本文關鍵詞：結直腸癌組織細菌分離培養(yǎng)與鑒定及脆弱擬桿菌感染細胞實驗

  更多相關文章： 結直腸癌 細菌分離鑒定 腸毒性脆弱擬桿菌 KMB_(17)

【摘要】：[目的]在世界范圍內(nèi),結直腸癌作為惡性腫瘤疾病,以其高發(fā)病率威脅著人類的健康,多年的研究證據(jù)已表明腸道菌群在結直腸癌的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要的促進作用。本研究通過對結直腸癌組織中的厭氧菌進行分離培養(yǎng)與鑒定,了解組織中菌群的結構及組分；鑒定與結直腸癌的發(fā)生發(fā)展相關的核心腸道菌群,篩選與結直腸癌發(fā)生發(fā)展關系密切的細菌作為研究對象；通過細菌感染細胞實驗,了解分離所得腸毒性脆弱擬桿菌對KMB17細胞的感染能力。[方法]采集51例2014年至2015年結直腸癌患者手術的組織樣本；在厭氧條件下分離樣本中的細菌,經(jīng)PCR擴增細菌16SrRNA基因,利用16SrRNA基因可變區(qū)菌屬間變異性鑒定細菌種屬；通過分離得到細菌的檢出率確定結直腸癌組織中的核心菌群；利用分離得到的腸毒性脆弱擬桿菌感染KMB17細胞,通過透射電鏡和免疫熒光法觀察感染情況。[結果]本實驗從組織樣本中經(jīng)厭氧培養(yǎng)分離鑒定出172株、35種細菌,其中費格森埃希菌、糞腸球菌、脆弱擬桿菌、多形擬桿菌等檢出率較高,是結直腸癌組織樣本中的核心菌群；通過透射電鏡及免疫熒光檢測均可在細胞內(nèi)觀察到腸毒性脆弱擬桿菌,證實腸毒性脆弱擬桿菌成功進入胞內(nèi)感染KMB17細胞。[結論]在結直腸癌腫瘤組織樣本中致病菌或條件致病菌較益生菌在種類數(shù)量上都有一定優(yōu)勢,費格森埃希菌、糞腸球菌、脆弱擬桿菌、索氏志賀氏菌等致病菌和條件致病菌在結直腸癌的發(fā)生發(fā)展過程中可能起著重要作用；分離所得腸毒性脆弱擬桿菌能成功進入細胞內(nèi)感染KMB17細胞。
【關鍵詞】：結直腸癌 細菌分離鑒定 腸毒性脆弱擬桿菌 KMB_(17)
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.34
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 中文摘要6-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-13
• 材料和方法13-24
• 1 材料13-15
• 1.1 組織樣本13
• 1.2 產(chǎn)腸毒素的脆弱擬桿菌13
• 1.3 KMB_(17)細胞13
• 1.4 實驗動物13
• 1.5 設備與試劑13-15
• 2 方法15-24
• 2.1 組織樣本中厭氧菌及兼性厭氧菌的分離培養(yǎng)與鑒定15-20
• 2.2 ETBF對KMB_(17)細胞的感染實驗20-24
• 結果24-33
• 1 癌旁組織樣本細菌分離情況24
• 2 結直腸癌組織樣本中細菌分離情況24-25
• 3 細菌檢出數(shù)及檢出率25-29
• 4 ETBF鑒定結果29
• 5 感染后倒置顯微鏡下細胞狀態(tài)觀察29-30
• 6 透射電鏡觀察結果30-32
• 7 免疫熒光檢測結果32-33
• 討論33-39
• 結論39-40
• 參考文獻40-49
• 附錄49-52
• 綜述52-64
• 參考文獻60-64
• 攻讀學位期間獲得的學術成果64-65
• 致謝65

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本文編號：568496