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組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細(xì)胞侵襲能力的影響及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2017-08-07 01:11

  本文關(guān)鍵詞:組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細(xì)胞侵襲能力的影響及機(jī)制研究


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【摘要】:目的:探討組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞侵襲能力的影響及分子機(jī)制。方法:本研究將未轉(zhuǎn)染LOVO細(xì)胞(未轉(zhuǎn)染組)和慢病毒空載體轉(zhuǎn)染LOVO細(xì)胞(空載體組)設(shè)為對照組,精氨酸點(diǎn)突變?yōu)楸彼岬穆《据d體轉(zhuǎn)染LOVO細(xì)胞(Arg117Ala組)和精氨酸點(diǎn)突變?yōu)橘嚢彼岬穆《据d體轉(zhuǎn)染LOVO細(xì)胞(Arg117Lys組)設(shè)為實(shí)驗(yàn)組。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)觀察各組LOVO細(xì)胞的侵襲能力。Western blot測定各組細(xì)胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表達(dá)變化;定量PCR檢測Runx3的mRNA水平。結(jié)果:(1)組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細(xì)胞侵襲能力的影響:Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測對照組與實(shí)驗(yàn)組的侵襲能力,結(jié)果顯示,與對照組相比,Arg117Ala組和Arg117Lys組降解Matrigel基質(zhì)膠穿過小室的細(xì)胞數(shù)明顯減少(P0.01)。Arg117Ala組和Arg117Lys組無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(2)組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化影響LOVO細(xì)胞侵襲能力的分子機(jī)制:Western blot方法檢測未轉(zhuǎn)染組、空載體組、Arg117Ala組和Arg117Lys組LOVO細(xì)胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表達(dá)情況,結(jié)果顯示,與對照組相比,Arg117Ala組與Arg117Lys組H3K9me2、β-catenin和MMP7蛋白表達(dá)降低,Runx3蛋白表達(dá)升高(P0.01),Arg117Ala組與Arg117Lys組無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。定量PCR方法檢測未轉(zhuǎn)染組、空載體組、Arg117Ala組和Arg117Lys組LOVO細(xì)胞Runx3的mRNA水平,結(jié)果顯示,與對照組相比,Arg117Ala組與Arg117Lys組Runx3的mRNA水平升高(P0.01)。Arg117Ala組與Arg117Lys組無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化可使LOVO細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng),其機(jī)制可能與組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化調(diào)節(jié)H3K9me2水平,抑制Runx3的表達(dá),進(jìn)而導(dǎo)致下游靶基因MMP7蛋白表達(dá)升高有關(guān)。組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化在調(diào)節(jié)結(jié)腸癌侵襲能力中可能具有重要作用。其詳細(xì)機(jī)制需進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】:LOVO細(xì)胞 組蛋白單ADP核糖基化 Runx3 侵襲
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R735.35
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照4-5
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-10
  • 前言10-12
  • 第一部分 組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細(xì)胞侵襲能力的影響12-19
  • 1 材料與方法12-15
  • 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果15-17
  • 3 討論17-19
  • 第二部分 組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化影響LOVO細(xì)胞侵襲能力的分子機(jī)制19-30
  • 1 材料與方法19-24
  • 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-27
  • 3 討論27-30
  • 全文總結(jié)30-31
  • 參考文獻(xiàn)31-34
  • 文獻(xiàn)綜述34-41
  • 參考文獻(xiàn)37-41
  • 致謝41-42
  • 碩士期間發(fā)表論文情況42

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本文編號:632214

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