Axin2在胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)及意義
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【摘要】:目的:探討Axin2在胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況及其對(duì)人胰腺癌細(xì)胞(PANC-1)增殖、侵襲及遷移能力的影響。闡述Axin2在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用,為胰腺癌基因靶向治療和抗腫瘤藥物研發(fā)提供一定的理論基礎(chǔ)。方法:1、采用QPCR檢測(cè)人正常胰腺細(xì)胞(H6C7)及三種不同侵襲能力的胰腺癌細(xì)胞株(BxPC-3Mia PaCa-2PANC-1)中Axin2表達(dá)水平情況;根據(jù)Axin2表達(dá)量高低篩選出最低表達(dá)的胰腺癌細(xì)胞株;2、制備過(guò)表達(dá)Axin2的載體;將篩選出的低表達(dá)細(xì)胞株分為3組:陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組和過(guò)表達(dá)組,其中過(guò)表達(dá)組及陰性對(duì)照組分別成功轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)Axin2的質(zhì)粒載體和空質(zhì)粒載體,空白對(duì)照組則不進(jìn)行轉(zhuǎn)染,QPCR檢測(cè)各組細(xì)胞株轉(zhuǎn)染后Axin2表達(dá)情況;3、篩選轉(zhuǎn)染后穩(wěn)定表達(dá)Axin2的胰腺癌細(xì)胞,合理設(shè)置分組,并通過(guò)MTT法、Transwell小室法、劃痕愈合等實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)Axin2質(zhì)粒后胰腺癌細(xì)胞增殖、侵襲及遷移能力變化。結(jié)果:1、QPCR結(jié)果發(fā)現(xiàn):Axin2在三種胰腺癌細(xì)胞株及正常胰腺細(xì)胞株中均有表達(dá),Axin2在PANC-1、BxPC-3、Mia PaCa-2及H6C7細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量分別為(0.13±0.01)、(0.42±0.05)、(0.24±0.01)和(1.01±0.01),任意兩者比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2、篩選最低表達(dá)Axin2的PANC-1細(xì)胞株,過(guò)表達(dá)Axin2載體轉(zhuǎn)染PANC-1細(xì)胞后利用QPCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率,結(jié)果顯示:Axin2在過(guò)表達(dá)組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組的相對(duì)表達(dá)量分別為(4.32±0.07)、(1.09±0.08)、(0.92±0.08);其中陰性對(duì)照組與空白組相比,無(wú)顯著差異(P㧐0.05);過(guò)表達(dá)組與其它兩組比較,表達(dá)量顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3、篩選轉(zhuǎn)染后穩(wěn)定高表達(dá)Axin2的胰腺癌細(xì)胞株進(jìn)行體外功能實(shí)驗(yàn),1)MTT法檢測(cè)結(jié)果:過(guò)表達(dá)組、陰性對(duì)照組及空白組的相對(duì)增殖率分別為:(0.33±0.02)、(0.99±0.05)和(1.00±0.22);過(guò)表達(dá)組與其它兩組比較增殖率顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2)劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:相較于空白對(duì)照組及陰性對(duì)照組,過(guò)表達(dá)組PANC-1細(xì)胞遷移能力顯著減弱;3)Transwell小室實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:相較于空白組及陰性對(duì)照組,過(guò)表達(dá)組PANC-1細(xì)胞侵襲能力顯著降低。結(jié)論:1、Axin2在胰腺癌細(xì)胞株較正常胰腺細(xì)胞表達(dá)下調(diào),在侵襲能力越高的癌細(xì)胞株中表達(dá)越低;2、Axin2高表達(dá)能減弱PANC-1細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲能力,提示可能起抑癌基因作用。
【關(guān)鍵詞】:Axin2 胰腺癌 增殖 遷移 侵襲
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R735.9
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 中英文縮略詞表10-11
- 第1章 前言11-13
- 第2章 材料與方法13-29
- 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-37
- 第4章 討論37-41
- 第5章 結(jié)論41-43
- 參考文獻(xiàn)43-47
- 綜述 胰腺癌微環(huán)境的研究進(jìn)展47-55
- 參考文獻(xiàn)51-55
- 在讀期間發(fā)表的論文55-57
- 致謝57
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,本文編號(hào):683873
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