本文關(guān)鍵詞：白細(xì)胞和白血病細(xì)胞熒光光譜特征研究

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【摘要】：白血病是嚴(yán)重危害人類健康的造血系統(tǒng)惡性腫瘤,近年來白血病發(fā)病率和死亡率不斷升高。2010年,我國(guó)城市居民死亡原因中,惡性腫瘤居首位,約占總數(shù)的1/3,其中白血病在惡性腫瘤占2.9%。傳統(tǒng)的白血病診斷方法主要有周圍血象檢查、骨髓檢查、細(xì)胞遺傳學(xué)檢查等。熒光光譜技術(shù)是依據(jù)激發(fā)光激發(fā)下不同物質(zhì)分子熒光光譜存在差異,進(jìn)而可通過相關(guān)的檢測(cè)手段區(qū)分出不同的物質(zhì)分子的一種光譜檢測(cè)技術(shù),具有靈敏度高、非介入等特點(diǎn)。目的：基于熒光穩(wěn)態(tài)測(cè)量系統(tǒng)QuantaMaster,利用白細(xì)胞和白血病細(xì)胞白體熒光光譜以及外源性熒光光譜實(shí)現(xiàn)白細(xì)胞和白血病細(xì)胞辨別。為提取外周血實(shí)現(xiàn)白血病熒光光譜診斷奠定理論基礎(chǔ),并推動(dòng)熒光光譜技術(shù)在白血病診斷中的應(yīng)用。方法：檢測(cè)370nm、400nm和440nm激發(fā)光激發(fā)下白細(xì)胞和白血病細(xì)胞的自體熒光光譜,以及405nm激發(fā)光下ALA (Omg/ml、0.125mg/ml、0.25mg/ml、 0.5 mg/ml、1 mg/ml、2 mg/ml)和PSD-007 (Oug/ml、6.25ug/ml、12.5ug/ml、 25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml)孵育2小時(shí)的白血病細(xì)胞的熒光光譜,并結(jié)合特征峰積分和光譜歸一化方法進(jìn)行分析。最后利用峰相對(duì)強(qiáng)度比和光譜差減法,分析了370nm、400nm和440nm激發(fā)光激發(fā)下白細(xì)胞和白血病細(xì)胞自體熒光光譜的差異,以及400nm、440nm激發(fā)光激發(fā)下基于ALA的熒光光譜的差異。結(jié)果：不同波長(zhǎng)激發(fā)光下P628未發(fā)生紅移或藍(lán)移,峰值大小不同�；贏LA、PSD-007的白血病細(xì)胞熒光發(fā)射光譜,不同光敏劑濃度下P636、P626起始位置保持不變,峰值大小不同。400nm激發(fā)下,白細(xì)胞自體熒光光譜的I628/I515約是白血病細(xì)胞的2.9倍,差減光譜P628峰面積百分比約為91.4%；基于ALA的白細(xì)胞的I628/I515約是白血病細(xì)胞的8.6倍,差減光譜P628峰面積百分比約為96.5%。結(jié)論：激發(fā)光波長(zhǎng)及光敏劑濃度對(duì)熒光峰位置無影響,只影響熒光強(qiáng)度；特征峰積分和光譜差減分析下,白細(xì)胞與白血病細(xì)胞的自體熒光和外源性熒光特征差異明顯。
【關(guān)鍵詞】：白血病 自體熒光光譜 外源性熒光光譜
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R733.7;O657.3
【目錄】：

