尼克酰胺對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及作用機(jī)制研究
本文關(guān)鍵詞:尼克酰胺對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及作用機(jī)制研究
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【摘要】:目的探討尼克酰胺對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞生物學(xué)行為的影響和其可能的作用機(jī)制。方法采用CCK-8細(xì)胞增殖毒性實(shí)驗(yàn)、Annexin V-FITC/PI流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)分析不同作用濃度(10、20、30、40、50、60 mMol/L)及不同作用時(shí)間(24h、48h)下尼克酰胺對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞的生物學(xué)行為的影響,采用單因素方差分析及配對(duì)t檢驗(yàn)分析其增殖抑制率、凋亡率、遷移率與藥物濃度及時(shí)間的關(guān)系;利用Aligent human genome 4×44 microarrays檢測(cè)了肺腺癌A549細(xì)胞及加入尼克酰胺共培養(yǎng)的A549細(xì)胞mRNA表達(dá)譜,篩選出在尼克酰胺作用下顯著異常表達(dá)的差異基因作為可能的靶基因,并對(duì)其進(jìn)行Pathway分析,初步探討尼克酰胺對(duì)A549細(xì)胞作用的可能細(xì)胞通路。結(jié)果尼克酰胺作用后肺腺癌A549細(xì)胞的增殖能力明顯下降。并且隨著尼克酰胺作用濃度和作用時(shí)間的增加,其對(duì)于A549細(xì)胞增殖的抑制率明顯增加,并呈劑量及時(shí)間依賴關(guān)系。在同一作用時(shí)間內(nèi),尼克酰胺40mM作用濃度時(shí)其增殖抑制率最高,且在同一尼克酰胺濃度下,作用48h比24h對(duì)細(xì)胞增殖抑制率更明顯(P0.05)。尼克酰胺作用后肺腺癌A549細(xì)胞凋亡率明顯上升。隨著尼克酰胺作用濃度和作用時(shí)間的增加,A549細(xì)胞凋亡率明顯增加,并呈劑量及時(shí)間依賴關(guān)系。在同一作用時(shí)間內(nèi),尼克酰胺60mM作用濃度時(shí)其凋亡率最高,且在同一尼克酰胺濃度下,作用48h比24h對(duì)細(xì)胞增殖抑制率更明顯(P0.05)。尼克酰胺作用后的肺腺癌A549細(xì)胞向中間的無細(xì)胞區(qū)域遷移的能力明顯減弱,將無細(xì)胞區(qū)完全填滿的時(shí)間明顯延長(zhǎng),表明尼克酰胺可以減弱A549細(xì)胞遷移能力(P0.05)。尼克酰胺共培養(yǎng)組中表達(dá)上調(diào)倍值超過2倍的差異表達(dá)基因2505條,表達(dá)下調(diào)倍值超過2倍的差異基因745條,進(jìn)一步篩選發(fā)現(xiàn)BCL2等涉及細(xì)胞凋亡通路的基因存在顯著差異。結(jié)論尼克酰胺能影響肺腺癌A549細(xì)胞的生物學(xué)行為,其明顯抑制A549細(xì)胞增殖和遷移,并促進(jìn)其凋亡。其機(jī)制可能涉及調(diào)控BCL2等凋亡相關(guān)基因,但具體的作用機(jī)制尚待進(jìn)一步研究
【關(guān)鍵詞】:肺腺癌A549 尼克酰胺 細(xì)胞功能性試驗(yàn) 基因芯片 差異表達(dá)基因
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R734.2
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-9
- 引言9-14
- 參考文獻(xiàn)11-14
- 材料與方法14-28
- 結(jié)果28-44
- 討論44-46
- 參考文獻(xiàn)46-48
- 結(jié)論與展望48-49
- 綜述49-57
- 參考文獻(xiàn)54-57
- 致謝57-59
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,本文編號(hào):612255
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