芹菜素對(duì)人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞生長(zhǎng)及CK2α和Gli1表達(dá)的影響
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【摘要】:目的:檢測(cè)芹菜素(Apigenin,API)對(duì)人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞生長(zhǎng)抑制與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用,并進(jìn)一步探討其作用分子機(jī)制是否與下調(diào)CK2α和Gli1蛋白表達(dá)相關(guān)。方法:不同濃度芹菜素(0.0、10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L)分別作用體外培養(yǎng)人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞不同時(shí)間段(0h、12h、24h和48h),然后,利用平皿集落形成法檢測(cè)細(xì)胞集落形成率;用Annexin V-FITC/PI雙染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度芹菜素(0.0、10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L)作用24h的人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞的凋亡率;不同濃度芹菜素(0.0、10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L)處理24 h,采用Western blot對(duì)人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞CK2α和Gli1蛋白的表達(dá)進(jìn)行分析。結(jié)果:不同濃度的芹菜素(10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L)作用不同時(shí)間(12、24、48h)后,平皿集落形成法檢測(cè)得到的人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞的集落形成數(shù)隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng)和藥物濃度的增加逐漸減少,說明其集落形成率呈時(shí)間和劑量依賴性下降,各實(shí)驗(yàn)組與空白對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);不同濃度的芹菜素(10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L)作用24h后,采用Annexin V-FITC/PI雙染色流式細(xì)胞術(shù)分析展示的人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞的凋亡率呈劑量依賴性增高,即隨著藥物濃度的增加其凋亡率逐漸增加,且各實(shí)驗(yàn)組與空白對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);不同濃度的芹菜素(10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L)作用24h后,采用Western blot分析人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞CK2α和Gli1蛋白印跡條帶的相對(duì)密度,結(jié)果顯示CK2α和Gli1蛋白印跡條帶的相對(duì)密度均呈劑量依賴性下降,所有不同濃度芹菜素處理組的CK2α印跡條帶與空白對(duì)照組印跡條帶比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);芹菜素(20.0、40.0、80.0μmol/L API)組Gli1蛋白的印跡條帶與空白對(duì)照組(0.0μmol/L API)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);芹菜素(10.0μmol/L API)組Gli1蛋白的印跡條帶與空白對(duì)照組(0.0μmol/LAPI)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.846)。結(jié)論:1.芹菜素以劑量和時(shí)間依賴方式抑制人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞錨定依賴性生長(zhǎng)并以劑量依賴方式誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。2.抑制CK2的活性,進(jìn)而下調(diào)Gli1蛋白表達(dá)可能是芹菜素抑制人卵巢癌OVCAR3細(xì)胞系細(xì)胞生長(zhǎng)和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】:卵巢癌 芹菜素 凋亡 CK2α Gli1
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R737.31
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 第1章 前言10-14
- 第2章 實(shí)驗(yàn)材料14-18
- 第3章 實(shí)驗(yàn)方法18-24
- 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-34
- 第5章 討論34-38
- 第6章 結(jié)論38-40
- 參考文獻(xiàn)40-46
- 綜述 芹菜素抗癌作用機(jī)理的研究進(jìn)展46-56
- 參考文獻(xiàn)52-56
- 主要縮略詞索引56-58
- 致謝58
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):688875
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