本文關(guān)鍵詞：聯(lián)合檢測HER-2基因擴增和K-RAS基因突變在胃癌組織中的意義

  更多相關(guān)文章： 胃癌 HER-2基因 K-RAS基因 FISH IHC 基因測序

【摘要】：背景胃癌是常見的惡性腫瘤,世界每年新增胃癌患者超過93萬,而我國就占60%,發(fā)病率和死亡率超過全球平均水平兩倍,其發(fā)病率呈逐年上升、年輕化趨勢,近年來,青年人胃癌的發(fā)病率較上世紀80年代翻了一番。外科手術(shù)切除是胃癌的首要治療方式,早期胃癌患者通過手術(shù)可以治愈。但多數(shù)胃癌患者在確診時已達中晚期,即使采用以外科手術(shù)、化療、放療和激素治療等為主的綜合治療,效果依然欠佳,5年生存率不到20%。因此,尋找新的治療途徑如分子靶向治療成為胃癌研究的熱點。人類表皮生長因子受體2(HER-2)在胃癌組織中高表達,與胃癌的預(yù)后密切相關(guān),可指導胃癌的分子靶向治療。胃癌中,K-RAS基因的突變率為9%,K-RAS突變導致MAPK通路不依賴于EGFR的結(jié)構(gòu)性激活,從而影響西妥昔單抗的療效。HER-2基因在胃癌方面的研究較多,而K-RAS基因在結(jié)直腸癌方面的研究較多,但在胃癌中的研究卻鮮有報道。有研究表明,結(jié)直腸癌的發(fā)展與HER-2和K-RAS的協(xié)同作用有關(guān),那么兩者在胃癌的發(fā)生發(fā)展中是否有意義呢?因此,本文通過探討HER-2基因擴增與K-RAS基因突變在胃癌中的意義,了解抗腫瘤藥物治療的靶點,為胃癌靶向抗腫瘤藥物治療提供更好的幫助。目的探討胃癌組織中HER-2蛋白表達和基因擴增的關(guān)系,以及HER-2基因擴增與K-RAS基因突變的意義。方法收集解放軍第150中心醫(yī)院2013年6月到2015年10月病理科手術(shù)切除的胃癌根治標本67例。新鮮標本經(jīng)10%中性福爾馬林固定,分別進行常規(guī)HE染色、免疫組化染色(IHC)、熒光原位雜交(FISH)和基因測序的檢測。結(jié)果1.HER-2蛋白陽性表達定位在細胞膜,陽性表達率為40.3%(27/67),其表達率與胃癌的浸潤深度(P0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P0.05)差異有顯著性,與性別(P0.05)、發(fā)病年齡(P0.05)以及組織學類型(P0.05)無顯著相關(guān)性。2.HER-2蛋白表達40.3%(27/67),其中HER-2陽性3+者9.0%(6/67)。HER-2蛋白2+者13.4%(9/67)。HER-2蛋白1+者17.9%(12/67)。FISH檢測HER-2基因擴增率18.5%(5/27),HER-2基因拷貝數(shù)增加和基因擴增者共48.1%(13/27)。3.K-RAS基因突變定量檢測7.5%(5/67),均為K-RAS基因第12密碼子突變,其中低于10%低峰度突變2例,高于10%的高峰度突變3例(突變數(shù)值分別為:17、29、30)。除1例為GGT→GAT突變型外,其它均為GGT→GTT突變型。本組K-RAS基因突變5例中除1例既有K-RAS基因突變,又有HER-2基因擴增,另外的4例HER-2基因無擴增。結(jié)論1.HER-2的蛋白表達率與胃癌浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。HER-2的蛋白表達和基因擴增有高度的一致性,免疫組化法檢測胃癌HER-2蛋白表達可作為臨床治療的篩查手段,對于HER-2蛋白表達(2+)的患者應(yīng)常規(guī)行熒光原位雜交檢測;2.胃癌組織中HER-2檢測有很大的異質(zhì)性,HER-2檢測規(guī)范和細化是正確指導用藥的保證。本研究強調(diào)HER-2檢測的強度和范圍,HER-2蛋白表達劃分為廣泛型、部分型和局灶型,HER-2基因劃分為簇狀、大顆粒狀、點狀和高多體性,能更好的為靶向抗腫瘤藥物治療過程中受益提供量化的參考指標;3.檢測胃癌的HER-2基因,擴增時可選用抗腫瘤藥物治療的靶點曲妥珠單抗,同時檢測K-RAS基因,可選用針對野生型K-RAS基因的抗腫瘤藥物治療的靶點西妥昔單抗;胃癌HER-2基因擴增和K-RAS基因突變的聯(lián)合檢測能更好的為靶向抗腫瘤藥物治療過程中受益提供參考指標。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 HER-2基因 K-RAS基因 FISH IHC 基因測序
【學位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要6-9
• Abstract9-12
• 前言12-13
• 1 材料13-14
• 1.1 研究對象13
• 1.2 制片13
• 1.3 主要試劑盒儀器13-14
• 2 方法14-18
• 2.1 組織學染色方法14
• 2.2 免疫組化及FISH操作前載玻片的處理14
• 2.3 SP免疫組化染色法14-15
• 2.3.1 免疫組化染色操作步驟14-15
• 2.3.2 免疫組化染色強度的判讀15
• 2.4 FISH技術(shù)檢測15-16
• 2.4.1 FISH操作步驟15-16
• 2.4.2 FISH結(jié)果判讀16
• 2.5 K-RAS基因突變定量檢測-焦磷酸測序法16-18
• 2.5.1 樣本處理、核酸提取及PCR體系的配制及產(chǎn)物16-17
• 2.5.2 測序設(shè)置及分析17-18
• 2.5.3 結(jié)果報告18
• 2.6 統(tǒng)計學分析18
• 3 結(jié)果18-20
• 3.1 HER-2 基因擴增與蛋白表達率及其關(guān)系18-19
• 3.2 HER-2 基因擴增與蛋白表達率及其關(guān)系19
• 3.3 K-RAS基因突變率及突變量19-20
• 3.4 HER-2 基因擴增與K-RAS基因突變率的關(guān)系20
• 4 討論20-25
• 參考文獻25-28
• 附圖28-33
• 綜述 胃癌分子靶向治療的研究進展33-48
• 參考文獻42-48
• 中英文縮略語對照表48-49
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況49-50
• 致謝50-51
• 個人簡歷51-52

