本文關鍵詞：組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細胞侵襲能力的影響及機制研究

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【摘要】：目的:探討組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對人結腸癌LOVO細胞侵襲能力的影響及分子機制。方法:本研究將未轉染LOVO細胞(未轉染組)和慢病毒空載體轉染LOVO細胞(空載體組)設為對照組,精氨酸點突變?yōu)楸彼岬穆《据d體轉染LOVO細胞(Arg117Ala組)和精氨酸點突變?yōu)橘嚢彼岬穆《据d體轉染LOVO細胞(Arg117Lys組)設為實驗組。Transwell侵襲實驗觀察各組LOVO細胞的侵襲能力。Western blot測定各組細胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表達變化;定量PCR檢測Runx3的mRNA水平。結果:(1)組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細胞侵襲能力的影響:Transwell侵襲實驗檢測對照組與實驗組的侵襲能力,結果顯示,與對照組相比,Arg117Ala組和Arg117Lys組降解Matrigel基質膠穿過小室的細胞數(shù)明顯減少(P0.01)。Arg117Ala組和Arg117Lys組無統(tǒng)計學差異(P0.05)。(2)組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化影響LOVO細胞侵襲能力的分子機制:Western blot方法檢測未轉染組、空載體組、Arg117Ala組和Arg117Lys組LOVO細胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表達情況,結果顯示,與對照組相比,Arg117Ala組與Arg117Lys組H3K9me2、β-catenin和MMP7蛋白表達降低,Runx3蛋白表達升高(P0.01),Arg117Ala組與Arg117Lys組無統(tǒng)計學差異(P0.05)。定量PCR方法檢測未轉染組、空載體組、Arg117Ala組和Arg117Lys組LOVO細胞Runx3的mRNA水平,結果顯示,與對照組相比,Arg117Ala組與Arg117Lys組Runx3的mRNA水平升高(P0.01)。Arg117Ala組與Arg117Lys組無統(tǒng)計學差異(P0.05)。結論:組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化可使LOVO細胞侵襲能力增強,其機制可能與組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化調(diào)節(jié)H3K9me2水平,抑制Runx3的表達,進而導致下游靶基因MMP7蛋白表達升高有關。組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化在調(diào)節(jié)結腸癌侵襲能力中可能具有重要作用。其詳細機制需進一步研究。
【關鍵詞】：LOVO細胞 組蛋白單ADP核糖基化 Runx3 侵襲
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.35
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 第一部分 組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細胞侵襲能力的影響12-19
• 1 材料與方法12-15
• 2 實驗結果15-17
• 3 討論17-19
• 第二部分 組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化影響LOVO細胞侵襲能力的分子機制19-30
• 1 材料與方法19-24
• 2 實驗結果24-27
• 3 討論27-30
• 全文總結30-31
• 參考文獻31-34
• 文獻綜述34-41
• 參考文獻37-41
• 致謝41-42
• 碩士期間發(fā)表論文情況42

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本文編號：632214