本文關(guān)鍵詞：靶向谷氨酰胺酵解和氧化還原平衡系統(tǒng)治療肝癌

  更多相關(guān)文章： 氧化還原平衡 谷氨酰胺酵解 968 雙青蒿素 活性氧 肝細胞癌

【摘要】：背景與目的當前腫瘤已經(jīng)成為危及人類健康的最重要的疾病之一,其中肝癌在我國的發(fā)病率以及死亡病例尤為嚴重。除了傳統(tǒng)的手術(shù)和化療外,需要一種新而有效的治療方法。近年來的研究顯示,靶向腫瘤代謝重編程以及氧化還原平衡系統(tǒng)的治療策略有一定的效果。我們前期工作發(fā)現(xiàn),肝癌細胞高表達介導(dǎo)谷氨酰胺酵解的腎型谷氨酰胺酶(GLS1),另外,還驗證了GLS1是一個有效的抗癌靶點。由于腫瘤存在代謝的異質(zhì)性、不同的低氧、pH值等,使得不同的腫瘤細胞對氧化損傷的敏感性也不同。鑒于肝細胞癌存在谷氨酰胺酵解增高、對氧化損傷的敏感性不同等特點,我們提出一種新的治療肝癌策略：首先靶向谷氨酰胺酵解,不僅能夠抑制腫瘤細胞生長增殖,同時也能夠破壞細胞的活性氧清除系統(tǒng),從而使腫瘤細胞對氧化損傷更加敏感；然后,聯(lián)合誘導(dǎo)氧化損傷的藥物來對腫瘤進行高效殺傷。本研究將利用小分子化合物968抑制谷氨酰胺酵解,抑制活性氧清除系統(tǒng)的重要成分谷胱甘肽(glutathione, GSH)的合成,并減少還原型輔酶Ⅱ(NADPH)的生成,使得腫瘤細胞對氧化損傷更加敏感；同時利用雙氫青蒿素(Dihydroartemisinin, DHA)誘導(dǎo)腫瘤細胞胞內(nèi)活性氧(ROS)的大量產(chǎn)生,實現(xiàn)對腫瘤細胞的高效殺傷。同時,我們還探討了聯(lián)合治療抗腫瘤的相關(guān)機制。結(jié)果將為臨床選擇有效治療肝細胞癌提供借鑒。材料與方法1.谷氨酰胺代謝抑制檢測：1)968處理肝癌細胞后,檢測谷氨酰胺酶活性；2)968處理肝癌細胞后,檢測腫瘤細胞內(nèi)GSH的含量；3)968處理細胞后,細胞計數(shù)檢測肝癌增殖情況。2.細胞內(nèi)ROS水平檢測：1)968處理肝癌細胞后,流式細胞術(shù)檢測細胞內(nèi)ROS水平；2)DHA處理肝癌細胞后,流式細胞術(shù)檢測細胞內(nèi)ROS水平；3)968與DHA共同處理肝癌細胞后,流式細胞術(shù)檢測細胞內(nèi)ROS水平。3.協(xié)同作用檢測：1)968與DHA處理細胞后,用MTT方法檢測,根據(jù)結(jié)果計算CI值；2)968與DHA處理細胞后,細胞計數(shù)檢測協(xié)同作用;3)GLS-siRNA與DHA處理細胞后,細胞計數(shù)檢測其協(xié)同作用。4.協(xié)同作用機制檢測：1)NAC預(yù)處理細胞后,細胞計數(shù)方法檢測協(xié)同作用；2)968與DHA處理肝癌細胞后,WB方法檢測細胞凋亡蛋白表達情況。結(jié)果1.968處理肝癌細胞后,能夠抑制肝癌細胞增殖,抑制谷氨酰胺酶活性,抑制胞內(nèi)GSH的合成,誘導(dǎo)肝癌細胞胞內(nèi)ROS水平上升。2.DHA處理肝癌細胞后,能夠誘導(dǎo)肝癌細胞內(nèi)ROS水平上升,表現(xiàn)明顯的抗腫瘤作用。3.968與DHA處理肝癌細胞后,能夠明顯上調(diào)肝癌細胞內(nèi)ROS水平,對細胞具有明顯的協(xié)同殺傷作用。4.968與DHA處理肝癌細胞后,能夠改變細胞發(fā)生細胞凋亡相關(guān)蛋白的表達,證實兩者協(xié)同作用與細胞凋亡的上調(diào)有關(guān)。結(jié)論和意義968與DHA共同處理腫瘤細胞,能夠破壞腫瘤細胞氧化還原穩(wěn)態(tài),誘導(dǎo)ROS水平上升,導(dǎo)致腫瘤細胞細胞凋亡上調(diào),最終實現(xiàn)對腫瘤細胞的協(xié)同殺傷作用。這些發(fā)現(xiàn)能夠為靶向谷氨酰胺代謝的治療策略提供新思路,并對臨床腫瘤治療策略具有一定的借鑒意義。
【關(guān)鍵詞】：氧化還原平衡 谷氨酰胺酵解 968 雙青蒿素 活性氧 肝細胞癌
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 英文縮寫中文對照6-7
• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 緒論11-17
• 參考文獻14-17
• 第一章 968對肝癌細胞谷氨酰胺代謝的影響17-28
• 1.1 實驗背景17
• 1.2 實驗材料與方法17-21
• 1.2.1 實驗材料及儀器17-18
• 1.2.2 實驗方法18-21
• 1.2.3 統(tǒng)計方法21
• 1.3 實驗結(jié)果21-23
• 1.3.1 化合物968對肝癌細胞增值的影響21-22
• 1.3.2 968抑制LM3的增殖和GLS的活性22-23
• 1.4 本章討論23-26
• 參考文獻26-28
• 第二章 968與DHA對肝癌細胞的協(xié)同作用28-37
• 2.1 實驗背景28
• 2.2 實驗材料與方法28-30
• 2.2.1 實驗材料及儀器28-29
• 2.2.2 實驗方法29-30
• 2.2.3 統(tǒng)計方法30
• 2.3 實驗結(jié)果30-33
• 2.3.1 968和DHA對肝癌細胞具有協(xié)同殺傷作用30-33
• 2.4. 討論33-35
• 參考文獻35-37
• 第三章 968與DHA對肝癌細胞協(xié)同作用的機制研究37-48
• 3.1 前言37
• 3.2 實驗材料與方法37-40
• 3.2.1 實驗材料及儀器37-38
• 3.2.238-39
• 3.2.3 統(tǒng)計方法39-40
• 3.3 實驗結(jié)果40-44
• 3.3.1 GLS-siRNA與DHA聯(lián)用引起細胞凋亡40-41
• 3.3.2 968與DHA聯(lián)用明顯上調(diào)胞內(nèi)ROS水平41-43
• 3.3.3 NAC能夠抑制兩者聯(lián)用引起的細胞死亡43-44
• 3.3.4 968與DHA聯(lián)用引起細胞凋亡上調(diào)44
• 3.4. 本章討論44-46
• 參考文獻46-48
• 全文總結(jié)48-49
• 文獻綜述49-69
• 參考文獻58-69
• 學(xué)術(shù)成果69-70
• 附錄70-71
• 致謝71-72

