發(fā)布時間：2017-08-22 19:04

  本文關(guān)鍵詞：Hsa-miR-146a通過抑制NF-κB通路誘導(dǎo)去勢抵抗性前列腺癌凋亡的研究

  更多相關(guān)文章： hsa-miR-146a DU145 PC3 去勢抵抗性前列腺癌 TRAIL TRAF6 IRAK1 凋亡

【摘要】：目的：研究表明hsa-miR-146a可能與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān),本實驗通過體外實驗探討hsa-miR-146a對去勢抵抗性前列腺癌細(xì)胞株DU145及PC3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,鑒定hsa-miR-146a調(diào)控的下游靶基因,系統(tǒng)的揭示hsa-miR-146a在前列腺癌發(fā)生發(fā)展中的相關(guān)分子機(jī)制,并初步探討hsa-miR-146a增強(qiáng)去勢抵抗性前列腺癌細(xì)胞對TRAIL促凋亡作用的敏感性。方法：應(yīng)用MicroRNAs芯片及實時定量PCR檢測去勢抵抗前列腺癌和激素依賴前列腺癌組織中hsa-miR-146a的表達(dá)差異。通過流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染hsa-miR-146a/NC對前列腺癌細(xì)胞株凋亡的影響；通過靶基因預(yù)測軟件TargetScan等預(yù)測hsa-miR-146a在前列腺癌的潛在靶基因,熒光素酶報告基因(Luciferase)檢測hsa-miR-146a與潛在靶基因3'UTR的結(jié)合能力,通過Western Blot實驗檢測其靶基因表達(dá);體外用TRAIL、 hsa-miR-146a干預(yù)前列腺癌細(xì)胞株DU145和PC3,通過四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)實驗法檢測細(xì)胞活性；通過Hoechst染色方法觀察高表達(dá)miRNA-146a、TRAIL對前列腺癌細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果：MicroRNAs芯片結(jié)果顯示,在去勢抵抗性前列腺癌組織中hsa-miR-146a的表達(dá)水平相比于激素依賴性前列腺癌組織中的表達(dá)水平相比顯著下降,實時定量PCR驗證了芯片結(jié)果(P0.05)；流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況,結(jié)果顯示miR-146a組DU145和PC3細(xì)胞凋亡率顯著高于NC組；預(yù)測軟件及熒光素酶報告基因(Luciferase)實驗證實hsa-miR-146a與TRAF6、IRAK1的3'UTR直接結(jié)合；Western Blot實驗發(fā)現(xiàn)hsa-miR-146a抑制TRAF6、IRAK1的表達(dá)。MTT實驗結(jié)果顯示隨著TRAIL劑量增大,細(xì)胞活性降低,hsa-miR-146a組細(xì)胞活性顯著低于陰性對照(NC)組；Hoechst染色顯示在應(yīng)用TRAIL干預(yù)的前列腺癌細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染hsa-miR-146a后細(xì)胞凋亡率顯著高于陰性對照(NC)組。結(jié)論：以上結(jié)果表明hsa-miR-146a在去勢抵抗性前列腺癌組織中低表達(dá),TRAF6、 IRAK1是hsa-miR-146a的潛在靶基因,并且hsa-miR-146a抑制其靶基因的表達(dá),促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的凋亡；TRAIL能夠促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞凋亡,而且hsa-miR-146a能夠增強(qiáng)前列腺癌細(xì)胞對TRAIL促凋亡作用的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：hsa-miR-146a DU145 PC3 去勢抵抗性前列腺癌 TRAIL TRAF6 IRAK1 凋亡
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-14
• 第一章 文獻(xiàn)綜述14-19
• 第二章 材料與方法19-45
• 第三章 結(jié)果45-52
• 第四章 討論52-56
• 結(jié)論56-57
• 參考文獻(xiàn)57-60
• 作者簡介60-61
• 致謝61

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1 蔣亮;Hsa-miR-146a通過抑制NF-κB通路誘導(dǎo)去勢抵抗性前列腺癌凋亡的研究[D];東南大學(xué);2015年

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本文編號：720839