• 英文縮略詞表6-7
• 摘要7-8
• ABSTRACT8-10
• 第一章 緒論10-19
• 1.1 研究背景10-14
• 1.1.1 白血病簡(jiǎn)介10-12
• 1.1.2 白血病傳統(tǒng)診斷方法12-13
• 1.1.3 光譜檢測(cè)技術(shù)在白血病診斷中的應(yīng)用13-14
• 1.2 熒光光譜技術(shù)及其在醫(yī)學(xué)診斷中的應(yīng)用14-16
• 1.2.1 自體熒光法診斷及其應(yīng)用14-15
• 1.2.2 外源性熒光診斷及其應(yīng)用15-16
• 1.3 立題依據(jù)和創(chuàng)新點(diǎn)16-17
• 1.4 論文結(jié)構(gòu)17-19
• 第二章 儀器材料與方法19-21
• 2.1 儀器材料19
• 2.2 方法19-21
• 2.2.1 白血病細(xì)胞培養(yǎng)19
• 2.2.2 脾臟白細(xì)胞分離19
• 2.2.3 白血病細(xì)胞溶液配制19
• 2.2.4 白細(xì)胞溶液配制19
• 2.2.5 細(xì)胞光敏劑孵育19-20
• 2.2.6 白血病細(xì)胞裂解20-21
• 第三章 自體熒光光譜特征分析21-28
• 3.1 目的和方法21-22
• 3.1.1 白細(xì)胞熒光激發(fā)光譜測(cè)量21
• 3.1.2 完全培養(yǎng)基熒光發(fā)射光譜測(cè)量21
• 3.1.3 白細(xì)胞熒光發(fā)射光譜測(cè)量21-22
• 3.1.4 白血病細(xì)胞熒光發(fā)射光譜測(cè)量22
• 3.2 結(jié)果22-26
• 3.2.1 白細(xì)胞熒光激發(fā)光譜22-23
• 3.2.2 不同波長(zhǎng)激發(fā)光激發(fā)下完全培養(yǎng)基的熒光發(fā)射光譜23
• 3.2.3 不同波長(zhǎng)激發(fā)光下白細(xì)胞的熒光發(fā)射光譜23-24
• 3.2.4 不同波長(zhǎng)激發(fā)光下白血病細(xì)胞的熒光發(fā)射光譜24-26
• 3.3 結(jié)論26
• 3.4 討論26-27
• 3.5 本章小結(jié)27-28
• 第四章 外源性熒光光譜特征分析28-41
• 4.1 目的和方法28-29
• 4.1.1 不同濃度ALA孵育下白血病細(xì)胞熒光發(fā)射光譜的測(cè)量28
• 4.1.2 不同濃度ALA孵育下白血病細(xì)胞裂解后熒光發(fā)射光譜的測(cè)量28
• 4.1.3 不同濃度PSD-007孵育下白血病細(xì)胞熒光發(fā)射光譜的測(cè)量28
• 4.1.4 不同濃度PSD-007孵育下白血病細(xì)胞裂解后熒光發(fā)射光譜的測(cè)量28-29
• 4.2 結(jié)果29-33
• 4.2.1 不同ALA濃度孵育下白血病細(xì)胞(未裂解)熒光發(fā)射光譜29-30
• 4.2.2 不同ALA濃度孵育下白血病細(xì)胞(裂解后)熒光發(fā)射光譜30-31
• 4.2.3 不同PSD-007濃度孵育下白血病細(xì)胞(未裂解)熒光發(fā)射光譜31-32
• 4.2.4 不同PSD-007濃度孵育下白血病細(xì)胞(裂解后)熒光發(fā)射光譜32-33
• 4.3 特征算法分析33-38
• 4.3.1 不同ALA濃度對(duì)白血病細(xì)胞(未裂解和裂解后)熒光發(fā)射光譜33-36
• 4.3.1.1 特征峰積分分析33-35
• 4.3.1.2 光譜歸一化分析35-36
• 4.3.2 不同PSD-007濃度對(duì)白血病細(xì)胞(未裂解和裂解后)熒光發(fā)射光譜36-38
• 4.3.2.1 特征峰積分分析36-37
• 4.3.2.2 光譜歸一化分析37-38
• 4.4 結(jié)論38
• 4.5 討論38-40
• 4.6 本章小結(jié)40-41
• 第五章 白細(xì)胞與白血病細(xì)胞熒光特征光譜差異分析41-54
• 5.1 目的和方法41
• 5.1.1 白細(xì)胞和白血病細(xì)胞自體熒光發(fā)射光譜測(cè)量41
• 5.1.2 ALA孵化下白細(xì)胞和白血病細(xì)胞熒光發(fā)射光譜測(cè)量41
• 5.2 結(jié)果41-43
• 5.2.1 不同波長(zhǎng)激發(fā)光激發(fā)下白細(xì)胞與白血病細(xì)胞自體熒光發(fā)射光譜41-42
• 5.2.2 不同波長(zhǎng)激發(fā)光激發(fā)下對(duì)基于ALA的白細(xì)胞與白血病細(xì)胞熒光發(fā)射光譜42-43
• 5.3 特征算法分析43-50
• 5.3.1 白細(xì)胞與白血病細(xì)胞自體熒光光譜分析43-47
• 5.3.1.1 特征峰積分分析43-45
• 5.3.1.2 峰相對(duì)強(qiáng)度比分析45
• 5.3.1.3 光譜差減分析45-47
• 5.3.2 白細(xì)胞與白血病細(xì)胞光敏劑激發(fā)熒光光譜分析47-50
• 5.3.2.1 特征峰積分分析47-48
• 5.3.2.2 峰相對(duì)強(qiáng)度比分析48-49
• 5.3.2.3 光譜差減分析49-50
• 5.4 結(jié)論50-51
• 5.5 討論51-52
• 5.6 本章小結(jié)52-54
• 第六章 總結(jié)及展望54-55
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 發(fā)表論文及專利59-60
• 致謝60

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：602461