miR-497通過(guò)靶向Smad7基因?qū)θ橄侔┑淖饔醚芯?/H1>
發(fā)布時(shí)間：2017-06-30 18:22
本文關(guān)鍵詞：miR-497通過(guò)靶向Smad7基因?qū)θ橄侔┑淖饔醚芯?/strong>，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】：目的乳腺癌是嚴(yán)重危害女性健康的主要惡性腫瘤之一,同時(shí)也是世界女性發(fā)病率最高的癌癥。全世界每年約有120萬(wàn)女性患乳腺癌,50萬(wàn)死于乳腺癌。在西歐、北美等發(fā)達(dá)國(guó)家,乳腺癌發(fā)病率占女性惡性腫瘤首位。而我國(guó)是乳腺癌發(fā)病率增長(zhǎng)最快的國(guó)家之一,我國(guó)近年來(lái)乳癌發(fā)病率正以每年3%的速度遞增,成為城市中死亡率增長(zhǎng)最快的癌癥,發(fā)病年齡也呈逐漸年輕化的趨勢(shì)。在上海等大中城市中,乳腺癌患病率已連續(xù)20年位居女性惡性腫瘤第一位,嚴(yán)重危害廣大女性的健康。微小RNA(microRNA,miRNA)是一類(lèi)進(jìn)化上保守的非編碼小分子RNA,具有在翻譯水平調(diào)控基因表達(dá)的功能。這些miRNAs可以調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng),組織分化,因而與生命過(guò)程中發(fā)育、疾病有關(guān)。最近的研究發(fā)現(xiàn),miRNA的表達(dá)與多種腫瘤相關(guān),在腫瘤發(fā)生過(guò)程中起至關(guān)重要的作用,這些miRNAs的作用類(lèi)似于抑癌基因和癌基因。不同腫瘤中mi RNA有不同的表達(dá)譜。一種miRNA可以靶向多種靶基因從而發(fā)揮作用,而一個(gè)靶基因可以同時(shí)被多種miRNA靶向。最新研究表明,Smad 7在乳腺腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。本研究中,我們通過(guò)targetscan,miRanda等軟件分析發(fā)現(xiàn)Smad 7可能為mi R-497的靶基因,運(yùn)用雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)、RT-PCR和Western Blot研究方法證實(shí)miR-497通過(guò)靶向Smad 7來(lái)發(fā)揮作用,同時(shí)在MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞系中驗(yàn)證高表達(dá)miR-497對(duì)細(xì)胞功能的影響,為乳腺癌的個(gè)體化治療提供新的靶點(diǎn)。方法我們根據(jù)websites targetscan,miRanda,miRGen and miRBase等軟件發(fā)現(xiàn),Smad 7為miR-497可能的靶基因。為了驗(yàn)證miR-497是否可以靶向Smad 7的3'-UTR區(qū)從而發(fā)揮生物學(xué)作用,我們?cè)O(shè)計(jì)了雙熒光素酶實(shí)驗(yàn),同時(shí)運(yùn)用RT-PCR和Western Blot實(shí)驗(yàn)來(lái)證實(shí)雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。MTT實(shí)驗(yàn),平板克隆實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)來(lái)研究miR-497在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中的作用。結(jié)果1、本研究中,運(yùn)用websites targetscan,miRanda,miRGen and miRBase等軟件發(fā)現(xiàn),miR-497的堿基序列與Smad 7 mRNA 3'-UTR區(qū)存在互補(bǔ)關(guān)系,Smad 7為miR-497的靶點(diǎn)之一。2、通過(guò)雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系中,實(shí)驗(yàn)組(共轉(zhuǎn)染miR-497 mimics與Smad 7 3'-UTR)與對(duì)照組(共轉(zhuǎn)染miR-497 control與Smad 73'-UTR)相比,熒光值明顯下降(P0.05)。共轉(zhuǎn)染mi R-497 mimics與Smad 7 3'-UTR-mut后,熒光值上升(P0.05)。在MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,實(shí)驗(yàn)組(共轉(zhuǎn)染miR-497 mimics與Smad 7 3'-UTR)與對(duì)照組(共轉(zhuǎn)染mi R-497control與Smad 73'-UTR)相比,熒光值明顯下降(P0.05)。共轉(zhuǎn)染miR-497mimics與Smad 7 3'-UTR-mut后,熒光值上升(P0.05)。3、在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,分別過(guò)表達(dá)miR-497后,運(yùn)用RT-PCR技術(shù)和Western Blot實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)Smad 7 mRNA表達(dá)量與Smad 7蛋白的表達(dá)量,發(fā)現(xiàn)在miR-497過(guò)表達(dá)組Smad 7 m RNA與Smad7蛋白的表達(dá)量均下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4、在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,分別按照0、25、50、75、100nmol/l濃度轉(zhuǎn)染miR-497,培養(yǎng)24h、48h、72h后,加入MTT在490nm下測(cè)得相應(yīng)OD值繪制曲線后分析,隨著時(shí)間和濃度的增加,抑制率隨之增加,表現(xiàn)出時(shí)間和濃度的依賴性,表明,miR-497有抑制細(xì)胞增殖的作用。