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周晶,沈志祥;過氧化物酶體增殖物激活受體與肝癌[J];腫瘤防治研究;2004年11期

2 段紀成;楊家和;劉凱;吳孟超;;單用絲裂霉素或表柔比星對肝癌細胞株的抑制作用[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2007年04期

3 楊盛力;彭靜;陳孝平;;中藥逆轉(zhuǎn)肝癌多藥耐藥的研究進展[J];肝膽外科雜志;2008年06期

4 魏莉;李愛民;羅榮城;;肝癌多藥耐藥及逆轉(zhuǎn)的研究進展[J];中國藥房;2009年07期

5 王智;;硒-甲基硒代半胱氨酸誘導(dǎo)肝癌SMMC-7721細胞株的凋亡及機制探討[J];江蘇醫(yī)藥;2012年11期

6 李培坤;耿小平;;肝癌耐藥的基因?qū)W研究進展[J];中華腫瘤防治雜志;2012年12期

7 龔民族;;大白鼠肝癌細胞株FSK 7901,FSK 7902的建立和特點[J];解剖學(xué)報;1981年03期

8 曹韻貞,湯釗猷;人體肝癌細胞株研究進展[J];腫瘤;1985年03期

9 ;視黃酸逆轉(zhuǎn)入肝癌細胞株的研究[J];上海醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1987年05期

10 偶曉明,王俊明,黃辰,關(guān)蓮璞,楊培金,林琳;肝癌細胞的融合方法探討[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);1992年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 魏緒勇;王建國;馮曉文;王雁;曹國強;陳海;徐驍;鄭樹森;;肝癌組織中氨基酰化酶-1表達及作用[A];2012中國器官移植大會論文匯編[C];2012年

2 魏緒勇;王建國;馮曉文;王雁;曹國強;陳海;徐驍;鄭樹森;;肝癌組織中氨基�；�-1表達及作用[A];2012年浙江省外科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2012年

3 唐瑞峰;馬艷鵬;吳建飛;孫建;張文華;黃亮;;白細胞介素2和白細胞介素6對肝癌細胞表達血管內(nèi)皮生長因子B的調(diào)節(jié)[A];第6屆全國疑難及重癥肝病大會論文集[C];2011年

4 唐瑞峰;孫超;馬艷鵬;吳建飛;孫建;張文華;;白細胞介素2和白細胞介素6對肝癌細胞表達血管內(nèi)皮生長因子D的調(diào)節(jié)[A];第6屆全國疑難及重癥肝病大會論文集[C];2011年

5 任軍;;肝癌的生物治療[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會教育論文集[C];2004年

