本文關(guān)鍵詞：Let-7b及其靶基因編碼蛋白在橋本氏病伴發(fā)甲狀腺乳頭狀癌中的作用

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【摘要】：目前為止,許多研究發(fā)現(xiàn)橋本氏甲狀腺炎患者發(fā)生甲狀腺乳頭狀癌危險(xiǎn)性較正常人群明顯增高,免疫以及炎癥反應(yīng)被發(fā)現(xiàn)在其中扮演著一定的作用,但是基因以及蛋白層面上的具體機(jī)制仍需要進(jìn)一步深入研究。Let-7b為miRNAs其中Let-7家族中的一員,已經(jīng)被許多研究發(fā)現(xiàn)與腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),且其在免疫及炎癥反應(yīng)中的作用也被許多文獻(xiàn)報(bào)道,但是其在甲狀腺乳頭狀癌合并橋本氏甲狀腺炎的發(fā)生中的作用仍未有研究報(bào)導(dǎo),本課題即針對此方面進(jìn)行深入研究探討。目的檢測Let-7b及其靶基因編碼蛋白在HT合并PTC患者、單純PTC患者及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者組織中的表達(dá),并探討這些因子對HT伴發(fā)PTC的影響方法收集HT合并PTC患者、單純PTC患者及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者的新鮮組織并從中提取microRNAs。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測PTC合并HT患者、單純PTC患者癌組織以及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者病變組織中Let-7b的表達(dá)水平,并應(yīng)用western blot技術(shù)對其中的CCR7、CCL7水平進(jìn)行測定,進(jìn)一步應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測CCR7、CCL7及PTAFR在單純HT患者、HT合并PTC、單純PTC以及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者組織中的表達(dá)情況。收集所有檢測標(biāo)本的甲狀腺功能指標(biāo)以及病理結(jié)果。應(yīng)用單因素方差分析方法比較Let-7b、CCR7、CCL7、PTAFR在三組組織中的表達(dá),應(yīng)用相關(guān)分析方法探索組織中Let-7b、CCR7、CCL7、PTAFR的表達(dá)與患者臨床指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果①Let-7b在HT合并PTC患者以及單純PTC患者中表達(dá)較結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者表達(dá)明顯下調(diào),經(jīng)計(jì)算ΔΔCt=ΔCtPTC組-ΔCt結(jié)甲組=1.25,ΔΔCt=ΔCtPTC合并HT組-ΔCt結(jié)甲組=2.02,提示PTC組的組織中Let-7b基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)估值為結(jié)甲組的2-ΔΔCt=0.61倍,PTC合并HT組的組織中Let-7b基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)估值為結(jié)甲組的2-ΔΔCt=0.38倍。Let-7b在HT合并PTC患者中表達(dá)較單純PTC患者表達(dá)也下調(diào),ΔΔCt=ΔCtPTC合并HT組-ΔCtPTC組=0.77,提示PTC合并HT組的組織中Let-7b基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)估值為單純PTC組的2-ΔΔCt=0.62倍,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②CCR7主要表達(dá)于細(xì)胞的胞漿以及胞膜,其在HT合并PTC患者、單純PTC患者以及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫者中的表達(dá)量逐漸遞減。其表達(dá)量與患者的FT3有關(guān)(r=0.399,P0.05)。③CCL7也主要表達(dá)于細(xì)胞的胞漿以及胞膜,在HT合并PTC患者、單純PTC患者以及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫者中的表達(dá)量也逐漸遞減。其表達(dá)量與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(r=0.573,P0.01)④PTAFR也主要表達(dá)于細(xì)胞的胞漿以及胞膜,其在腫瘤組織、單純HT患者病理組織以及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫者病理組織中的表達(dá)量逐漸遞減,其在PTC合并HT組織中的表達(dá)較在單純PTC組織中的表達(dá)陽性率相當(dāng),但著色強(qiáng)度弱。結(jié)論Let-7b的低表達(dá)在HT合并PTC的發(fā)病過程中發(fā)揮一定的促進(jìn)作用,并且此作用可能是通過調(diào)控靶基因編碼蛋白CCR7、CCL7以及PTAFR的表達(dá)情況來實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：Let-7b 橋本氏甲狀腺炎 甲狀腺乳頭狀癌
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R736.1
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-7
• 引言7-9
• 第一章 材料與方法9-18
• 1.1 儀器、試劑和耗材9-10
• 1.1.1 主要儀器9
• 1.1.2 主要試劑和耗材9-10
• 1.2. 實(shí)驗(yàn)方法10-17
• 1.2.1 RNA的提取10-11
• 1.2.2 RNA的逆轉(zhuǎn)錄11-12
• 1.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)12
• 1.2.4 免疫組織化學(xué)染色（ICH）12-14
• 1.2.5 Western Blot14-17
• 1.3.資料收集17
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法17-18
• 第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-24
• 2.1 熒光定量PCR檢測Let-7b基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)18-20
• 2.1.1 提取RNA組織患者的一般情況18
• 2.1.2 各組患者病理組織中Let-7b基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)18-20
• 2.2 Western Blot檢測CCR7、CCL7分子的表達(dá)20-21
• 2.3 免疫組化檢測CCR7、CCL7、PTAFR分子的表達(dá)21-24
• 2.3.1 患者一般臨床資料21-22
• 2.3.2 CCR7在四組組織中的表達(dá)22
• 2.3.3 CCL7在三組組織中的表達(dá)22
• 2.3.4 PTAFR在三組組織中的表達(dá)22-24
• 第三章 討論24-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 綜述32-47
• 綜述參考文獻(xiàn)39-47
• 攻讀學(xué)位期間研究成果47-48
• 致謝48-49

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