本文關鍵詞：MCPH1增強宮頸癌Caski細胞對順鉑敏感性的效應研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：MCPH1 (Microcephalin 1),也稱為BRIT1,具有抑制人類端粒酶逆轉錄酶的功能,是細胞周期檢測點的調節(jié)蛋白,參與DNA損傷應答和修復、維持基因組的穩(wěn)定性。MCPH1的表達缺失可導致原發(fā)性小頭畸形,參與人類多種惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展,由此證明MCPH1是一個腫瘤抑制基因。宮頸癌是婦女常見的侵襲性腫瘤,研究證實,宮頸癌中MCPH1呈表達缺失,并且MCPH1表達缺失與宮頸癌細胞增殖、凋亡等多種生物學行為有關。順鉑是宮頸癌治療中常用化療藥物,主要通過激活死亡受體信號轉導通路,引起腫瘤細胞凋亡,但順鉑的長期使用使腫瘤細胞對順鉑的耐藥性增強。鑒于MCPH1是一個腫瘤抑制基因,本課題通過將MCPH1作為增強化療藥物敏感性的因子,將MCPH1過表達體系和順鉑結合處理宮頸癌Caski細胞,檢測Caski細胞增殖、凋亡效應的改變,并初步探討其機制。采用的主要實驗方法如下：1.經(jīng)重組慢病毒Lent-MCPH1和慢病毒空載體Lent-vector轉染并篩選的宮頸癌Caski細胞,即過表達組(Lent-MCPH1)和陰性對照組(Lent-vector),分別用順鉑處理,MTT法檢測生長抑制效率,制定增殖抑制曲線。2.將Lent-MCPH1組和Lent-vector組分別用順鉑處理后,DAPI染色法觀察細胞凋亡形態(tài),用流式細胞儀檢測細胞凋亡率。3.Real-time PCR檢測相關基因Bax、Caspase-3和p53 mRNA表達水平。通過以上試驗,得出以下結果和結論：1. Lent-vector組細胞經(jīng)順鉑處理后,其增殖明顯受到抑制；而在順鉑處理的兩組細胞中,與Lent-vector對照組相比,Lent-MCPH1組細胞受到的生長抑制作用更加明顯。2. DAPI染色形態(tài)學顯示,Lent-vector組細胞經(jīng)順鉑處理后,細胞凋亡明顯增多；而在順鉑處理的兩組細胞中,Lent-MCPH1組的凋亡小體的量比Lent-vector組明顯增多,可見致密強熒光。同樣,流式細胞儀檢測細胞凋亡率結果為,順鉑處理Lent-vector細胞后,其早期和晚期凋亡率均明顯升高,與順鉑處理前相比其總凋亡率升高了44.84%；而在順鉑處理的兩組細胞中,Lent-MCPH1組的總凋亡率比Lent-vector組高13.21%,其中晚期凋亡更明顯,Lent-MCPH1組比Lent-vector組高17.16%。3. Real-time PCR檢測凋亡相關基因mRNA表達水平顯示為：Lent-vector組細胞經(jīng)順鉑處理前后相比,處理后的細胞Bax、Caspase-3、 p53的mRNA表達分別上升0.61、0.93和1.85倍；而在順鉑處理的兩組細胞中,Lent-MCPH1組細胞Bax、Caspase-3、p53的mRNA表達比Lent-vector組分別高出1.96、0.78、0.12倍。MCPH1可通過抑制增殖和促進凋亡等機制,來增強宮頸癌Caski細胞對順鉑的敏感性。
【關鍵詞】：MCPH1 順鉑 宮頸癌 化療敏感性
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-13
• 前言13-14
• 1 材料與方法14-19
• 2 實驗結果19-23
• 3 討論23-26
• 全文總結26-27
• 參考文獻27-29
• 文獻綜述29-39
• 參考文獻33-39
• 致謝39-40
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文40

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本文編號：485555