本文關(guān)鍵詞：葫蘆素D與葫蘆素I對T細胞淋巴瘤細胞作用的比較研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：T細胞淋巴瘤是一種來源于T細胞的惡性增殖性疾病。2008年WHO淋巴瘤新分類標準中T細胞部分包括T-淋巴母細胞白血病/淋巴瘤和成熟T/NK細胞淋巴瘤兩大類,后者又包括結(jié)外NK/T細胞淋巴瘤,外周T細胞淋巴瘤,成人T細胞白血病/淋巴瘤等多個類型。T細胞淋巴瘤在全球都有發(fā)病,且發(fā)病率呈現(xiàn)明顯的地區(qū)差異,中國、日本、韓國等亞洲國家和北美地區(qū)發(fā)病率明顯高于其他地區(qū)。T細胞淋巴瘤發(fā)病機制目前尚不清楚,異質(zhì)性強,不同亞型臨床表現(xiàn)各異,分型和診斷一直存在爭議。相比B細胞淋巴瘤,T細胞淋巴瘤惡性程度更高,進展迅速,預(yù)后差,目前尚無針對本病統(tǒng)一的最佳治療方案,亟待新藥的開發(fā)。葫蘆素(cucurbitacin)是從葫蘆科和十字花科中提取的四環(huán)三萜類化合物,具有退熱、陣痛、抗炎、抗菌、抗腫瘤等作用。根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)不同,葫蘆素家族被分為葫蘆素A到T共17個亞型。葫蘆素B、D、E、I因抗瘤作用顯著被廣泛研究。其中葫蘆素D與葫蘆素I化學(xué)結(jié)構(gòu)相似,僅有兩處不同:一處不同是葫蘆素D結(jié)構(gòu)中C1與C2之間為單鍵,葫蘆素I相應(yīng)位置為雙鍵;另一處不同為空間構(gòu)型差異。具有抗癌活性的葫蘆素可以引起細胞周期阻滯,生長抑制和凋亡,分子機制涉及多種信號通路。葫蘆素抗腫瘤作用機制與其化學(xué)結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。所在課題組一直致力于葫蘆素D抗腫瘤機制的研究,發(fā)現(xiàn)葫蘆素D可通過抑制NF-κB活化,降低抗凋亡蛋白Bcl-xl和Bcl-2表達,誘導(dǎo)白血病細胞凋亡。本課題通過對比研究葫蘆素D(cucurbitacin D,Cu D)和葫蘆素I(cucurbitacin I,Cu I)對T細胞淋巴瘤細胞的作用,分析其化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗癌機制的關(guān)系,為相關(guān)藥物開發(fā)及T細胞淋巴瘤治療提供參考。主要研究內(nèi)容如下:第一部分比較葫蘆素D與葫蘆素I對小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞增殖的影響及其作用機制目的:比較葫蘆素D和葫蘆素I對小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞的作用,分析其化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗癌機制的關(guān)系,為相關(guān)藥物開發(fā)及T細胞淋巴瘤治療提供參考。方法:1小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞在DMEM培養(yǎng)基中常規(guī)培養(yǎng),每24~48小時傳代,實驗均使用對數(shù)期細胞。2 Cell Titer-Glo#174;熒光細胞活性檢測法檢測并比較葫蘆素D與葫蘆素I對小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞增殖的影響:分別用葫蘆素D和葫蘆素I刺激細胞,觀察藥物刺激組細胞對細胞形態(tài)的影響,Cell Titer-Glo#174;熒光細胞活性法檢測細胞活性。3 Western Blot法檢測并比較葫蘆素D與葫蘆素I對小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞凋亡的影響:葫蘆素D與葫蘆素刺激EL4細胞,提取細胞總蛋白,Western Blot法檢測并比較對照組及葫蘆素D、葫蘆素I刺激后EL4細胞內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白PARP與Caspase-3活化及表達情況。4 Western Blot法檢測并比較葫蘆素D與葫蘆素I在小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞中對NF-κB p65活化的影響:葫蘆素D與葫蘆素刺激EL4細胞,提取細胞總蛋白,Western Blot法檢測并比較對照組及葫蘆素D、葫蘆素I刺激后EL4細胞內(nèi)NF-κB p65活化及表達情況。