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前列腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中雄激素受體促進前列腺癌生長及侵襲轉(zhuǎn)移能力的研究

發(fā)布時間:2017-07-03 23:17

  本文關(guān)鍵詞:前列腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中雄激素受體促進前列腺癌生長及侵襲轉(zhuǎn)移能力的研究


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【摘要】:目的探討前列腺癌(PCa)相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAF)中雄激素受體(雄激素受體)對PCa生長及侵襲轉(zhuǎn)移能力的作用。方法(1)用基因沉默方法干預(yù)已經(jīng)原代培養(yǎng)并永生化的CAF細(xì)胞中雄激素受體的表達水平,建立雄激素受體低表達細(xì)胞(CAF-ARsi)和陰性對照細(xì)胞(CAF-sc),用Western Blot方法檢測雄激素受體表達水平;(2)用實時定量PCR方法檢測阻斷雄激素受體對CAF分泌生長因子的影響;(3)將CAF-ARsi、CAF-sc細(xì)胞與PCa細(xì)胞株體外共培養(yǎng),用MTT方法、軟瓊脂糖凝膠實驗、Transwell侵襲實驗檢測CAF中雄激素受體表達水平對PCa細(xì)胞體外貼壁生長、懸浮生長、侵襲能力的影響。結(jié)果(1)成功建立雄激素受體低表達細(xì)胞(CAF-ARsi)和陰性對照細(xì)胞(CAF-sc).基因沉默以后,雄激素受體mRNA及蛋白表達水平顯著降低,在報告基因分析中,雄激素受體功能顯著降低;(2)將CAF-ARsi、CAF-sc細(xì)胞與PCa細(xì)胞株P(guān)C3體外共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)干擾CAF中的雄激素受體能夠抑制PC3細(xì)胞的體外貼壁生長能力、懸浮生長能力及侵襲轉(zhuǎn)移能力;(3)干擾CAF細(xì)胞中的雄激素受體能夠明顯降低IGF1,FGF7,FGF10,SDF1,HGF等生長因子的表達水平。結(jié)論雄激素受體(AR)在前列腺腫瘤活性基質(zhì)細(xì)胞(CAF)中扮演著重要的角色,干擾CAF細(xì)胞的雄激素受體能夠顯著抑制前列腺癌細(xì)胞的生長及侵襲轉(zhuǎn)移能力。
【關(guān)鍵詞】:前列腺癌 癌相關(guān)成纖維細(xì)胞 生長 侵襲轉(zhuǎn)移 共培養(yǎng)
【學(xué)位授予單位】:濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R737.25
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-8
  • 前言8-10
  • 第1章 材料和方法10-18
  • 1.1 實驗材料10-14
  • 1.1.1 主要試劑(盒)及抗體10-11
  • 1.1.2 溶液配制11-12
  • 1.1.3 PCR引物12-14
  • 1.1.4 細(xì)胞14
  • 1.1.5 主要實驗設(shè)備14
  • 1.2 實驗方法14-18
  • 1.2.1 CAF細(xì)胞培養(yǎng)及檢測14-15
  • 1.2.2 CAF細(xì)胞與PC3細(xì)胞體外共培養(yǎng)并檢測生長及侵襲轉(zhuǎn)移能力15-17
  • 1.2.3 統(tǒng)計學(xué)處理17-18
  • 第2章 結(jié)果18-21
  • 2.1 CAF細(xì)胞培養(yǎng)及檢測結(jié)果18
  • 2.2 CAF細(xì)胞與PC3細(xì)胞體外共培養(yǎng)并檢測生長及侵襲轉(zhuǎn)移能力結(jié)果18-21
  • 2.2.1 實時定量PCR檢測生長因子表達水平情況18-19
  • 2.2.2 MTT法觀察PC3貼壁生長能力情況19
  • 2.2.3 軟瓊脂糖凝膠實驗觀察PC3懸浮生長能力情況19-20
  • 2.2.4 Transwell實驗觀察PC3侵襲能力情況20-21
  • 第3章 討論21-25
  • 結(jié)論25-26
  • 參考文獻26-28
  • 綜述 雄激素受體在前列戚阱瘤活性基質(zhì)中的作用研究進展28-45
  • 參考文獻40-45
  • 致謝45-46
  • 攻讀學(xué)位期間取得的成果46

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 于勝強;王科;楊典東;王健濤;李光磊;高振利;;前列腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];中華實驗外科雜志;2014年03期

2 陳珊珊;姚和瑞;;乳腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的研究進展[J];中華乳腺病雜志(電子版);2012年03期



本文編號:515562

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