本文關(guān)鍵詞：姜黃素對多發(fā)性骨髓瘤MM.1R的作用及機制研究

  更多相關(guān)文章： 多發(fā)性骨髓瘤 姜黃素 細胞凋亡 MM.1R細胞 耐藥

【摘要】：研究目的： 研究姜黃素對多發(fā)性骨髓瘤耐地塞米松(MM.1R)細胞的增殖及凋亡的影響,并探討其可能的作用機制。 研究方法： 采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法檢測不同濃度姜黃素對MM.1R細胞作用不同時間后增殖的影響；利用Annexin V/PI雙染法流式細胞儀檢測不同濃度的姜黃素對MM.1R細胞凋亡的影響；用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blotting)檢測不同濃度的姜黃素對MM.1R細胞作用后,凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9,促凋亡蛋白Bax,凋亡抑制蛋白XIAP、CIAP的表達；用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blotting)檢測不同濃度的姜黃素對MM.1R細胞作用后,信號傳導通路MAPK、 ERK、AKT和NF-κB活化相關(guān)蛋白的表達；用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blotting)同時檢測不同濃度的姜黃素對MM.1R細胞作用后,耐藥相關(guān)蛋白galectin-3、IL-6、Hsp27的表達。 研究結(jié)果： 1.分別以濃度為0、10、20、40ug/ml的姜黃素作用于MM.1R細胞24、48和72小時,結(jié)果顯示：姜黃素(10ug/ml)作用于MM.1R細胞24、48和72小時后,細胞活性減低,呈劑量-時間相關(guān)性；姜黃素(20、40μg/ml)作用于MM.1R細胞24、48和72小時后,細胞活性明顯降低,與對照組(0ug/ml)比較,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05),且其抑制作用隨濃度及時間增加而增加。 2.利用Annexin V/PI雙染法流式細胞儀檢測分別以濃度為0、10、20、40ug/ml的姜黃素作用24h后的MM.1R細胞,早期凋亡率分別為2.35±1.44%、3.06±2.18%、10.16±3.47%、16.72±4.74%,姜黃素在濃度為20、40ug/ml時可明顯誘導MM.1R細胞的凋亡,與對照組(0ug/ml)比較,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05),且其誘導凋亡的作用隨著濃度的增加而增加。 3.用濃度分別為10、20、40ug/ml的姜黃素對MM.1R細胞作用24小時后,Western Blotting法檢測發(fā)現(xiàn),與空白對照(0ug/ml)相比,姜黃素(20.40ug/ml)作用于MM.1R細胞后,凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-8表達水平明顯增加,而Caspase-9的表達水平增加較弱,促凋亡蛋白Bax表達水平明顯增高,凋亡抑制蛋白XIAP的表達水平明顯下降。 4.用濃度分別為10、20、40ug/ml的姜黃素對MM.1R細胞作用24小時后,Western Blotting法檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),與空白對照(0ug/ml)相比信號通路活化相關(guān)蛋白磷酸化MAPKp38、磷酸化ERK p42/44、磷酸化AKT以及磷酸化NF-κBp65的表達均明顯下降。 5.用Western Blotting法檢測用濃度分別為10、20.40ug/ml的姜黃素對MM.1R細胞作用24小時后,與空白對照(0ug/ml)相比,耐藥相關(guān)蛋白IL-6、galectin-3以及Hsp27的表達均明顯下降。 研究結(jié)論： 1.姜黃素可抑制MM.1R細胞的增殖,并誘導其凋亡。 2.姜黃素對MM.1R細胞的作用機制是抑制MAPK、ERK、AKT蛋白激酶以及NF-κB轉(zhuǎn)錄因子等信號通路的活化,并通過依賴Caspase的級聯(lián)反應誘導其凋亡。 3.姜黃素可對MM.1R細胞的耐藥性有逆轉(zhuǎn)作用。
【關(guān)鍵詞】：多發(fā)性骨髓瘤 姜黃素 細胞凋亡 MM.1R細胞 耐藥
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R733.3
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 縮略語10-12
• 1 研究背景12-15
• 2 材料與方法15-19
• 2.1 研究對象15
• 2.2 主要試劑與儀器15-16
• 2.3 主要實驗步驟16-18
• 2.4 統(tǒng)計學處理18-19
• 3 結(jié)果19-27
• 3.1 姜黃素對MM.1R細胞的增殖有抑制作用19-20
• 3.2 姜黃素可誘導MM.1R細胞凋亡20-22
• 3.3 姜黃素可上調(diào)MM.1R細胞凋亡蛋白及促凋亡蛋白的表達,下調(diào)抗凋亡蛋白的表達22-24
• 3.4 姜黃素可抑制MM.1R細胞多條信號通路的活化24-26
• 3.5 姜黃素下調(diào)MM.1R細胞耐藥相關(guān)蛋白的表達26-27
• 4 討論27-32
• 5 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-37
• 綜述37-48
• 參考文獻44-48
• 作者簡歷及在學期間所取得的科研成果48

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張梅春;趙子文;曾軍;何衛(wèi)國;黃侃;;姜黃素對耐順鉑人肺腺癌細胞Survivin表達及其化療敏感性的影響[J];中華腫瘤防治雜志;2007年19期

2 呂靖;英煥春;戴進;;姜黃素增強卵巢癌耐藥細胞株COC1/DDP對順鉑敏感性的研究[J];實用醫(yī)學雜志;2009年08期

3 王磊;柯紅;王一羽;任東明;;姜黃素逆轉(zhuǎn)P糖蛋白介導的膀胱腫瘤多藥耐藥的實驗研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2009年03期

，

本文編號：519028