發(fā)布時(shí)間：2017-06-28 20:19

  本文關(guān)鍵詞：低氘水對(duì)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549生長(zhǎng)抑制作用及其相關(guān)機(jī)制的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究低氘水對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549的生長(zhǎng)抑制作用及其相關(guān)機(jī)制。方法:體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)利用MTT法檢測(cè)50ppm低氘水對(duì)A549細(xì)胞增殖的抑制作用;體內(nèi)分別建立裸鼠A549皮下移植瘤和原位移植瘤模型,觀察低氘水對(duì)裸鼠瘤體的影響。建模結(jié)束后,通過實(shí)體瘤觀察和HE組織染色,比較裸鼠肺組織的變化以及低氘水對(duì)皮下和原位移植瘤瘤體的影響。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-seq)技術(shù)檢測(cè)A549細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)情況。通過Gene Ontology對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行功能聚類和生物學(xué)途徑識(shí)別。最后利用氣質(zhì)聯(lián)用的代謝組學(xué)研究方法,比較荷瘤裸鼠血清中代謝物的差異。結(jié)果:MTT實(shí)驗(yàn)表明,使用低氘水處理A549細(xì)胞5d和10d后均出現(xiàn)顯著的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制。裸鼠體內(nèi)A549皮下移植瘤結(jié)果顯示,低氘水組裸鼠瘤體生長(zhǎng)緩慢。裸鼠A549原位移植瘤結(jié)果表明,對(duì)照組肺組織上產(chǎn)生多個(gè)瘤體,分布密集,嚴(yán)重?cái)D壓肺組織,造成肺組織畸形。而低氘水組裸鼠肺組織上僅有少數(shù)瘤體,肺組織形狀保持相對(duì)正常。肺組織HE染色表明,低氘水組肺組織中的腫瘤病灶明顯比對(duì)照組小。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-seq)分析了對(duì)照組、50ppm-5d和50ppm-10d的A549基因表達(dá)情況。找到與增殖密切相關(guān)的差異表達(dá)基因有KRT18、ANGPTL、FTH1、EGFR、GREM1、CAV1等;與凋亡密切相關(guān)的差異表達(dá)基因有BAX、CDKN1A、IER3、PEA15、DNAJB9、EGFR等。通過GO-BP聚類分析,發(fā)現(xiàn)并集差異表達(dá)基因可信度最高的功能聚類為血管生成(p=2.8×10-12),其中包括ITGAV、COL4A2、ID1、ANGPTL4、SERPINE、EPHA2等差異表達(dá)基因�；跉赓|(zhì)聯(lián)用的代謝組學(xué)方法研究了裸鼠血清中的差異代謝物。主成分分析PCA得分圖結(jié)果表明,C與D組血清代謝物無明顯差異;C與LC組、D與LD組比較其血清代謝物都有明顯差異;而LC與LD組血清代謝物的比較,部分樣本出現(xiàn)聚集。利用PLS-DA使LC和LD組樣本點(diǎn)出現(xiàn)明顯聚類,找到對(duì)分組貢獻(xiàn)大的18種代謝物,多為氨基酸和糖類。結(jié)論:低氘水能顯著抑制A549細(xì)胞增殖;低氘水能顯著抑制裸鼠A549皮下移植瘤和原位移植瘤的生長(zhǎng)。差異表達(dá)基因功能聚類提示低氘水在體內(nèi)很有可能通過影響移植瘤的血管生成達(dá)到抑制細(xì)胞增殖的目的。代謝組學(xué)分析表明,低氘水對(duì)原位移植瘤裸鼠代謝的影響主要表現(xiàn)為血清代謝物中糖類物質(zhì)含量的降低。
【關(guān)鍵詞】：低氘水、非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549 皮下移植瘤 原位移植瘤 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R73-3
【目錄】：

