本文關(guān)鍵詞：骨巨細(xì)胞瘤中microRNA-30a對RunX2表達(dá)及骨質(zhì)破壞的調(diào)控作用

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【摘要】：研究背景:骨巨細(xì)胞瘤是一種具有潛在侵襲性及豐富血管的交界性骨腫瘤,主要發(fā)生于長骨的干骺端和脊柱,以廣泛的溶骨性破壞為主要表現(xiàn),約占全部原發(fā)性骨腫瘤的6%。骨巨細(xì)胞瘤主要由梭形的基質(zhì)細(xì)胞、多核的巨細(xì)胞和單核圓細(xì)胞組成,其中基質(zhì)細(xì)胞是骨巨細(xì)胞瘤的瘤樣組成部分,同時具有干細(xì)胞樣性能,可分泌Runx2等細(xì)胞蛋白調(diào)控破骨細(xì)胞的分化和骨質(zhì)溶解。研究目的:目前Runx2在骨巨細(xì)胞瘤中的重要作用已被廣泛報道,但是關(guān)于Runx2表達(dá)調(diào)控的研究多聚集在它的轉(zhuǎn)錄水平,關(guān)于其轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控機(jī)制并未被完整闡述。本研究計劃通過對micro RNA的研究,探索骨巨細(xì)胞瘤中Runx2在轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機(jī)制。研究方法:本研究首先通過收集20例骨巨細(xì)胞瘤標(biāo)本及相同患者的瘤旁組織,利用semi-q RT-PCR、q RT-PCR和western blot等試驗方法,比較Runx2和mi R-30a在兩種組織的表達(dá)差異。其次通過雙熒光素酶報告系統(tǒng)確認(rèn)mi R-30a與Runx2的3’UTR區(qū)域的結(jié)合位點。最后通過TALEN技術(shù)構(gòu)建了mi R-30a過表達(dá)的骨巨細(xì)胞瘤基質(zhì)細(xì)胞,檢測了過表達(dá)mi R-30a的骨巨細(xì)胞瘤基質(zhì)細(xì)胞中Runx2及其下游靶基因MMP-13的表達(dá),并通過骨片實驗、TRAP染色等檢測其對破骨細(xì)胞功能的影響。研究結(jié)果:我們首先通過對20例骨巨細(xì)胞瘤及瘤旁對照組的比較分析發(fā)現(xiàn),Runx2在骨巨細(xì)胞瘤中表達(dá)呈顯著高表達(dá),而mi R-30a在骨巨細(xì)胞瘤中表達(dá)顯著降低,從而證實了mi R-30a與Runx2呈負(fù)相關(guān)關(guān)系;隨后我們發(fā)現(xiàn)mi R-30a與Runx2的3’UTR區(qū)域的特異性結(jié)合位點,同時證實mi R-30a可抑制Runx2的表達(dá);最后我們通過對比分析過表達(dá)mi R-30a的基質(zhì)細(xì)胞與正�；|(zhì)細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)Runx2及其下游靶基因(MMP-13)的表達(dá)明顯降低,同時刺激了破骨細(xì)胞分化和誘導(dǎo)骨質(zhì)破壞的作用明顯減弱。研究結(jié)論:我們通過實驗研究證明了mi R-30a通過調(diào)控Runx2的表達(dá)介導(dǎo)骨巨細(xì)胞瘤中的溶骨性骨質(zhì)破壞,我們認(rèn)為這有可能成為骨腫瘤或其它與骨質(zhì)破壞有關(guān)的疾病的新的診斷和治療靶點。
【關(guān)鍵詞】：骨巨細(xì)胞瘤 micro RNA-30a Runx2 破骨細(xì)胞分化 骨質(zhì)破壞
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R738.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-11
• 前言11-13
• 第一部分 臨床樣本收集及分析檢測13-24
• 一、材料與方法14-17
• 二、結(jié)果17-22
• 三、討論22-24
• 第二部分 從細(xì)胞水平證實miR-30a在骨巨細(xì)胞瘤中呈低表達(dá)，并且直接調(diào)控Runx224-41
• 一、材料與方法24-30
• 二、結(jié)果30-38
• 三、討論38-41
• 全文總結(jié)41-43
• 綜述 MiR-30a在腫瘤中的多方面作用43-49
• 參考文獻(xiàn)49-56
• 在讀期間發(fā)表論文和參加科研工作情況56-58
• 致謝58-59

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：701704