5、在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,分別轉(zhuǎn)染miR-497 mimics(100nM)與miR-497 control,培養(yǎng)48h后,平板克隆實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,與miR-497 control組相比,miR-497 mimics組克隆形成率明顯下降,表明,miR-497有抑制細(xì)胞增殖的作用。6、在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,分別轉(zhuǎn)染miR-497 mimics(100nM)與miR-497 control,培養(yǎng)48h后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期。與miR-497 control組相比,miR-497 mimics組G1期細(xì)胞比例增多(P0.05)。結(jié)論本研究顯示,miR-497在乳腺癌中可以作為一種腫瘤抑制基因。其通過(guò)靶向Smad 7來(lái)發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)作用。在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中過(guò)表達(dá)miR-497可以抑制細(xì)胞增殖,抑制細(xì)胞周期。miR-497可以作為乳腺癌治療的新靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：乳腺腫瘤 miRNA 靶基因 Smad7 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.9
【目錄】： - 中文摘要4-6
- Abstract6-10
- 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明10-11
- 前言11-14
- 研究現(xiàn)狀、成果11-13
- 研究目的、方法13-14
- 對(duì)象和方法14-34
- 1.1 實(shí)驗(yàn)材料14-16
- 1.1.1 細(xì)胞14
- 1.1.2 主要試劑14-16
- 1.1.3 主要儀器16
- 1.2 實(shí)驗(yàn)方法16-33
- 1.2.1 引物設(shè)計(jì)16-17
- 1.2.2 序列合成17
- 1.2.3 細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞凍存17-19
- 1.2.4 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染19-20
- 1.2.5 雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)20-21
- 1.2.6 miRNA RT-PCR21-25
- 1.2.7 mRNA RT-PCR25-27
- 1.2.8 Western blot27-32
- 1.2.9 MTT實(shí)驗(yàn)32
- 1.2.10 平板克隆實(shí)驗(yàn)32
- 1.2.11 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期32-33
- 1.3 統(tǒng)計(jì)方法33-34
- 結(jié)果34-43
- 2.1 生物信息分析、雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)及轉(zhuǎn)染確定Smaad 7 為miR-497靶點(diǎn)34-39
- 2.1.1 生物信息分析確定Smad 7 為miR-497的靶點(diǎn)34
- 2.1.2 MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系中雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證Smad 7 為miR-497的靶點(diǎn)34-35
- 2.1.3 MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證Smad 7 為miR-497的靶點(diǎn)35-39
- 2.2 miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系增殖的影響39-41
- 2.2.1 MTT法檢測(cè)miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系增殖活性的影響39-40
- 2.2.2 平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系克隆形成能力的影響40-41
- 2.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系細(xì)胞周期的影響41-43
- 討論43-47
- 3.1 miR-497通過(guò)靶向Smad 7 發(fā)揮生物學(xué)作用43-45
- 3.2 miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系增殖的影響45-46
