本文關(guān)鍵詞：WTX基因在肝癌組織和細(xì)胞株中的表達及臨床意義

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【摘要】：目的:研究WTX(Wilms Tumor gene on the X chromosome)基因在正常肝組織、癌旁組織及肝癌組織中的表達水平,檢測WTX基因在正常肝細(xì)胞及不同惡性程度的肝癌細(xì)胞中的表達,分析比較WTX基因的表達與細(xì)胞惡性程度的關(guān)系。探討WTX基因在肝癌中的表達及其意義。方法:1、收集40例術(shù)前無其他惡性腫瘤病史、未經(jīng)放療、化療、生物治療等并接受手術(shù)治療患者的肝癌組織、癌旁組織(距病灶邊緣2cm以內(nèi)的肝臟組織)及因肝內(nèi)膽管結(jié)石、外傷切除部分的正常肝組織為正常對照組。2、應(yīng)用RT-PCR方法檢測WTX基因m RNA在肝癌組織、癌旁組織及正常肝臟組織中的表達水平及其意義。3、應(yīng)用RT-PCR及Western Blot方法,檢測正常肝細(xì)胞與不同惡性程度的肝癌細(xì)胞中,WTX基因m RNA和蛋白質(zhì)的表達差異,分析WTX基因在不同惡性程度肝癌細(xì)胞之間的聯(lián)系。結(jié)果:1、通過RT-PCR對原發(fā)性肝細(xì)胞癌組織標(biāo)本中WTX基因m RNA的表達水平檢測,提示癌組織明顯低于癌旁組織及正常組織,二者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2、WTX基因的m RNA表達水平與肝癌的臨床TNM分期、腫瘤大小、分化程度、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P0.05)。3、WTX基因的m RNA及蛋白質(zhì)在正常肝細(xì)胞株中呈高表達,在各肝癌細(xì)胞株中呈低表達,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);而各肝癌細(xì)胞株中,各組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:WTX抑癌基因在肝細(xì)胞癌組織中的表達與肝癌的惡性程度、大小呈負(fù)相關(guān),而與肝癌細(xì)胞株的侵襲轉(zhuǎn)移能力可能沒有密切關(guān)系,WTX基因的表達缺失可能是肝細(xì)胞癌發(fā)生的因素之一。
【關(guān)鍵詞】：抑癌基因 WTX 肝細(xì)胞癌 蛋白質(zhì)免疫印跡法 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料與方法12-24
• 2.1 RT-PCR檢測WTX基因在肝癌組織中的轉(zhuǎn)錄水平的表達12-16
• 2.1.1 實驗標(biāo)本12
• 2.1.2 實驗分組12-13
• 2.1.3 主要試劑13
• 2.1.4 主要儀器13-14
• 2.1.5 引物設(shè)計14
• 2.1.6 試驗方法14-16
• 2.2 RT-PCR檢測WTX基因在各細(xì)胞株中轉(zhuǎn)錄水平的表達16-19
• 2.2.1 實驗標(biāo)本16-17
• 2.2.2 主要試劑17
• 2.2.3 主要儀器17
• 2.2.4 引物設(shè)計17
• 2.2.5 細(xì)胞培養(yǎng)17-18
• 2.2.6 各細(xì)胞株總RNA提取18
• 2.2.7 cDNA第一鏈的合成18
• 2.2.8 RT-PCR反應(yīng)18
• 2.2.9 瓊脂糖凝膠電泳18-19
• 2.2.10 結(jié)果分析19
• 2.3 Western-Blot檢測WTX基因在蛋白質(zhì)中的表達水平19-24
• 2.3.1 實驗分組19
• 2.3.2 主要試劑19-20
• 2.3.3 主要儀器20
• 2.3.4 主要試劑的配制20-21
• 2.3.5 實驗方法21-23
• 2.3.6 統(tǒng)計學(xué)分析方法23-24
• 第3章 結(jié)果24-31
• 3.1 WTX mRNA及蛋白質(zhì)在肝細(xì)胞株及各肝癌細(xì)胞株中的表達情況24-27
• 3.2 WTX mRNA在正常肝組織及肝癌組織中的表達情況與患者性別、年齡、腫瘤分化程度、臨床TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的關(guān)系27-31
• 第4章 討論31-35
• 4.1 WTX基因在正常肝細(xì)胞株和肝癌細(xì)胞株中的表達意義31-33
• 4.2 WTX基因在正常肝組織、癌旁和肝癌組織中的表達及臨床意義33
• 4.3 WTX基因的表達與肝癌臨床病理特征間的關(guān)系33-35
• 第5章 結(jié)論與展望35-36
• 5.1 結(jié)論35
• 5.2 展望35-36
• 致謝36-37
• 參考文獻37-40
• 綜述40-47
• 參考文獻44-47

【參考文獻】

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本文編號：519090