結(jié)46-47
• 三、MTH1誘導乳腺癌細胞發(fā)生EMT47-52
• 3.1 對象和方法47-49
• 3.1.1 細胞系47
• 3.1.2 抗體與試劑47
• 3.1.3 耗材與儀器設備47
• 3.1.4 實驗所需試劑的配置47-48
• 3.1.5 實驗步驟48-49
• 3.2 結(jié)果49-50
• 3.3 討論50-51
• 3.4 小結(jié)51-52
• 結(jié)論52-53
• 參考文獻53-56
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明56-57
• 綜述 MTH1在腫瘤形成及生存中的作用57-66
• 綜述參考文獻62-66
• 致謝66-67
• 個人簡歷67

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本文編號：753562