結(jié)果:1 Cell Titer-Glo#174;熒光細胞活性檢測法結(jié)果顯示葫蘆素D與葫蘆素I對小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞增殖均有抑制作用,作用具有時間-劑量依賴性,且葫蘆素I對EL4細胞增殖的抑制作用強于葫蘆素D(P0.05)。2 Western Blot法結(jié)果顯示葫蘆素D與葫蘆素I可使小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白Cleaved-PARP,Cleaved-caspase-3表達增加,且葫蘆素I作用強于葫蘆素D(P0.05)。3葫蘆素D與葫蘆素I可以抑制NF-κB p65活化,且葫蘆素I作用強于葫蘆素D(P0.05)。結(jié)論:1葫蘆素D與葫蘆素I可抑制小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞NF-κB p65磷酸化激活,活化caspase-3和PARP誘導(dǎo)細胞凋亡,抑制細胞增殖。2葫蘆素I對EL4細胞抑制作用強于葫蘆素D。第二部分 比較葫蘆素D與葫蘆素I 對人T細胞淋巴瘤細胞株及T細胞淋巴瘤患者和健康志愿者外周血淋巴細胞的影響目的:比較葫蘆素D和葫蘆素I對人T細胞淋巴瘤Hu T78,Hu T102,MT-2,MT-4細胞,T細胞淋巴瘤患者及健康志愿者外周血淋巴細胞的作用,進一步評價葫蘆素D和葫蘆素I用于T細胞淋巴瘤治療的價值。方法:1人T細胞淋巴瘤Hu T78,Hu T102,MT-2,MT-4細胞在DMEM培養(yǎng)基中常規(guī)培養(yǎng),每24~48小時傳代,實驗均使用對數(shù)期細胞。2 Cell Titer-Glo#174;熒光細胞活性檢測法檢測并比較葫蘆素D與葫蘆素I對Hu T78,Hu T102,MT-2,MT-4細胞增殖的影響:分別用葫蘆素D和葫蘆素I刺激細胞,Cell Titer-Glo#174;熒光細胞活性法檢測細胞活性。3 T細胞淋巴瘤患者及健康志愿者外周血淋巴細胞分離:取T細胞淋巴瘤患者及健康志愿者外周血12~20m L,Lympholyte法分離淋巴細胞。4 Cell Titer-Glo#174;熒光細胞活性檢測法檢測并比較葫蘆素D與葫蘆素I對人外周血淋巴細胞增殖的影響:分別用葫蘆素D和葫蘆素I刺激細胞,Cell Titer-Glo#174;熒光細胞活性法檢測細胞活性。結(jié)果:1葫蘆素D與葫蘆素I可抑制人T細胞淋巴瘤Hu T78,Hu T102,MT-2,MT-4細胞增殖,且葫蘆素I對細胞增殖的抑制作用強于葫蘆素D(P0.05)。2葫蘆素D與葫蘆素I可抑制T細胞淋巴瘤患者外周血淋巴細胞增殖(P0.05),而對健康志愿者外周血淋巴細胞無抑制作用(P0.05)。結(jié)論:1葫蘆素D與葫蘆素I可抑制人T細胞淋巴瘤細胞株Hu T78,Hu T102,MT-2,MT-4及T細胞淋巴瘤患者外周血淋巴細胞增殖,葫蘆素I作用強于葫蘆素D。2葫蘆素D與葫蘆素I可抑制T細胞淋巴瘤患者外周血淋巴細胞增殖,而相同濃度刺激對健康志愿者外周血淋巴細胞增殖無抑制作用。第二部分比較葫蘆素D與葫蘆素I對人T細胞淋巴瘤細胞株及T細胞淋
【關(guān)鍵詞】：T細胞淋巴瘤 葫蘆素D 葫蘆素I 細胞凋亡 NF-κB
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R733.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 引言12-14
• 第一部分 比較葫蘆素D與葫蘆素I對小鼠T細胞淋巴瘤EL4細胞增殖的影響及其作用機制14-38
• 前言14-15
• 材料與方法15-19
• 結(jié)果19-22
• 附圖22-28
• 附表28-32
• 討論32-34
• 小結(jié)34-35
• 參考文獻35-38
• 第二部分 比較葫蘆素D與葫蘆素I對人T細胞淋巴瘤細胞株及T細胞淋巴瘤患者和健康志愿者外周血淋巴細胞的影響38-58
• 前言38-39
• 材料與方法39-41
• 結(jié)果41-43
• 附圖43-50
• 附表50-54
• 討論54-55
• 小結(jié)55-56
• 參考文獻56-58
• 結(jié)論58-59
• 綜述 NF-κB：聯(lián)系慢性炎癥與腫瘤的關(guān)鍵分子59-66
• 參考文獻63-66
• 致謝66-67
• 個人簡歷67

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李小秋;李甘地;高子芬;周小鴿;朱雄增;;中國淋巴瘤亞型分布:國內(nèi)多中心性病例10002例分析[J];診斷學(xué)理論與實踐;2012年02期

  本文關(guān)鍵詞：葫蘆素D與葫蘆素I對T細胞淋巴瘤細胞作用的比較研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：492216