6 陳啟楨;林雅慧;;樟芝菌種于中藥草固態(tài)發(fā)酵萃取液對抗人類肝癌動物試驗功效研究[A];海峽兩岸第十屆菌物學(xué)暨第三屆食藥用菌學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

7 楊建林;樊曉暉;;一株新發(fā)現(xiàn)的新城疫病毒高效殺傷肝癌細胞及其作用機制研究[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

8 孫文潔;廖正凱;周福祥;張紅艷;黃成虎;熊杰;周云峰;;放射線對肝癌細胞中端粒酶啟動子活性的影響[A];2007第六屆全國放射腫瘤學(xué)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2007年

9 王魯;湯釗猷;薛瓊;孫惠川;陳軍;高冬梅;趙燕;陳潔;;β干擾素抑制肝癌腫瘤生長和復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的實驗研究[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會論文集[C];2000年

10 葉依霞;周永健;李瑜元;張宗勝;;廣州市人群非酒精性脂肪性肝病的自然病程及危險因素[A];中華醫(yī)學(xué)會第十六次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 李運紅邋胡顏;科學(xué)家從壁虎中分離出抗肝癌成分[N];新華每日電訊;2007年

2 張中橋;AFP可作為治療肝癌的新靶標[N];中國醫(yī)藥報;2006年

3 印高樂;臺灣研究發(fā)現(xiàn)黃體酯酮可降低肝癌復(fù)發(fā)率[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2004年

4 李運紅邋胡顏;我國科學(xué)家首次從壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2007年

5 記者 陳建強邋通訊員 李運紅 胡顏;國內(nèi)首次從壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];光明日報;2007年

6 李運紅邋胡顏;國內(nèi)首次從壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];科技日報;2007年

7 劉道安邋運紅 胡顏;我國學(xué)者從壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];中國醫(yī)藥報;2007年

8 劉道安邋通訊員 運紅 胡顏;壁虎中分離出抗腫瘤活性成分[N];健康報;2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張余琴;MiR-20a激活PTEN/PI3K/AKT通路誘導(dǎo)肝癌輻射抵抗[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

2 葉真龍;Argonaute-2蛋白在肝癌血管生成和擬態(tài)中的功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 王健;缺氧誘導(dǎo)因子2α對肝癌細胞生物學(xué)行為的影響[D];華中科技大學(xué);2006年

4 史以超;CCAAT/增強子結(jié)合蛋白α治療肝癌及其機制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

5 張巨波;干擾素Tα對肝癌復(fù)發(fā)再治療療效及相關(guān)機理的實驗研究[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

6 楊景波;利用光鑷和膜片鉗技術(shù)探索人肝癌細胞株膜電規(guī)律[D];中南大學(xué);2013年

7 隋春陽;TLR4受體信號傳導(dǎo)通路參與人肝癌細胞株HepG-2分泌細胞因子機制的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

8 舒波;缺氧對人肝癌細胞株BEL-7402多藥耐藥性的調(diào)控及HIF-1α RNAi對MDR1的干涉作用[D];中南大學(xué);2006年

9 王瑋;VASN蛋白作為肝癌血清標志物及治療靶標的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

10 陸藝;生存素基因在肝癌中的表達及基于其突變體的轉(zhuǎn)基因治療實驗研究[D];蘇州大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李珊;光動力療法聯(lián)合氟尿嘧啶植入劑治療H22肝癌小鼠移植瘤的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 鄭巖;UC001kfo通過調(diào)控α-SMA對肝癌細胞株HepG2生物學(xué)行為的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

3 包萬員;HtrA1絲氨酸蛋白酶通過XIAP途徑逆轉(zhuǎn)肝癌細胞多藥耐藥的相關(guān)研究[D];蘇州大學(xué);2015年

4 于瀚卿;肝癌HepG2細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激后COX2表達上調(diào)機制及其抗凋亡機制的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

5 王小平;感染紅色熒光蛋白肝癌細胞的實驗研究及雙色熒光示蹤肝癌原位移植瘤模型的建立[D];蘇州大學(xué);2015年

6 姜蓬壘;NK4增強肝癌細胞Li-7對5-FU的敏感性及其作用機制的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

7 徐溢;Elongator對肝癌細胞遷移和侵襲的影響及其機制研究[D];蘇州大學(xué);2015年

8 段玉潔;抑癌基因Arid2調(diào)控肝癌細胞的增殖及相關(guān)分子機制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

9 鄧龍飛;PEP-1介導(dǎo)的HNF4α重組蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)對肝癌細胞的作用[D];華東理工大學(xué);2015年

10 張映林;高強度聚焦超聲不完全消融對體外培養(yǎng)肝癌細胞的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：靶向谷氨酰胺酵解和氧化還原平衡系統(tǒng)治療肝癌

  更多相關(guān)文章： 氧化還原平衡 谷氨酰胺酵解 968 雙青蒿素 活性氧 肝細胞癌

，

本文編號：514841