本文關(guān)鍵詞：不同氧濃度下吉非替尼對(duì)人肺癌細(xì)胞的影晌

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【摘要】：目的:(1)研究低氧條件下,吉非替尼能否抑制人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549、HCC827、SK-MES-1的增殖。(2)能否通過(guò)提高氧濃度改善人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549、HCC827、SK-MES-1對(duì)吉非替尼的敏感性。(3)研究在低氧、常氧、高氧三種不同氧濃度下,吉非替尼對(duì)這三種不同的細(xì)胞的作用是否有差異。方法:(1)本實(shí)驗(yàn)選用三個(gè)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549、HCC827、SK-MES-1為研究對(duì)象,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法測(cè)定三株細(xì)胞對(duì)吉非替尼的敏感性。取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的上述細(xì)胞接種于96孔板,加入0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L的吉非替尼,24小時(shí)分別置于低氧(5%)、常氧(21%)、高氧(40%)這三個(gè)不同氧濃度下,后加入CCK-8 5μL,通過(guò)多通道酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔的吸光值A(chǔ)(波長(zhǎng)=450nm,以波長(zhǎng)520nm為參考)。并置倒置顯微鏡下觀察,觀察吉非替尼的誘導(dǎo)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞凋亡作用。(2)取0μmol/L、40μmol/L吉非替尼作用于處于對(duì)數(shù)期的A549、HCC827、SK-MES-1三種肺癌細(xì)胞,加藥后24小時(shí)分別置于低氧(5%)、常氧(21%)、高氧(40%)這三個(gè)不同氧濃度,收集各組細(xì)胞備用。使用流式細(xì)胞儀通過(guò)Annexin V FITC-PI法測(cè)定各組細(xì)胞的凋亡率。普通PCR法和半定量RT-PCR法檢測(cè)各組細(xì)胞EGFR、HIF-1α及VEGF-C m RNA的表達(dá)。結(jié)果:常氧、低氧及高氧條件下,細(xì)胞增殖抑制率隨吉非替尼濃度的增加、氧濃度的升高而增加(P0.001)。高氧條件下,與乏氧相關(guān)的HIF-1αm RNA在高氧條件下三種細(xì)胞均明顯減弱(P0.05),而VEGF-C m RNA、EGFR m RNA在HCC827細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組可見(jiàn)隨氧濃度升高表達(dá)量下降(P0.05)。結(jié)論:(1)低氧條件下,吉非替尼可以抑制人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549、HCC827、SK-MES-1的增殖。(2)提高氧濃度,人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549、HCC827、SK-MES-1對(duì)吉非替尼的敏感性均提高,且以HCC827細(xì)胞株為著。(3)在低氧、常氧、高氧三種不同氧濃度下,吉非替尼對(duì)這三種不同的細(xì)胞的作用是有差異。可能機(jī)制是提高氧濃度可以進(jìn)一步下調(diào)活化的HIF-1αm RNA的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：氧濃度 非小細(xì)胞肺癌 細(xì)胞增殖 吉非替尼 表皮生長(zhǎng)因子受體
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R734.2
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-19
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料12-14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法14-18
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18-19
• 2 結(jié)果19-40
• 2.1 CCK-8 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組的增值變化19-34
• 2.2 常氧、低氧和高氧條件下，吉非替尼對(duì)人肺癌A549、HCC827、SK-MES-1細(xì)胞株的凋亡作用34-36
• 2.3 常氧、低氧和高氧條件下，吉非替尼對(duì)人肺癌A549、HCC827、SK-MES-1細(xì)胞株各基因mRNA的表達(dá)結(jié)果36-40
• 3 討論40-42
• 4 結(jié)論42-43
• 4.1 低氧條件吉非替尼對(duì)人肺癌細(xì)胞的影響42
• 4.2 不同氧濃度下吉非替尼對(duì)人肺癌細(xì)胞的影響42-43
• 參考文獻(xiàn)43-45
• 綜述45-53
• 參考文獻(xiàn)50-53
• 致謝53-54
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果54-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷55

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