- 3.3 miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系細(xì)胞周期的影響46-47
- 結(jié)論47-48
- 參考文獻(xiàn)48-52
- 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明52-53
- 綜述 microRNA與腫瘤研究進(jìn)展53-67
- 綜述參考文獻(xiàn)62-67
- 致謝67
【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條
1 Vera Timmermans-Wielenga;Fritz Rank;Carsten Wiuf;Lars Bolund;;DNA Copy Number Aberrations in Breast Cancer by Array Comparative Genomic Hybridization[J];Genomics Proteomics & Bioinformatics;2009年Z1期
2 魏冰;馬杰;馬智勇;王慧娟;楊科;;肺腺癌患者惡性胸腔積液中EGFR突變狀況分析[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2012年03期
3 唐峰,顧棟樺,王虹,趙為之,李薇,李瓊,許祖德,朱虹光,胡錫琪;FHIT蛋白在乳腺癌進(jìn)展過(guò)程中的表達(dá)[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年03期
4 王富文;徐國(guó)萍;應(yīng)學(xué)翔;林燕蘋(píng);何萍青;;FHIT在乳腺癌中的表達(dá)及其與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系[J];實(shí)用癌癥雜志;2011年04期
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 楊晨;微環(huán)境中趨化因子誘餌受體基因多態(tài)對(duì)乳腺癌轉(zhuǎn)移潛能的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2011年
2 蓋晉宏;乳腺導(dǎo)管原位癌導(dǎo)管破口處細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征及其蛋白差異比較研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年
3 黃曉平;中國(guó)北方食管鱗癌雜合性丟失的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年
4 岳文;骨形成蛋白基因在口腔腫瘤病理中調(diào)控機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1999年
5 胡立德;RhoGDI2和EVL在人乳腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的表達(dá)及功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2007年
6 牟坤;乳腺癌腫瘤細(xì)胞增殖、染色體不穩(wěn)定性及CCND1和chk1基因改變的研究[D];山東大學(xué);2008年
7 熊秀娟;MDM2 SNP309多態(tài)性位點(diǎn)在急性髓系白血病的發(fā)生危險(xiǎn)度的作用及對(duì)化療藥物敏感性的影響[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年
8 江立玉;乳腺癌鉬靶X線表現(xiàn)與其臨床病理特征相關(guān)性的研究[D];山東大學(xué);2012年
9 張慶華;MicroRNAs在病毒性心肌炎發(fā)病中調(diào)控作用的初步研究和新型柯薩奇病毒CVB3減毒株的構(gòu)建與篩選[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年
10 熱娣;特異性靶向晚期糖基化終產(chǎn)物受體（RAGE）的siRNA降低人類(lèi)乳腺癌增殖研究[D];中南大學(xué);2013年
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 李英杰;細(xì)支氣管肺泡癌中PCNA、P16和P27的表達(dá)及其臨床意義[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年
2 楊淑華;乳腺癌相關(guān)抗原基因的cDNA文庫(kù)篩選、鑒定及性質(zhì)分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年
3 王婉;芳香化酶在乳腺癌及增生性病變組織中的表達(dá)及意義[D];吉林大學(xué);2008年
4 宋欣;細(xì)支氣管肺泡癌和肺腺癌分子標(biāo)志物的臨床病理學(xué)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年
5 朱鐳;雌二醇和血清對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)影響的研究[D];上海交通大學(xué);2009年
6 何鑫;AKR1B10蛋白在乳腺癌中的表達(dá)及其意義[D];吉林大學(xué);2012年
7 朱曉雷;細(xì)支氣管肺泡癌的診斷、外科治療及預(yù)后因素研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年
8 張文成;原位腺癌和微浸潤(rùn)腺癌基因差異比較分析及初步驗(yàn)證[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年
