本文關(guān)鍵詞：外周血單個核細(xì)胞在Sonic hedgehog信號通路中的活化表達

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【摘要】：目的:探討Sonic hedgehog(Shh)信號通路阻斷抗體(Shh Ab)對外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)抗胃癌MC細(xì)胞作用的表達及影響。方法:復(fù)蘇GES-1細(xì)胞,待細(xì)胞生長至70~80%進行誘導(dǎo),加入不含血清和雙抗的DMEM5ml及稀釋為2×10-1mol/L的MNNG,避光培養(yǎng)24h,更換含血清及雙抗的DMEM,7d左右不貼壁細(xì)胞大量脫落,殘留的貼壁細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng),長滿后消化并傳代,此時的細(xì)胞為MC細(xì)胞,并與Ficoll法對正常人(體檢各項指標(biāo)均正常)PBMCs進行密度梯度分離建立共培養(yǎng)體系;于共培養(yǎng)體系中加入Shh Ab,RT-PCR觀察Shh、Gli-1基因的表達并進行半定量數(shù)據(jù)分析;在共培養(yǎng)體系中加入Shh阻斷抗體,流式細(xì)胞術(shù)檢測CD3、CD5、CD69分子表達。結(jié)果:GES-1細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生顯著變化,顯微鏡下呈大小不一的多角形、多核形細(xì)胞,胞體變大,緊密排列并呈團塊狀生長,RT-PCR:Gli-1m RNA在MC+Shh Ab細(xì)胞組值為0.2845±0.0025,低于MC細(xì)胞組的0.5167±0.0109(P0.05),GES-1細(xì)胞組基因表達陰性;流式細(xì)胞:GES-1細(xì)胞組CD3+細(xì)胞數(shù)較少,MNNG誘導(dǎo)組和MC細(xì)胞組CD3+細(xì)胞數(shù)顯著增多,GES-1細(xì)胞組和MNNG誘導(dǎo)組均未見CD69+細(xì)胞,MC細(xì)胞組CD69+細(xì)胞數(shù)顯著增多,GES-1細(xì)胞組、MNNG誘導(dǎo)組和MC細(xì)胞組CD5+細(xì)胞數(shù)均處于低水平,Shh Ab增強PBMCs對MC細(xì)胞的殺傷。結(jié)論:Shh Ab可促進PBMCs的活化,并增強PBMCs抗亞硝酰胺類化合物致癌機制的作用。
【關(guān)鍵詞】：Sonic hedgehog蛋白 GES-1細(xì)胞 MNNG 淋巴細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用縮寫詞中英文對照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-18
• 1.1 實驗材料12
• 1.2 實驗儀器12-13
• 1.3 試劑配置與細(xì)胞培養(yǎng)13-15
• 1.4 細(xì)胞分組15-16
• 1.5 RT-PCR檢測Shh、Gli-1mRNA16
• 1.6 流式細(xì)胞檢測活化的PBMCs16
• 1.7 統(tǒng)計學(xué)分析方法16-18
• 2 結(jié)果18-22
• 2.1 RT-PCR檢測Shh、Gli-1mRNA18-19
• 2.2 流式細(xì)胞檢測活化的PBMCs19-22
• 3 討論22-24
• 4 結(jié)論24-25
• 參考文獻25-27
• 綜述27-39
• 參考文獻34-39
• 致謝39-40
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果40-41
• 個人簡歷41

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 孫梯業(yè);趙永亮;顏偉;石彥;曾冬竹;余佩武;;CXCR4在VEGF-C介導(dǎo)的胃癌淋巴道轉(zhuǎn)移中的作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2008年02期

2 孫艷;黃莉霞;黃文浩;黃斌;;Sonic hedgehog阻斷抗體增強外周血單個核細(xì)胞抗宮頸癌HeLa細(xì)胞的作用[J];中國病理生理雜志;2011年12期

3 ;CXCR4/SDF-1 axis is involved in lymph node metastasis of gastric carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2011年19期

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本文編號：514372