本文關(guān)鍵詞：下調(diào)miRNA146a抑制膠質(zhì)瘤微環(huán)境內(nèi)M2型巨噬細(xì)胞分泌IL-6的研究

  更多相關(guān)文章： 腦膠質(zhì)瘤 miRNA146a M2型巨噬細(xì)胞 白細(xì)胞介素-6

【摘要】：目的:腫瘤微環(huán)境是目前研究的熱點(diǎn),其中腫瘤免疫炎性微環(huán)境在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。在膠質(zhì)瘤中也是如此,膠質(zhì)瘤免疫炎性微環(huán)境中的主要細(xì)胞是發(fā)揮固有免疫功能的巨噬細(xì)胞,除了傳統(tǒng)的腫瘤抑制型M1型巨噬細(xì)胞,還有具有促進(jìn)膠質(zhì)瘤生長的M2型巨噬細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)miRNA146a在M2型巨噬細(xì)胞明顯高表達(dá),而M2型巨噬細(xì)胞可分泌IL-6,IL-6不僅可以直接促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長,也可刺激M1型巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)镸2型巨噬細(xì)胞從而間接達(dá)到促腫瘤生長效果。目前對于M2型巨噬細(xì)胞中miRNA146a與IL-6的關(guān)系鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)擬建立M2型巨噬細(xì)胞模型,通過慢病毒轉(zhuǎn)染下調(diào)M2型巨噬細(xì)胞中miRNA146a的表達(dá),測定M2型巨噬細(xì)胞慢病毒干擾前后IL-6分泌的變化,以闡明miRNA146a在M2型巨噬細(xì)胞分泌IL-6中的作用。方法:正常培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7細(xì)胞后,使用IL-4刺激RAW264.7,免疫組化檢測刺激后的細(xì)胞的M2型巨噬細(xì)胞特性標(biāo)記物CD206表達(dá),以確定刺激后的細(xì)胞為M2型細(xì)胞。將M2型巨噬細(xì)胞分為三組,轉(zhuǎn)染抑制性載體的實(shí)驗(yàn)組(PC)、轉(zhuǎn)染空載體的陰性對照組(NC)與只加入完全培養(yǎng)基的空白對照組。對轉(zhuǎn)染后的三組細(xì)胞行Real-time PCR檢測miRNA146a的變化及IL-6表達(dá)的變化,GraphPad Prism5軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,所有數(shù)據(jù)以means±SD表示,進(jìn)行t檢驗(yàn)及其他相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,P0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:RAW264.7在IL-4刺激后,細(xì)胞表達(dá)CD206,極化為M2型巨噬細(xì)胞。使用慢病毒轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染抑制載體的PC組及轉(zhuǎn)染空載體的NC組在熒光顯微鏡下均表達(dá)紅色熒光示病毒已轉(zhuǎn)染。Real-Time PCR結(jié)果表明轉(zhuǎn)染抑制性載體病毒后M2型巨噬細(xì)胞中miRNA146a相對于NC組和空白對照組明顯下降(P0.05)),NC組與空白對照組對比無明顯變化(P0.05)。Real-Time PCR檢測IL-6分泌情況,結(jié)果表明轉(zhuǎn)染抑制性載體病毒后M2型巨噬細(xì)胞中IL-6mRNA相對于NC組和空白對照組明顯下降(P0.05)。結(jié)果提示miRNA146a在M2型巨噬細(xì)胞中的下調(diào)可減少IL-6 mRNA的表達(dá)。結(jié)論:抑制miRNA146a在M2型巨噬細(xì)胞中的表達(dá),可有效減少M(fèi)2型巨噬細(xì)胞中IL-6mRNA的表達(dá),理論上可有效抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長,并可減少M(fèi)1型巨噬細(xì)胞向M2型巨噬細(xì)胞的極化,為膠質(zhì)瘤的微環(huán)境中提供有效的免疫細(xì)胞。
【關(guān)鍵詞】：腦膠質(zhì)瘤 miRNA146a M2型巨噬細(xì)胞 白細(xì)胞介素-6
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 序言9-11
• 材料與方法11-21
• 結(jié)果21-25
• 討論25-27
• 總結(jié)27-28
• 參考文獻(xiàn)28-29
• 綜述29-44
• 參考文獻(xiàn)37-44
• 縮略詞表44-46
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文46-47
• 致謝47-48

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本文編號：605048