9 汪秀;GPR116在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的表達(dá)及功能研究[D];華東師范大學(xué);2010年
10 戚冠斌;肺腺癌患者EGFR基因突變與拷貝狀態(tài)分析[D];河南大學(xué);2012年
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本文編號(hào)：502989
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【摘要】：目的乳腺癌是嚴(yán)重危害女性健康的主要惡性腫瘤之一,同時(shí)也是世界女性發(fā)病率最高的癌癥。全世界每年約有120萬(wàn)女性患乳腺癌,50萬(wàn)死于乳腺癌。在西歐、北美等發(fā)達(dá)國(guó)家,乳腺癌發(fā)病率占女性惡性腫瘤首位。而我國(guó)是乳腺癌發(fā)病率增長(zhǎng)最快的國(guó)家之一,我國(guó)近年來(lái)乳癌發(fā)病率正以每年3%的速度遞增,成為城市中死亡率增長(zhǎng)最快的癌癥,發(fā)病年齡也呈逐漸年輕化的趨勢(shì)。在上海等大中城市中,乳腺癌患病率已連續(xù)20年位居女性惡性腫瘤第一位,嚴(yán)重危害廣大女性的健康。微小RNA(microRNA,miRNA)是一類(lèi)進(jìn)化上保守的非編碼小分子RNA,具有在翻譯水平調(diào)控基因表達(dá)的功能。這些miRNAs可以調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng),組織分化,因而與生命過(guò)程中發(fā)育、疾病有關(guān)。最近的研究發(fā)現(xiàn),miRNA的表達(dá)與多種腫瘤相關(guān),在腫瘤發(fā)生過(guò)程中起至關(guān)重要的作用,這些miRNAs的作用類(lèi)似于抑癌基因和癌基因。不同腫瘤中mi RNA有不同的表達(dá)譜。一種miRNA可以靶向多種靶基因從而發(fā)揮作用,而一個(gè)靶基因可以同時(shí)被多種miRNA靶向。最新研究表明,Smad 7在乳腺腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。本研究中,我們通過(guò)targetscan,miRanda等軟件分析發(fā)現(xiàn)Smad 7可能為mi R-497的靶基因,運(yùn)用雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)、RT-PCR和Western Blot研究方法證實(shí)miR-497通過(guò)靶向Smad 7來(lái)發(fā)揮作用,同時(shí)在MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞系中驗(yàn)證高表達(dá)miR-497對(duì)細(xì)胞功能的影響,為乳腺癌的個(gè)體化治療提供新的靶點(diǎn)。方法我們根據(jù)websites targetscan,miRanda,miRGen and miRBase等軟件發(fā)現(xiàn),Smad 7為miR-497可能的靶基因。為了驗(yàn)證miR-497是否可以靶向Smad 7的3'-UTR區(qū)從而發(fā)揮生物學(xué)作用,我們?cè)O(shè)計(jì)了雙熒光素酶實(shí)驗(yàn),同時(shí)運(yùn)用RT-PCR和Western Blot實(shí)驗(yàn)來(lái)證實(shí)雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。MTT實(shí)驗(yàn),平板克隆實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)來(lái)研究miR-497在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中的作用。結(jié)果1、本研究中,運(yùn)用websites targetscan,miRanda,miRGen and miRBase等軟件發(fā)現(xiàn),miR-497的堿基序列與Smad 7 mRNA 3'-UTR區(qū)存在互補(bǔ)關(guān)系,Smad 7為miR-497的靶點(diǎn)之一。2、通過(guò)雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系中,實(shí)驗(yàn)組(共轉(zhuǎn)染miR-497 mimics與Smad 7 3'-UTR)與對(duì)照組(共轉(zhuǎn)染miR-497 control與Smad 73'-UTR)相比,熒光值明顯下降(P0.05)。共轉(zhuǎn)染mi R-497 mimics與Smad 7 3'-UTR-mut后,熒光值上升(P0.05)。在MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,實(shí)驗(yàn)組(共轉(zhuǎn)染miR-497 mimics與Smad 7 3'-UTR)與對(duì)照組(共轉(zhuǎn)染mi R-497control與Smad 73'-UTR)相比,熒光值明顯下降(P0.05)。共轉(zhuǎn)染miR-497mimics與Smad 7 3'-UTR-mut后,熒光值上升(P0.05)。