本文關(guān)鍵詞：TTF1-NP誘導(dǎo)裸鼠肝癌移植瘤細(xì)胞凋亡的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用機(jī)制

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【摘要】：目的 探討中藥珍珠梅黃酮納米粒(5,2',4'-trihydroxy-6,7,5'-trimethoxy flavone nanoparticle, TTF1-NP)對(duì)人肝癌HepG-2細(xì)胞裸鼠移植瘤的凋亡作用及其內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用機(jī)制。方法 建立人肝癌HepG-2細(xì)胞裸鼠移植瘤模型,將裸鼠分為模型組、TTF1-NP低劑量給藥組、TTF1-NP中劑量給藥組、TTF1-NP高劑量給藥組和阿霉素組,給藥組裸鼠分別按照5 μmol·kg-1、10 μmol·kg-1和20 μmol·kg-1的劑量尾靜脈注射TTF1-NP,給藥10天后處死裸鼠并計(jì)算其腫瘤生長(zhǎng)抑制率；采用HE染色觀察腫瘤細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；利用TUNEL原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的凋亡情況；采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激關(guān)鍵蛋白GRP78、p-JNK和Caspase12的表達(dá)；利用Western blot進(jìn)一步檢測(cè)GRP78、p-JNK、 Caspase12和CHOP的表達(dá)。結(jié)果1.裸鼠常規(guī)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示：隨著TTF1-NP給藥濃度的增加,裸鼠重量逐漸下降,腫瘤體積逐漸減小,腫瘤重量明顯下降,計(jì)算腫瘤生長(zhǎng)抑制率結(jié)果表明,5μnol·kg-1、10 μmol·kg-1、20μmol·kg-1 TTF1-NP給藥組和阿霉素組對(duì)腫瘤細(xì)胞均有抑制作用,其腫瘤生長(zhǎng)抑制率分別為51.2%、54.2%、61.8%和65.9%；2.HE染色結(jié)果顯示：光鏡下觀察,模型組裸鼠移植瘤細(xì)胞完整,細(xì)胞排列緊密,細(xì)胞核規(guī)則,細(xì)胞數(shù)目較多。隨著給藥濃度的增加,腫瘤細(xì)胞數(shù)目逐漸減少,形態(tài)改變,細(xì)胞核固縮、碎裂,核深染并伴有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；3. TUNEL原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示：模型組裸鼠移植瘤細(xì)胞的細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,凋亡的陽(yáng)性表達(dá)區(qū)域極少見(jiàn)。隨著給藥濃度的增加,凋亡的棕色陽(yáng)性表達(dá)區(qū)域逐漸增大,其中20 μmol·kg-1 TTF1-NP給藥組細(xì)胞凋亡的陽(yáng)性表達(dá)區(qū)域超過(guò)阿霉素組,細(xì)胞凋亡指數(shù)高達(dá)24%；4.免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示：隨著TTF1-NP給藥濃度的增加,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激關(guān)鍵蛋白GRP78、p-JNK和Caspase12的棕色陽(yáng)性表達(dá)區(qū)域明顯增大,其中20 pmol·kg-1 TTF1-NP給藥組伴有明顯的炎癥細(xì)胞侵潤(rùn)；5. Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示：與模型組相比,隨著TTF1-NP給藥濃度的增加,GRP78、p-JNK、Caspase12和CHOP的蛋白表達(dá)量明顯升高,與免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果相一致。結(jié)論TTF1-NP可以誘導(dǎo)裸鼠肝癌移植瘤細(xì)胞凋亡,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑是其主要作用機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：珍珠梅 裸鼠 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 中英文縮略語(yǔ)9-12
• 第一章 引言12-18
• 第二章 材料18-20
• 2.1 實(shí)驗(yàn)儀器18-19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑19-20
• 2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物20
• 第三章 方法20-26
• 3.1 細(xì)胞及培養(yǎng)20
• 3.2 裸鼠移植瘤模型建立20
• 3.3 腫瘤生長(zhǎng)抑制率20-21
• 3.4 肝癌細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)21
• 3.5 肝癌細(xì)胞凋亡檢測(cè)21-22
• 3.6 免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)GRP78、Caspase12和p-JNK蛋白的表達(dá)22-24
• 3.7 Western blot檢測(cè)GRP78、p-JNK、Caspase12和CHOP的表達(dá)24-26
• 3.7.1 提取裸鼠移植瘤全蛋白24
• 3.7.2 考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量24-25
• 3.7.3 Western blot檢測(cè)GRP78、p-JNK、Caspase12等的表達(dá)25-26
• 3.8 數(shù)據(jù)處理及分析26
• 第四章 結(jié)果26-33
• 4.1 TTF1-NP對(duì)裸鼠移植瘤細(xì)胞的抑制作用26-28
• 4.2 TTF1-NP對(duì)肝癌細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變的影響28
• 4.3 TTF1-NP對(duì)裸鼠肝癌移植瘤細(xì)胞凋亡的影響28-29
• 4.4 免疫組織化學(xué)檢測(cè)GRP78、Caspase12和p-JNK的表達(dá)29-31
• 4.5 Western blot檢測(cè)GRP78、p-JNK、Caspase12和CHOP表達(dá)31-33
• 第五章 討論33-36
• 第六章 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-44
• 致謝44

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 劉榮榮;TTF1-NP誘導(dǎo)裸鼠肝癌移植瘤細(xì)胞凋亡的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用機(jī)制[D];延邊大學(xué);2016年

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本文編號(hào)：702302