本文關鍵詞：5-aza-CdR增強紫杉醇聯(lián)合表柔比星對MCF-7細胞的殺傷作用

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【摘要】：目的:本實驗通過使用DNA甲基化抑制劑5-氮雜2-脫氧胞苷(5-aza-Cd R)干擾體外乳腺癌MCF-7細胞的增殖,結(jié)合已有的經(jīng)典抗腫瘤化療藥物紫杉醇及表柔比星,探討兩者之間是否存在疊加累積效應,為乳腺癌的化療提供新的治療手段及途徑。方法:將培養(yǎng)好的細胞按照實驗要求分為:空白組(A組)、5-aza-Cd R組(B組)、5-aza-Cd R+表柔比星組(C組)、5-aza-Cd R+紫杉醇(D組)、5-aza-Cd R+紫杉醇+表柔比星組(E組)、紫杉醇+表柔比星組(F組)。通過MTT檢測細胞存活80%的濃度,分別選取24H、48H及72H,探索5-aza-Cd R、表柔比星及紫杉醇對乳腺癌MCF-7細胞的實驗合適濃度及時間。根據(jù)實驗得出的合適濃度及時間,藥物干預預先分組,光鏡下直接觀察細胞形態(tài)及流式細胞儀檢測細胞凋亡。并采用Western-blot檢測PGP和MMP-2蛋白的表達。結(jié)果:1.光鏡下觀測分別選取藥物處理48H在顯微鏡10*10下直接觀察,實驗組細胞出現(xiàn)核質(zhì)比例減少,腎形核仁增多,核仁不明顯等表現(xiàn),并且有相當一部分的細胞表面出現(xiàn)皺縮與內(nèi)陷。2.MTT比色法檢測細胞增殖5-aza-Cd R,表柔比星及紫杉醇抑制乳腺癌MCF-7細胞細胞增殖效應表現(xiàn)出劑量依賴性與時間依賴性(P0.05)。隨著實驗藥物濃度的增加,MCF-7細胞的存活率逐漸下降(P0.05)。同樣濃度的實驗藥物,隨著作用時間的延長,MCF-7細胞的存活率同樣出現(xiàn)下降的趨勢(P0.05)。3.Annexin V FITC細胞凋亡檢測乳腺癌MCF-7細胞體外經(jīng)藥物處理48H后,E組(即5-aza-Cd R+紫杉醇+表柔比星組)在細胞凋亡率(17.11%±1.25%)上都明顯高于其他五組(P0.05)。4.Western-blot結(jié)果E組(即5-aza-Cd R+紫杉醇+表柔比星組)在PGP與MMP2兩種蛋白的表達均低于其他五組(P0.05)。結(jié)論:5-aza-Cd R可誘導體外MCF-7細胞的凋亡,并下調(diào)PGP及MMP2蛋白的表達。5-aza-Cd R可增強紫杉醇聯(lián)合表柔比星對體外乳腺癌細胞MCF-7的殺傷作用。
【關鍵詞】：乳腺癌MCF-7細胞 5-aza-Cd R 紫杉醇 表柔比星
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 中、英詞文對照表10-11
• 第1章 緒言11-15
• 第2章 正文15-21
• 2.1 實驗材料15-17
• 2.2 實驗方法17-19
• 2.3 統(tǒng)計分析19-21
• 第3章 結(jié)果21-27
• 3.1.藥物干預 MCF-7 細胞增殖的影響21-22
• 3.2 藥物處理后細胞形態(tài)學的變化22-23
• 3.3 流式細胞術檢測藥物處理后MCF-7細胞凋亡23-25
• 3.4 Western-bolt檢測PGP及MMP2蛋白的表達25-27
• 第4章 討論27-31
• 第5章 結(jié)論31-33
• 參考文獻33-37
• 綜述37-45
• 參考文獻42-45
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文目錄45-47
• 致謝47

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本文編號：701021