3、在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,分別過(guò)表達(dá)miR-497后,運(yùn)用RT-PCR技術(shù)和Western Blot實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)Smad 7 mRNA表達(dá)量與Smad 7蛋白的表達(dá)量,發(fā)現(xiàn)在miR-497過(guò)表達(dá)組Smad 7 m RNA與Smad7蛋白的表達(dá)量均下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4、在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,分別按照0、25、50、75、100nmol/l濃度轉(zhuǎn)染miR-497,培養(yǎng)24h、48h、72h后,加入MTT在490nm下測(cè)得相應(yīng)OD值繪制曲線后分析,隨著時(shí)間和濃度的增加,抑制率隨之增加,表現(xiàn)出時(shí)間和濃度的依賴性,表明,miR-497有抑制細(xì)胞增殖的作用。5、在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,分別轉(zhuǎn)染miR-497 mimics(100nM)與miR-497 control,培養(yǎng)48h后,平板克隆實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,與miR-497 control組相比,miR-497 mimics組克隆形成率明顯下降,表明,miR-497有抑制細(xì)胞增殖的作用。6、在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中,分別轉(zhuǎn)染miR-497 mimics(100nM)與miR-497 control,培養(yǎng)48h后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期。與miR-497 control組相比,miR-497 mimics組G1期細(xì)胞比例增多(P0.05)。結(jié)論本研究顯示,miR-497在乳腺癌中可以作為一種腫瘤抑制基因。其通過(guò)靶向Smad 7來(lái)發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)作用。在MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系和MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中過(guò)表達(dá)miR-497可以抑制細(xì)胞增殖,抑制細(xì)胞周期。miR-497可以作為乳腺癌治療的新靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：乳腺腫瘤 miRNA 靶基因 Smad7 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.9
【目錄】：
- 中文摘要4-6
- Abstract6-10
- 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明10-11
- 前言11-14
- 研究現(xiàn)狀、成果11-13
- 研究目的、方法13-14
- 對(duì)象和方法14-34
- 1.1 實(shí)驗(yàn)材料14-16
- 1.1.1 細(xì)胞14
- 1.1.2 主要試劑14-16
- 1.1.3 主要儀器16
- 1.2 實(shí)驗(yàn)方法16-33
- 1.2.1 引物設(shè)計(jì)16-17
- 1.2.2 序列合成17
- 1.2.3 細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞凍存17-19
- 1.2.4 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染19-20
- 1.2.5 雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)20-21
- 1.2.6 miRNA RT-PCR21-25
- 1.2.7 mRNA RT-PCR25-27
- 1.2.8 Western blot27-32
- 1.2.9 MTT實(shí)驗(yàn)32
- 1.2.10 平板克隆實(shí)驗(yàn)32
- 1.2.11 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期32-33
- 1.3 統(tǒng)計(jì)方法33-34
- 結(jié)果34-43
- 2.1 生物信息分析、雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)及轉(zhuǎn)染確定Smaad 7 為miR-497靶點(diǎn)34-39
- 2.1.1 生物信息分析確定Smad 7 為miR-497的靶點(diǎn)34
- 2.1.2 MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系中雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證Smad 7 為miR-497的靶點(diǎn)34-35
- 2.1.3 MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證Smad 7 為miR-497的靶點(diǎn)35-39
- 2.2 miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系增殖的影響39-41
- 2.2.1 MTT法檢測(cè)miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系增殖活性的影響39-40
- 2.2.2 平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系克隆形成能力的影響40-41
- 2.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系細(xì)胞周期的影響41-43