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李振宇;徐文靜;;K-ras基因與胰腺癌關(guān)系[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2007年20期

2 王小林,魏明發(fā),史慧芬,韓杰;先天性膽管擴張癥K-ras基因突變分析[J];中華小兒外科雜志;2003年05期

3 李建祥,陳銳,童建;吸煙指數(shù)與肺癌患者支氣管肺泡灌洗液中的K-ras基因突變(英文)[J];中國臨床康復;2005年14期

4 關(guān)賽芳,廖美琳,丁嘉安,許凱黎,陳復華,周瑾,范錫鳳;原發(fā)性非小細胞肺癌中K-ras基因突變的研究鍌[J];中國腫瘤臨床;2001年01期

5 陳銳,胡華成,胡筠珠,王愛東,周麗英;肺癌患者支氣管肺泡灌洗液中K-ras基因突變的檢測及其臨床意義[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;2001年12期

6 趙晶瑩;邵春瑩;;K-ras基因突變與胰腺癌關(guān)系的研究進展[J];中國醫(yī)藥導報;2009年25期

7 陳萍;李堅;朱文靜;杭建明;;肺癌患者纖維支氣管鏡活檢標本K-ras基因突變的檢測及其臨床意義[J];江蘇大學學報(醫(yī)學版);2013年06期

8 陳杭薇,鄔光惠,周景,李繼成,尤蘭華,劉曉聯(lián);肺癌呼吸道合胞病毒感染與K-ras基因突變的研究[J];診斷病理學雜志;2000年01期

9 陳雄;孔維佳;張?zhí)K琳;張丹;;K-ras基因在人喉鱗狀細胞癌細胞株(Hep-2)中的表達及其意義[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2006年01期

10 陳雄,孔維佳,蔡廣蓮,張?zhí)K琳,張丹;K-ras基因在人喉鱗狀細胞癌細胞株Hep-2中的表達及其意義[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2005年09期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 趙峰;周清華;罩揚;孫芝琳;孫澤芳;;突變K-ras基因重組腺病毒的構(gòu)建[A];中國生物化學與分子生物學會第八屆會員代表大會暨全國學術(shù)會議論文摘要集[C];2001年

2 朱斌;許示心;楚建軍;李莉華;劉登洋;謝思明;;血漿TPEF、K-ras基因聯(lián)合檢測早期診斷大腸癌[A];江蘇省遺傳學會第七屆代表大會暨學術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2006年

3 張惠丹;宋瑾;王曉楠;徐章潤;戴敬;方瑾;;基于微流控芯片的溫度梯度毛細管電泳系統(tǒng)對大腸癌中K-ras基因點突變的檢測[A];第二屆中國醫(yī)學細胞生物學學術(shù)大會暨細胞生物學教學改革會議論文集[C];2008年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 蔣奎榮;逆轉(zhuǎn)錄病毒載體介導反義K-ras基因治療胰腺癌的實驗研究[D];南京醫(yī)科大學;2005年

2 于威;胰腺癌差異蛋白的篩選及K-ras基因突變對蛋白表達的影響[D];吉林大學;2011年

3 呂純業(yè);重組腺病毒介導的人內(nèi)皮抑素、反義K-Ras基因聯(lián)合轉(zhuǎn)染治療胰腺癌的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2007年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊斌鳳;聯(lián)合檢測HER-2基因擴增和K-RAS基因突變在胃癌組織中的意義[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2016年

2 陳銳;肺癌患者支氣管肺泡灌洗液中K-ras基因突變的檢測及其臨床意義[D];蘇州大學;2001年

3 莫德龍;苦參堿對K-Ras基因突變型結(jié)腸癌的抑制作用及機制的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2015年

，

本文編號：592860