發(fā)布時(shí)間：2017-08-08 20:29

  本文關(guān)鍵詞：雙酚A對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)及侵襲影響的研究

  更多相關(guān)文章： 雙酚A 胃癌 雌激素受體 生長(zhǎng) 侵襲 MMP-9

【摘要】：目的:探討環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A(BPA)對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)、侵襲的影響及機(jī)制分析。方法:本研究選用人中分化和低分化胃癌細(xì)胞株SGC-7901和MKN-45進(jìn)行體外貼壁培養(yǎng)。選用10-10~10-4mol/L BPA處理細(xì)胞,分別在24、48、72小時(shí)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)和形態(tài)學(xué)改變,并采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖或抑制情況。采用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)研究BPA對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲能力的改變,RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng))檢測(cè)胃癌侵襲相關(guān)基因MMP-9 mRNA表達(dá)水平的改變。為研究雌激素受體通路和BPA誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng)之間的關(guān)系,使用雌激素受體拮抗劑氟維司群(ICI 182,780)作為對(duì)照研究。結(jié)果:10-10~10-5mol/L BPA限制兩種胃癌細(xì)胞生長(zhǎng),并且隨著濃度梯度增大,細(xì)胞更趨于離散,細(xì)胞之間連接變?nèi)�、接觸變少,并且10-4 mol/L BPA對(duì)細(xì)胞有毒性作用。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)中,胃癌細(xì)胞株SGC-7901:BPA組侵襲能力較對(duì)照組增強(qiáng)(134.60%?14.91%vs 100.00%?16.16%,p0.01,n=3),而BPA+ICI組與BPA組比較、ICI組與對(duì)照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05,n=3);胃癌細(xì)胞株MKN-45:BPA組細(xì)胞侵襲能力較對(duì)照組增強(qiáng)(120.06%?15.19%vs100.00%?16.26%,p0.05,n=3),而BPA+ICI組與BPA組比較、ICI組與對(duì)照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05,n=3)�；蜓芯繉用�,胃癌細(xì)胞株SGC-7901:與對(duì)照組比較,10-5 mol/L和10-6 mol/L BPA組MMP-9 mRNA表達(dá)增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05,n=3),BPA+ICI組與BPA組比較,MMP-9 mRNA表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05,n=3);胃癌細(xì)胞株MKN-45:10-5 mol/L、10-6 mol/L和10-7 mol/L BPA組與對(duì)照組比較,MMP-9 mRNA表達(dá)增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01,n=3)。BPA+ICI組與BPA組比較,MMP-9 m RNA表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05,n=3)。結(jié)論:在一定濃度范圍內(nèi),BPA可以引起胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)異常改變,隨著BPA濃度增大胃癌細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng),侵襲相關(guān)基因MMP-9參與了BPA誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞侵襲過程,ER通路可能未參與其中。
【關(guān)鍵詞】：雙酚A 胃癌 雌激素受體 生長(zhǎng) 侵襲 MMP-9
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-6
• 英文縮略詞6-10
• 第一章 前言10-15
• 1.1 胃癌的流行病學(xué)特點(diǎn)及治療現(xiàn)狀10
• 1.2 雌激素與胃癌的關(guān)系10-12
• 1.2.1 雌激素的作用機(jī)制11
• 1.2.2 胃癌-雌激素可能相關(guān)性腫瘤11-12
• 1.2.3 ER在胃癌的分布及作用12
• 1.3 環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A（BPA）及其致瘤機(jī)制12-15
• 1.3.1 BPA概述12-13
• 1.3.2 BPA致瘤機(jī)制13-15
• 第二章 材料和方法15-23
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料15-16
• 2.1.1 胃癌細(xì)胞系15
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑15
• 2.1.3 主要試劑配制15-16
• 2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-22
• 2.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇16-17
• 2.2.2 細(xì)胞傳代17
• 2.2.3 細(xì)胞凍存17
• 2.2.4 BPA對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響17-18
• 2.2.5 細(xì)胞侵襲能力檢測(cè)18-19
• 2.2.6 BPA對(duì)胃癌細(xì)胞MMP-9 m RNA表達(dá)的影響19-21
• 2.2.7 ICI 182,780 對(duì)胃癌細(xì)胞MMP-9 m RNA表達(dá)的影響21-22
• 2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理22
• 附 技術(shù)路線圖22-23
• 第三章 結(jié)果23-33
• 3.1 BPA對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響23-27
• 3.1.1 SGC-7901 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察23
• 3.1.2 MKN-45 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察23
• 3.1.3 SGC-7901 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線23
• 3.1.4 MKN-45 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線23-27
• 3.2 Tranwell模型檢測(cè)細(xì)胞體外侵襲能力27-30
• 3.3 RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞MMP-9 m RNA表達(dá)水平30-33
• 3.3.1 SGC-7901 中MMP-9 m RNA表達(dá)水平30
• 3.3.2 MKN-45 中MMP-9 m RNA表達(dá)水平30-33
• 第四章 討論33-39
• 4.1 BPA改變胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)33-34
• 4.2 BPA促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲34-35
• 4.3 BPA對(duì)胃癌細(xì)胞作用機(jī)制分析35-39
• 第五章 結(jié)論39-40
• 5.1 結(jié)論39
• 5.2 研究展望39-40
• 參考文獻(xiàn)40-48
• 附綜述 雙酚A及其相關(guān)性疾病的研究進(jìn)展48-62
• 1. 各個(gè)生命階段的接觸源48-49
• 2. 與BPA暴露相關(guān)的疾病49-52
• 2.1 糖尿病和肥胖49
• 2.2 心腦血管疾病49
• 2.3 慢性腎病49
• 2.4 出生缺陷和發(fā)育障礙49-50
• 2.5 不孕不育50
• 2.6 慢性呼吸系統(tǒng)疾病50
• 2.7 癌癥50-52
• 3. BPA暴露的致病機(jī)制52-55
• 3.1 基因損傷52-53
• 3.2 BPA的表觀遺傳學(xué)效應(yīng)53
• 3.3 內(nèi)分泌干擾效應(yīng)53-54
• 3.4 氧化應(yīng)激和線粒體功能障礙54-55
• 4. 結(jié)論和展望55
• 參考文獻(xiàn)55-62
• 在學(xué)期間的研究成果62-63
• 致謝63

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