人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞抑制HepG2作用優(yōu)化方法探索
發(fā)布時間:2017-07-26 19:31
本文關(guān)鍵詞:人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞抑制HepG2作用優(yōu)化方法探索
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【摘要】:間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)是干細(xì)胞家族中重要的成員之一,是具有多向分化潛能和自我更新能力的成體干細(xì)胞。MSCs在多種疾病治療中已經(jīng)進(jìn)入了臨床應(yīng)用階段。課題組之前的研究結(jié)果顯示,人臍帶MSCs上清液能夠影響肝癌細(xì)胞的生長,抑制肝癌細(xì)胞的增殖。本實驗的目的在于探索不同方法對人臍帶MSCs抑制肝癌細(xì)胞作用進(jìn)行優(yōu)化。方法:分別提取腫瘤壞死因子-α (Tumor necrosis factor-α, TNF-α)預(yù)處理人臍帶MSCs的上清液、低氧預(yù)處理人臍帶MSCs的上清液以及沒有做任何處理的人臍帶MSCs上清液,通過間接共培養(yǎng)的方法,將提取的上清液配制成不同濃度的條件培養(yǎng)基,TNF-α預(yù)處理組與低氧預(yù)處理組條件培養(yǎng)基直接處理HepG2,未處理組條件培養(yǎng)基與阿霉素(Adriamycin, ADM)、順鉑(Cisplatin, DDP)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)、紫杉醇(Paclitaxel, PTX)、環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide, CTX)5種抗腫瘤藥物共同處理HepG2,之后用MTS法檢測HepG2增殖。結(jié)果:與人臍帶MSCs上清液條件培養(yǎng)基處理組相比較,TNF-α預(yù)處理人臍帶MSCs的條件培養(yǎng)基對HepG2的增殖沒有影響,低氧預(yù)處理人臍帶MSCs的條件培養(yǎng)基對HepG2增殖的抑制作用較弱;人臍帶MSCs上清液條件培養(yǎng)基與抗腫瘤藥物ADM、DDP、5-FU、PTX、CTX共同處理HepG2,對HepG2增殖的抑制作用較強(qiáng)(p0.01)。結(jié)論及意義:抗腫瘤藥的應(yīng)用能夠加強(qiáng)人臍帶MSCs上清液條件培養(yǎng)基對HepG2的抑制作用,人臍帶MSCs上清液條件培養(yǎng)基與抗腫瘤藥物合用對HepG2的抑制具有協(xié)同作用,有望用于聯(lián)合用藥。
【關(guān)鍵詞】:人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 低氧 腫瘤壞死因子-α 抗腫瘤藥物 肝癌細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R735.7
【目錄】:
- 摘要4-6
- 英文摘要6-10
- 縮略詞中英文對照表10-11
- 第一章 間充質(zhì)干細(xì)胞臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展11-18
- 1.1 MSCs的生物學(xué)特征11-14
- 1.1.1 MSCs的多向分化潛能12
- 1.1.2 MSCs的免疫調(diào)節(jié)能力12-13
- 1.1.3 MSCs的表面標(biāo)志及鑒定13
- 1.1.4 MSCs的其他生物學(xué)特性13-14
- 1.2 MSCs的臨床應(yīng)用14-17
- 1.2.1 細(xì)胞移植治療14-16
- 1.2.2 基因治療16
- 1.2.3 MSCs在組織工程中的應(yīng)用16-17
- 1.3 問題及展望17-18
- 第二章 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對肝癌細(xì)胞抑制作用的優(yōu)化18-41
- 2.1 實驗材料19-20
- 2.1.1 材料19
- 2.1.2 主要實驗試劑19-20
- 2.1.3 主要實驗儀器20
- 2.2 實驗方法20-27
- 2.2.1 培養(yǎng)液配制20-21
- 2.2.2 人臍帶MSCs的培養(yǎng)21-22
- 2.2.3 肝癌細(xì)胞HepG2的培養(yǎng)22-23
- 2.2.4 建立CoCl_2低氧模型23
- 2.2.5 條件培養(yǎng)基的提取23-24
- 2.2.6 不同濃度的條件培養(yǎng)基的配制24-25
- 2.2.7 增殖試劑盒檢測HepG2的細(xì)胞增殖25-27
- 2.3 實驗結(jié)果27-39
- 2.3.1 人臍帶MSCs與肝癌細(xì)胞HepG2培養(yǎng)結(jié)果27
- 2.3.2 人臍帶MSCs上清液抑制HepG2增殖27-28
- 2.3.3 TNF-α預(yù)處理的人臍帶MSCs上清液對HepG2增殖無影響28-31
- 2.3.4 低氧處理的人臍帶MSCs上清液對HepG2增殖抑制無促進(jìn)作用31-33
- 2.3.5 抗腫瘤藥物與人臍帶MSCs協(xié)同作用抑制HepG2增殖33-39
- 2.4 討論39-41
- 2.4.1 TNF-α預(yù)處理的人臍帶MSCs上清液對HepG2增殖無影響39
- 2.4.2 低氧處理的人臍帶MSCs上清液對HepG2的抑制無促進(jìn)作用39-40
- 2.4.3 抗腫瘤藥物與人臍帶MSCs協(xié)同作用抑制HepG2增殖40-41
- 結(jié)論41-42
- 參考文獻(xiàn)42-49
- 致謝49
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 賽音其木格,侯相麟,趙麗,李寧;成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞的研究[J];臨床血液學(xué)雜志;2005年04期
2 劉紅;俞小芳;滕杰;鄒建洲;方藝;劉少鵬;丁小強(qiáng);;低氧預(yù)處理對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖、凋亡和壞死的影響[J];復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2012年06期
,本文編號:578009
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