姜黃素聯(lián)合伊馬替尼對(duì)脊索瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響及機(jī)制初步研究
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【摘要】:目的觀察姜黃素聯(lián)合伊馬替尼對(duì)脊索瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響,并初步探討其作用機(jī)制。方法體外培養(yǎng)脊索瘤細(xì)胞系CM-319,給予不同濃度的伊馬替尼和(或)姜黃素作用24-72h,WST-1檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況;實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)伊馬替尼和(或)姜黃素作用CM-319細(xì)胞24h后血小板源性生長(zhǎng)因子受體-β(PDGFR-β)m RNA的表達(dá)水平;Western blot檢測(cè)PDGFR-β、bcl-2、caspase-3蛋白的表達(dá)以及Akt的磷酸化;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果1、隨著伊馬替尼和姜黃素濃度的增加,各單藥及兩者聯(lián)合使用對(duì)CM-319細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用逐漸加強(qiáng)。當(dāng)兩者聯(lián)合使用對(duì)CM-319細(xì)胞存活率為50%時(shí),伊馬替尼和姜黃素的聯(lián)合系數(shù)為0.86。2、10μmol/L姜黃素并不能下調(diào)CM-319細(xì)胞表達(dá)PDGFR-βm RNA,但可抑制PDGFR-β蛋白的表達(dá),且隨著其濃度的遞增,m RNA和蛋白表達(dá)水平逐漸降低。1μmol/L伊馬替尼對(duì)PDGFR-βm RNA以及蛋白表達(dá)無明顯影響。當(dāng)其聯(lián)合10μmol/L姜黃素作用24h后,PDGFR-βm RNA以及蛋白表達(dá)水平顯著降低。3、采用1μmol/L伊馬替尼和10μmol/L姜黃素聯(lián)合處理細(xì)胞后,磷酸化Akt的水平顯著降低。4、單純給予1μmol/L伊馬替尼或10μmol/L姜黃素處理對(duì)CM-319細(xì)胞凋亡無明顯影響。給予20μmol/L姜黃素處理后,CM-319細(xì)胞凋亡有所增加,但給予1μmol/L伊馬替尼和10~20μmol/L姜黃素共同作用后,凋亡細(xì)胞比例顯著增高。同時(shí),caspase-3的含量也顯著增高,而bcl-2有所降低。結(jié)論1.伊馬替尼聯(lián)合姜黃素可抑制脊索瘤細(xì)胞增殖可能與下調(diào)PDGFR-β的表達(dá)及抑制PI3K/Akt的磷酸化有關(guān);2.姜黃素聯(lián)合伊馬替尼促進(jìn)CM-319細(xì)胞凋亡可能是通過降低bcl-2,并上調(diào)caspase-3的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】:伊馬替尼 姜黃素 脊索瘤
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R739.4
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-8
- 常用英文縮寫8-11
- 第1章 前言11-15
- 第2章 材料與方法15-27
- (一)實(shí)驗(yàn)材料15-17
- 1.主要實(shí)驗(yàn)儀器15
- 2.細(xì)胞株15
- 3.主要實(shí)驗(yàn)試劑15-17
- (二)方 法17-27
- 第3章 結(jié)果27-35
- 1. 伊馬替尼協(xié)同姜黃素抑制CM-319細(xì)胞增殖27
- 2. 姜黃素抑制CM-319細(xì)胞PDGFR-βmRNA表達(dá)27-28
- 3. 姜黃素抑制CM-319細(xì)胞PDGFR-β 蛋白表達(dá)28-29
- 4.姜黃素協(xié)同伊馬替尼抑制CM-319細(xì)胞PDGFR-β mRNA表達(dá).29-30
- 5. 姜黃素協(xié)同伊馬替尼抑制CM-319細(xì)胞PDGFR-β 蛋白表達(dá)30-31
- 6. 姜黃素協(xié)同伊馬替尼抑制CM-319細(xì)胞Akt磷酸化31-32
- 7. 姜黃素可協(xié)同伊馬替尼促進(jìn)CM-319細(xì)胞凋亡32-33
- 8. 姜黃素可協(xié)同伊馬替尼促進(jìn)凋亡相關(guān)分子的表達(dá)33-35
- 第4章 討論35-39
- 第5章 結(jié)論39-41
- 附錄41-45
- 參考文獻(xiàn)45-49
- 文獻(xiàn)綜述49-57
- 參考文獻(xiàn)53-57
- 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果57-59
- 致謝59
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本文編號(hào):491791
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