發(fā)布時(shí)間：2017-07-30 06:23

  本文關(guān)鍵詞：聯(lián)合檢測(cè)HER-2基因擴(kuò)增和K-RAS基因突變?cè)谖赴┙M織中的意義

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【摘要】：背景胃癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤,世界每年新增胃癌患者超過(guò)93萬(wàn),而我國(guó)就占60%,發(fā)病率和死亡率超過(guò)全球平均水平兩倍,其發(fā)病率呈逐年上升、年輕化趨勢(shì),近年來(lái),青年人胃癌的發(fā)病率較上世紀(jì)80年代翻了一番。外科手術(shù)切除是胃癌的首要治療方式,早期胃癌患者通過(guò)手術(shù)可以治愈。但多數(shù)胃癌患者在確診時(shí)已達(dá)中晚期,即使采用以外科手術(shù)、化療、放療和激素治療等為主的綜合治療,效果依然欠佳,5年生存率不到20%。因此,尋找新的治療途徑如分子靶向治療成為胃癌研究的熱點(diǎn)。人類(lèi)表皮生長(zhǎng)因子受體2(HER-2)在胃癌組織中高表達(dá),與胃癌的預(yù)后密切相關(guān),可指導(dǎo)胃癌的分子靶向治療。胃癌中,K-RAS基因的突變率為9%,K-RAS突變導(dǎo)致MAPK通路不依賴于EGFR的結(jié)構(gòu)性激活,從而影響西妥昔單抗的療效。HER-2基因在胃癌方面的研究較多,而K-RAS基因在結(jié)直腸癌方面的研究較多,但在胃癌中的研究卻鮮有報(bào)道。有研究表明,結(jié)直腸癌的發(fā)展與HER-2和K-RAS的協(xié)同作用有關(guān),那么兩者在胃癌的發(fā)生發(fā)展中是否有意義呢?因此,本文通過(guò)探討HER-2基因擴(kuò)增與K-RAS基因突變?cè)谖赴┲械囊饬x,了解抗腫瘤藥物治療的靶點(diǎn),為胃癌靶向抗腫瘤藥物治療提供更好的幫助。目的探討胃癌組織中HER-2蛋白表達(dá)和基因擴(kuò)增的關(guān)系,以及HER-2基因擴(kuò)增與K-RAS基因突變的意義。方法收集解放軍第150中心醫(yī)院2013年6月到2015年10月病理科手術(shù)切除的胃癌根治標(biāo)本67例。新鮮標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定,分別進(jìn)行常規(guī)HE染色、免疫組化染色(IHC)、熒光原位雜交(FISH)和基因測(cè)序的檢測(cè)。結(jié)果1.HER-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)定位在細(xì)胞膜,陽(yáng)性表達(dá)率為40.3%(27/67),其表達(dá)率與胃癌的浸潤(rùn)深度(P0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P0.05)差異有顯著性,與性別(P0.05)、發(fā)病年齡(P0.05)以及組織學(xué)類(lèi)型(P0.05)無(wú)顯著相關(guān)性。2.HER-2蛋白表達(dá)40.3%(27/67),其中HER-2陽(yáng)性3+者9.0%(6/67)。HER-2蛋白2+者13.4%(9/67)。HER-2蛋白1+者17.9%(12/67)。FISH檢測(cè)HER-2基因擴(kuò)增率18.5%(5/27),HER-2基因拷貝數(shù)增加和基因擴(kuò)增者共48.1%(13/27)。3.K-RAS基因突變定量檢測(cè)7.5%(5/67),均為K-RAS基因第12密碼子突變,其中低于10%低峰度突變2例,高于10%的高峰度突變3例(突變數(shù)值分別為:17、29、30)。除1例為GGT→GAT突變型外,其它均為GGT→GTT突變型。本組K-RAS基因突變5例中除1例既有K-RAS基因突變,又有HER-2基因擴(kuò)增,另外的4例HER-2基因無(wú)擴(kuò)增。結(jié)論1.HER-2的蛋白表達(dá)率與胃癌浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。HER-2的蛋白表達(dá)和基因擴(kuò)增有高度的一致性,免疫組化法檢測(cè)胃癌HER-2蛋白表達(dá)可作為臨床治療的篩查手段,對(duì)于HER-2蛋白表達(dá)(2+)的患者應(yīng)常規(guī)行熒光原位雜交檢測(cè);2.胃癌組織中HER-2檢測(cè)有很大的異質(zhì)性,HER-2檢測(cè)規(guī)范和細(xì)化是正確指導(dǎo)用藥的保證。本研究強(qiáng)調(diào)HER-2檢測(cè)的強(qiáng)度和范圍,HER-2蛋白表達(dá)劃分為廣泛型、部分型和局灶型,HER-2基因劃分為簇狀、大顆粒狀、點(diǎn)狀和高多體性,能更好的為靶向抗腫瘤藥物治療過(guò)程中受益提供量化的參考指標(biāo);3.檢測(cè)胃癌的HER-2基因,擴(kuò)增時(shí)可選用抗腫瘤藥物治療的靶點(diǎn)曲妥珠單抗,同時(shí)檢測(cè)K-RAS基因,可選用針對(duì)野生型K-RAS基因的抗腫瘤藥物治療的靶點(diǎn)西妥昔單抗;胃癌HER-2基因擴(kuò)增和K-RAS基因突變的聯(lián)合檢測(cè)能更好的為靶向抗腫瘤藥物治療過(guò)程中受益提供參考指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 HER-2基因 K-RAS基因 FISH IHC 基因測(cè)序
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 摘要6-9
• Abstract9-12
• 前言12-13
• 1 材料13-14
• 1.1 研究對(duì)象13
• 1.2 制片13
• 1.3 主要試劑盒儀器13-14
• 2 方法14-18
• 2.1 組織學(xué)染色方法14
• 2.2 免疫組化及FISH操作前載玻片的處理14
• 2.3 SP免疫組化染色法14-15
• 2.3.1 免疫組化染色操作步驟14-15
• 2.3.2 免疫組化染色強(qiáng)度的判讀15
• 2.4 FISH技術(shù)檢測(cè)15-16
• 2.4.1 FISH操作步驟15-16
• 2.4.2 FISH結(jié)果判讀16
• 2.5 K-RAS基因突變定量檢測(cè)-焦磷酸測(cè)序法16-18
• 2.5.1 樣本處理、核酸提取及PCR體系的配制及產(chǎn)物16-17
• 2.5.2 測(cè)序設(shè)置及分析17-18
• 2.5.3 結(jié)果報(bào)告18
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18
• 3 結(jié)果18-20
• 3.1 HER-2 基因擴(kuò)增與蛋白表達(dá)率及其關(guān)系18-19
• 3.2 HER-2 基因擴(kuò)增與蛋白表達(dá)率及其關(guān)系19
• 3.3 K-RAS基因突變率及突變量19-20
• 3.4 HER-2 基因擴(kuò)增與K-RAS基因突變率的關(guān)系20
• 4 討論20-25
• 參考文獻(xiàn)25-28
• 附圖28-33
• 綜述 胃癌分子靶向治療的研究進(jìn)展33-48
• 參考文獻(xiàn)42-48
• 中英文縮略語(yǔ)對(duì)照表48-49
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況49-50
• 致謝50-51
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷51-52

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本文編號(hào)：592860