- 討論43-47
- 3.1 miR-497通過(guò)靶向Smad 7 發(fā)揮生物學(xué)作用43-45
- 3.2 miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系增殖的影響45-46
- 3.3 miR-497對(duì)MDA-MB -231乳腺癌細(xì)胞系和MCF- 7 乳腺癌細(xì)胞系細(xì)胞周期的影響46-47
- 結(jié)論47-48
- 參考文獻(xiàn)48-52
- 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明52-53
- 綜述 microRNA與腫瘤研究進(jìn)展53-67
- 綜述參考文獻(xiàn)62-67
- 致謝67
【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條
1 Vera Timmermans-Wielenga;Fritz Rank;Carsten Wiuf;Lars Bolund;;DNA Copy Number Aberrations in Breast Cancer by Array Comparative Genomic Hybridization[J];Genomics Proteomics & Bioinformatics;2009年Z1期
2 魏冰;馬杰;馬智勇;王慧娟;楊科;;肺腺癌患者惡性胸腔積液中EGFR突變狀況分析[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2012年03期
3 唐峰,顧棟樺,王虹,趙為之,李薇,李瓊,許祖德,朱虹光,胡錫琪;FHIT蛋白在乳腺癌進(jìn)展過(guò)程中的表達(dá)[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年03期
4 王富文;徐國(guó)萍;應(yīng)學(xué)翔;林燕蘋(píng);何萍青;;FHIT在乳腺癌中的表達(dá)及其與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系[J];實(shí)用癌癥雜志;2011年04期
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4 岳文;骨形成蛋白基因在口腔腫瘤病理中調(diào)控機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1999年
5 胡立德;RhoGDI2和EVL在人乳腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的表達(dá)及功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2007年
6 牟坤;乳腺癌腫瘤細(xì)胞增殖、染色體不穩(wěn)定性及CCND1和chk1基因改變的研究[D];山東大學(xué);2008年
7 熊秀娟;MDM2 SNP309多態(tài)性位點(diǎn)在急性髓系白血病的發(fā)生危險(xiǎn)度的作用及對(duì)化療藥物敏感性的影響[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年
8 江立玉;乳腺癌鉬靶X線表現(xiàn)與其臨床病理特征相關(guān)性的研究[D];山東大學(xué);2012年
9 張慶華;MicroRNAs在病毒性心肌炎發(fā)病中調(diào)控作用的初步研究和新型柯薩奇病毒CVB3減毒株的構(gòu)建與篩選[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年
10 熱娣;特異性靶向晚期糖基化終產(chǎn)物受體（RAGE）的siRNA降低人類(lèi)乳腺癌增殖研究[D];中南大學(xué);2013年
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2 楊淑華;乳腺癌相關(guān)抗原基因的cDNA文庫(kù)篩選、鑒定及性質(zhì)分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年
3 王婉;芳香化酶在乳腺癌及增生性病變組織中的表達(dá)及意義[D];吉林大學(xué);2008年
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5 朱鐳;雌二醇和血清對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)影響的研究[D];上海交通大學(xué);2009年
6 何鑫;AKR1B10蛋白在乳腺癌中的表達(dá)及其意義[D];吉林大學(xué);2012年
7 朱曉雷;細(xì)支氣管肺泡癌的診斷、外科治療及預(yù)后因素研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年
8 張文成;原位腺癌和微浸潤(rùn)腺癌基因差異比較分析及初步驗(yàn)證[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年
9 汪秀;GPR116在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的表達(dá)及功能研究[D];華東師范大學(xué);2010年
10 戚冠斌;肺腺癌患者EGFR基因突變與拷貝狀態(tài)分析[D];河南大學(xué);2012年
本文關(guān)鍵詞：miR-497通過(guò)靶向Smad7基因?qū)θ橄侔┑淖饔醚芯?/strong>，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
，本文編號(hào)：502989
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