本文關(guān)鍵詞：白樺脂酸對(duì)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的影響及其抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制探討

  更多相關(guān)文章： 白樺脂酸 結(jié)腸癌 乙酰肝素酶 侵襲和轉(zhuǎn)移

【摘要】：目的:觀察白樺脂酸在體外水平上對(duì)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的影響,同時(shí)探討白樺脂酸抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞,并配制不同濃度的藥物(白樺脂酸濃度分別為0ug/L(空白對(duì)照組)、5ug/L、10ug/L、20ug/L、40ug/L),分別作用于細(xì)胞。用倒置顯微鏡觀察藥物作用于后細(xì)胞的生長(zhǎng)情況。用MTT法評(píng)估藥物對(duì)細(xì)胞增殖的影響;用流式細(xì)胞術(shù)分析藥物對(duì)細(xì)胞凋亡程度的影響;用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響;用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)定量分析藥物對(duì)細(xì)胞內(nèi)乙酰肝素酶mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果:1.顯微鏡下觀察對(duì)比細(xì)胞形態(tài):空白對(duì)照組細(xì)胞體積大、呈圓形,胞質(zhì)豐富,呈緊密貼壁生長(zhǎng)。藥物組細(xì)胞體積減小,細(xì)胞皺縮,數(shù)目較少,邊界不清,貼壁不緊密,呈緩慢生長(zhǎng)狀態(tài),可見壞死漂浮細(xì)胞。2..MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率:不同濃度的藥物(5ug/L、10ug/L、20ug/L、40ug/L)分別作用于細(xì)胞,作用24小時(shí)后,藥物組相對(duì)于空白對(duì)照組(0ug/L)的抑制率分別為13.5%、26.1%、45.8%、51.3%。作用48小時(shí)后,抑制率分別為14.4%、30.0%、51.1%、62.4%。作用72小時(shí)后,抑制率分別為19.0%、35.0%、53.8%、65.0%。其組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),即表明白樺脂酸在體外水平可以抑制人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞的增殖,而且這種抑制作用隨著藥物濃度的增加、作用時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。3.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率:不同濃度的藥物(5ug/L、10ug/L、20ug/L、40ug/L)分別作用于細(xì)胞48小時(shí),各組的凋亡率分別為3.4%、9.2%、20.4%、27.4%,空白對(duì)照組(0ug/L)的凋亡率為2.0%。說明白樺脂酸在體外水平可以促進(jìn)細(xì)胞的凋亡,而且凋亡率隨著藥物劑量濃度的增加而增加,各組之間相比差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.細(xì)胞劃痕檢測(cè)細(xì)胞遷移抑制率:藥物作用于細(xì)胞48小時(shí)后,對(duì)照組細(xì)胞遷移距離(um)為152.17±3.51。藥物組遷移距離分別為144.21±1.75、127.14±2.26、101.52±0.50、73.32±1.26。結(jié)果顯示,藥物可以使細(xì)胞的遷移能力降低,而且遷移能力的降低程度并隨藥物濃度的增加而增加,各組之間相比差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞中乙酰肝素酶mRNA表達(dá):在不同藥物濃度的干預(yù)下(0ug/L、5ug/L、10ug/L、20ug/L、40ug/L),細(xì)胞中乙酰肝素酶mRNA表達(dá)量分別為1.000±0.034、0.910±0.034、0.856±0.156、0.694±0.006、0.474±0.073。說明藥物可抑制細(xì)胞中乙酰肝素酶mRNA的表達(dá),抑制效果隨著濃度的增加而增加。各組之間相比差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.白樺脂酸可以在體外水平有效的抑制人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞的增殖,并呈時(shí)間和劑量依賴性。2.白樺脂酸可以在體外水平誘導(dǎo)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞凋亡,并呈劑量依賴性。3.白樺脂酸可以在體外水平有效的抑制人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞的遷移,并呈劑量依賴性。4.白樺脂酸可通過抑制人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞內(nèi)乙酰肝素酶的表達(dá),從而抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。
【關(guān)鍵詞】：白樺脂酸 結(jié)腸癌 乙酰肝素酶 侵襲和轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.35
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-18
• 1 實(shí)驗(yàn)材料11-13
• 2 實(shí)驗(yàn)方法13-17
• 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析17-18
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-24
• 1. 白樺脂酸作用先后人結(jié)腸癌 HT-29 細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變18
• 2. 白樺脂酸對(duì)人結(jié)腸癌 HT-29 細(xì)胞增殖能力的影響18-19
• 3. 白樺脂酸對(duì)人結(jié)腸癌 HT-29 細(xì)胞凋亡的影響19-21
• 4. 白樺脂酸對(duì)人結(jié)腸癌 HT-29 細(xì)胞遷移能力的影響21-22
• 5. 白樺脂酸對(duì)人結(jié)腸癌 HT-29 細(xì)胞內(nèi)乙酰肝素酶 m RNA 表達(dá)的影響22-24
• 討論24-26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻(xiàn)27-29
• 文獻(xiàn)綜述29-39
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 致謝39-40
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果40-41
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷41

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