前列腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中雄激素受體促進(jìn)前列腺癌生長(zhǎng)及侵襲轉(zhuǎn)移能力的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-07-03 23:17
本文關(guān)鍵詞:前列腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中雄激素受體促進(jìn)前列腺癌生長(zhǎng)及侵襲轉(zhuǎn)移能力的研究
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【摘要】:目的探討前列腺癌(PCa)相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAF)中雄激素受體(雄激素受體)對(duì)PCa生長(zhǎng)及侵襲轉(zhuǎn)移能力的作用。方法(1)用基因沉默方法干預(yù)已經(jīng)原代培養(yǎng)并永生化的CAF細(xì)胞中雄激素受體的表達(dá)水平,建立雄激素受體低表達(dá)細(xì)胞(CAF-ARsi)和陰性對(duì)照細(xì)胞(CAF-sc),用Western Blot方法檢測(cè)雄激素受體表達(dá)水平;(2)用實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)阻斷雄激素受體對(duì)CAF分泌生長(zhǎng)因子的影響;(3)將CAF-ARsi、CAF-sc細(xì)胞與PCa細(xì)胞株體外共培養(yǎng),用MTT方法、軟瓊脂糖凝膠實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CAF中雄激素受體表達(dá)水平對(duì)PCa細(xì)胞體外貼壁生長(zhǎng)、懸浮生長(zhǎng)、侵襲能力的影響。結(jié)果(1)成功建立雄激素受體低表達(dá)細(xì)胞(CAF-ARsi)和陰性對(duì)照細(xì)胞(CAF-sc).基因沉默以后,雄激素受體mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著降低,在報(bào)告基因分析中,雄激素受體功能顯著降低;(2)將CAF-ARsi、CAF-sc細(xì)胞與PCa細(xì)胞株P(guān)C3體外共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)干擾CAF中的雄激素受體能夠抑制PC3細(xì)胞的體外貼壁生長(zhǎng)能力、懸浮生長(zhǎng)能力及侵襲轉(zhuǎn)移能力;(3)干擾CAF細(xì)胞中的雄激素受體能夠明顯降低IGF1,FGF7,FGF10,SDF1,HGF等生長(zhǎng)因子的表達(dá)水平。結(jié)論雄激素受體(AR)在前列腺腫瘤活性基質(zhì)細(xì)胞(CAF)中扮演著重要的角色,干擾CAF細(xì)胞的雄激素受體能夠顯著抑制前列腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)及侵襲轉(zhuǎn)移能力。
【關(guān)鍵詞】:前列腺癌 癌相關(guān)成纖維細(xì)胞 生長(zhǎng) 侵襲轉(zhuǎn)移 共培養(yǎng)
【學(xué)位授予單位】:濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R737.25
【目錄】:
- 摘要4-5
- Abstract5-8
- 前言8-10
- 第1章 材料和方法10-18
- 1.1 實(shí)驗(yàn)材料10-14
- 1.1.1 主要試劑(盒)及抗體10-11
- 1.1.2 溶液配制11-12
- 1.1.3 PCR引物12-14
- 1.1.4 細(xì)胞14
- 1.1.5 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備14
- 1.2 實(shí)驗(yàn)方法14-18
- 1.2.1 CAF細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)14-15
- 1.2.2 CAF細(xì)胞與PC3細(xì)胞體外共培養(yǎng)并檢測(cè)生長(zhǎng)及侵襲轉(zhuǎn)移能力15-17
- 1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理17-18
- 第2章 結(jié)果18-21
- 2.1 CAF細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)結(jié)果18
- 2.2 CAF細(xì)胞與PC3細(xì)胞體外共培養(yǎng)并檢測(cè)生長(zhǎng)及侵襲轉(zhuǎn)移能力結(jié)果18-21
- 2.2.1 實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)生長(zhǎng)因子表達(dá)水平情況18-19
- 2.2.2 MTT法觀察PC3貼壁生長(zhǎng)能力情況19
- 2.2.3 軟瓊脂糖凝膠實(shí)驗(yàn)觀察PC3懸浮生長(zhǎng)能力情況19-20
- 2.2.4 Transwell實(shí)驗(yàn)觀察PC3侵襲能力情況20-21
- 第3章 討論21-25
- 結(jié)論25-26
- 參考文獻(xiàn)26-28
- 綜述 雄激素受體在前列戚阱瘤活性基質(zhì)中的作用研究進(jìn)展28-45
- 參考文獻(xiàn)40-45
- 致謝45-46
- 攻讀學(xué)位期間取得的成果46
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
1 于勝?gòu)?qiáng);王科;楊典東;王健濤;李光磊;高振利;;前列腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2014年03期
2 陳珊珊;姚和瑞;;乳腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];中華乳腺病雜志(電子版);2012年03期
,本文編號(hào):515562
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