本文關(guān)鍵詞：Hsa-miR-146a通過抑制NF-κB通路誘導去勢抵抗性前列腺癌凋亡的研究

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【摘要】：目的：研究表明hsa-miR-146a可能與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān),本實驗通過體外實驗探討hsa-miR-146a對去勢抵抗性前列腺癌細胞株DU145及PC3細胞生物學行為的影響,鑒定hsa-miR-146a調(diào)控的下游靶基因,系統(tǒng)的揭示hsa-miR-146a在前列腺癌發(fā)生發(fā)展中的相關(guān)分子機制,并初步探討hsa-miR-146a增強去勢抵抗性前列腺癌細胞對TRAIL促凋亡作用的敏感性。方法：應(yīng)用MicroRNAs芯片及實時定量PCR檢測去勢抵抗前列腺癌和激素依賴前列腺癌組織中hsa-miR-146a的表達差異。通過流式細胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染hsa-miR-146a/NC對前列腺癌細胞株凋亡的影響；通過靶基因預測軟件TargetScan等預測hsa-miR-146a在前列腺癌的潛在靶基因,熒光素酶報告基因(Luciferase)檢測hsa-miR-146a與潛在靶基因3'UTR的結(jié)合能力,通過Western Blot實驗檢測其靶基因表達;體外用TRAIL、 hsa-miR-146a干預前列腺癌細胞株DU145和PC3,通過四甲基偶氮唑藍(MTT)實驗法檢測細胞活性；通過Hoechst染色方法觀察高表達miRNA-146a、TRAIL對前列腺癌細胞凋亡的影響。結(jié)果：MicroRNAs芯片結(jié)果顯示,在去勢抵抗性前列腺癌組織中hsa-miR-146a的表達水平相比于激素依賴性前列腺癌組織中的表達水平相比顯著下降,實時定量PCR驗證了芯片結(jié)果(P0.05)；流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況,結(jié)果顯示miR-146a組DU145和PC3細胞凋亡率顯著高于NC組；預測軟件及熒光素酶報告基因(Luciferase)實驗證實hsa-miR-146a與TRAF6、IRAK1的3'UTR直接結(jié)合；Western Blot實驗發(fā)現(xiàn)hsa-miR-146a抑制TRAF6、IRAK1的表達。MTT實驗結(jié)果顯示隨著TRAIL劑量增大,細胞活性降低,hsa-miR-146a組細胞活性顯著低于陰性對照(NC)組；Hoechst染色顯示在應(yīng)用TRAIL干預的前列腺癌細胞中,轉(zhuǎn)染hsa-miR-146a后細胞凋亡率顯著高于陰性對照(NC)組。結(jié)論：以上結(jié)果表明hsa-miR-146a在去勢抵抗性前列腺癌組織中低表達,TRAF6、 IRAK1是hsa-miR-146a的潛在靶基因,并且hsa-miR-146a抑制其靶基因的表達,促進前列腺癌細胞的凋亡；TRAIL能夠促進前列腺癌細胞凋亡,而且hsa-miR-146a能夠增強前列腺癌細胞對TRAIL促凋亡作用的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：hsa-miR-146a DU145 PC3 去勢抵抗性前列腺癌 TRAIL TRAF6 IRAK1 凋亡
【學位授予單位】：東南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-14
• 第一章 文獻綜述14-19
• 第二章 材料與方法19-45
• 第三章 結(jié)果45-52
• 第四章 討論52-56
• 結(jié)論56-57
• 參考文獻57-60
• 作者簡介60-61
• 致謝61

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1 蔣亮;Hsa-miR-146a通過抑制NF-κB通路誘導去勢抵抗性前列腺癌凋亡的研究[D];東南大學;2015年

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本文編號：720839