• 摘要3-5
• abstract5-10
• 第一章 前言10-17
• 1.1 癌癥及其發(fā)生趨勢(shì)10-11
• 1.2 肺癌11-12
• 1.2.1 肺癌及其發(fā)生趨勢(shì)11
• 1.2.2 肺癌的病理分類及其發(fā)生因素11-12
• 1.3 肺癌的治療手段12-14
• 1.3.1 手術(shù)治療12-13
• 1.3.2 放射治療13
• 1.3.3 化學(xué)藥物治療13
• 1.3.4 分子靶向治療13-14
• 1.4 低氘水14-16
• 1.4.1 低氘水的生物學(xué)效應(yīng)14-15
• 1.4.2 氘的作用機(jī)制15-16
• 1.5 展望16-17
• 第二章 低氘水對(duì)A549細(xì)胞增殖的影響17-22
• 2.1 材料17-18
• 2.1.1 試劑和儀器17-18
• 2.2 方法18-21
• 2.2.1 F12K培養(yǎng)基配制18-19
• 2.2.2 A549細(xì)胞培養(yǎng)19-20
• 2.2.3 MTT法檢測(cè)A549細(xì)胞增殖活性20-21
• 2.2.4 數(shù)據(jù)處理21
• 2.3 結(jié)果21
• 2.4 本章小結(jié)21-22
• 第三章 低氘水對(duì)裸鼠A549移植瘤的影響22-31
• 3.1 低氘水對(duì)裸鼠A549皮下移植瘤的影響22-24
• 3.1.1 材料和方法22
• 3.1.2 裸鼠A549皮下移植瘤模型的構(gòu)建22-23
• 3.1.3 皮下移植瘤瘤體測(cè)量及分析23
• 3.1.4 結(jié)果23-24
• 3.2 低氘水對(duì)裸鼠A549原位移植瘤的影響24-30
• 3.2.1 材料和方法24-25
• 3.2.2 裸鼠A549原位移植瘤模型的構(gòu)建25
• 3.2.3 裸鼠A549原位移植瘤肺組織HE病理染色25-26
• 3.2.4 結(jié)果26-30
• 3.3 本章小結(jié)30-31
• 第四章 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)檢測(cè)低氘水對(duì)A549細(xì)胞基因表達(dá)的影響31-42
• 4.1 材料和方法31-32
• 4.1.1 材料31
• 4.1.2 方法31-32
• 4.2 結(jié)果32-40
• 4.2.1 增殖相關(guān)基因分析33-35
• 4.2.2 凋亡相關(guān)基因分析35-37
• 4.2.3 Gene Ontology分析37-40
• 4.3 本章小結(jié)40-42
• 第五章 基于氣質(zhì)聯(lián)用的肺癌血清代謝組學(xué)研究42-50
• 5.1 材料和方法43-44
• 5.1.1 試劑和儀器43
• 5.1.2 方法43-44
• 5.2 結(jié)果44-49
• 5.2.1 普通水健康裸鼠組（C）和低氘水健康裸鼠組（D）的PCA結(jié)果44-45
• 5.2.2 普通水健康裸鼠組（C）和有瘤普通水裸鼠組（LC）的PCA結(jié)果45-46
• 5.2.3 低氘水健康裸鼠組（D）和低氘水有瘤裸鼠組（LD）的PCA結(jié)果46
• 5.2.4 普通水有瘤裸鼠組（LC）和低氘水有瘤裸鼠組（LD）的PCA結(jié)果46-49
• 5.3 本章小結(jié)49-50
• 第六章 總結(jié)與展望50-52
• 6.1 總結(jié)50-51
• 6.2 展望51-52
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 致謝57-58
• 攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表的論文58-60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊柯君;;全球癌癥狀況最新數(shù)據(jù)更新[J];上海醫(yī)藥;2014年02期

  本文關(guān)鍵詞：低氘水對(duì)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549生長(zhǎng)抑制作用及其相關(guān)機(jī)制的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：495136