本文關(guān)鍵詞：異常剪接組織因子在初治急性早幼粒細(xì)胞白血病患者治療前和緩解后mRNA水平的變化及意義

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【摘要】：目的急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)是急性粒細(xì)胞白血病(AML)中的一個(gè)特殊亞型,在早期常伴有嚴(yán)重的凝血異常,是APL患者早期死亡的主要原因。組織因子在凝血過程中發(fā)揮著重要的作用。異常剪接組織因子(alternatively spliced tissue factor,as TF)作為組織因子的一種可溶性剪接體,其在凝血過程中發(fā)揮的作用尚有爭議,且其與腫瘤的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移及腫瘤新生血管形成有著一定的關(guān)系,目前有關(guān)APL患者中的as TF表達(dá)未見報(bào)道。本研究旨在建立as TF表達(dá)量的檢測方法,并對初治APL患者as TF進(jìn)行檢測,比較初診APL患者和緩解(CR)后APL患者as TF的m RNA水平的表達(dá)情況,并探討其臨床意義。方法(1)采用Primer Express 2.0設(shè)計(jì)as TF引物,通過在不同溫度下對急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株NB4 as TF及內(nèi)參基因標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測,建立熒光染料實(shí)時(shí)定量PCR檢測as TF表達(dá)量的方法,并對其進(jìn)行驗(yàn)證。(2)作為分析as TF m RNA表達(dá)水平與APL患者外周血白細(xì)胞數(shù)的關(guān)系:Spearman’s相關(guān)性分析as TF與APL患者白細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性。采用熒光染料實(shí)時(shí)定量PCR(q RT-PCR)技術(shù)動(dòng)態(tài)檢測33例APL患者治療前和緩解后外周血as TF m RNA水平表達(dá)情況,并與15例非APL急性粒細(xì)胞白血病患者及15例正常健康者外周血as TF m RNA表達(dá)水平進(jìn)行比較分析。結(jié)果(1)成功建立了采用q PCR技術(shù)檢測as TF m RNA方法,并對其進(jìn)行驗(yàn)證,證實(shí)了用該引物檢測as TF表達(dá)量的可行性。(2)as TF m RNA表達(dá)水平與APL患者外周血白細(xì)胞的關(guān)系:as TF與APL患者外周血白細(xì)胞無相關(guān)性(P0.05),排除了白細(xì)胞數(shù)對as TF表達(dá)量的影響。as TF m RNA表達(dá)水平:APL患者緩解后as TF m RNA水平表達(dá)高于治療前(P0.05),正常健康者和非APL的AML患者as TF表達(dá)量均高于APL患者治療前(P0.01),但非APL的AML患者與正常健康者之間as TF表達(dá)量未見明顯差異(P0.05)。結(jié)論(1)成功建立了q PCR技術(shù)檢測人外周血as TF m RNA的方法。(2)as TF在APL患者緩解后的表達(dá)高于治療前,正常健康者as TF表達(dá)明顯高于治療前APL患者,而緩解后總TF m RNA水平較治療前處于低水平,提示as TF在APL患者中凝血作用較fl TF低,并推測PML/RARa可能是打破APL患者體內(nèi)fl TF和as TF平衡的根本原因。
【關(guān)鍵詞】：急性早幼粒細(xì)胞白血病 組織因子 異常剪接組織因子
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R733.7
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• abstract6-9
• 第一部分：熒光染料實(shí)時(shí)定量PCR檢測asTF表達(dá)量方法的建立與驗(yàn)證9-16
• 前言9
• 材料與方法9-13
• 結(jié)果13-15
• 討論15-16
• 第二部分：異常剪接組織因子在初治急性早幼粒細(xì)胞白血病患者治療前和緩解后mRNA水平的變化及意義16-25
• 前言16-18
• 材料與方法18-20
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-22
• 討論22-25
• 參考文獻(xiàn)25-27
• 綜述27-37
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 中英文對照縮略詞表37-39
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文39-40
• 致謝40-42

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