本文關(guān)鍵詞：MCPH1增強(qiáng)宮頸癌Caski細(xì)胞對(duì)順鉑敏感性的效應(yīng)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：MCPH1 (Microcephalin 1),也稱為BRIT1,具有抑制人類端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶的功能,是細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)的調(diào)節(jié)蛋白,參與DNA損傷應(yīng)答和修復(fù)、維持基因組的穩(wěn)定性。MCPH1的表達(dá)缺失可導(dǎo)致原發(fā)性小頭畸形,參與人類多種惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展,由此證明MCPH1是一個(gè)腫瘤抑制基因。宮頸癌是婦女常見的侵襲性腫瘤,研究證實(shí),宮頸癌中MCPH1呈表達(dá)缺失,并且MCPH1表達(dá)缺失與宮頸癌細(xì)胞增殖、凋亡等多種生物學(xué)行為有關(guān)。順鉑是宮頸癌治療中常用化療藥物,主要通過激活死亡受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,引起腫瘤細(xì)胞凋亡,但順鉑的長(zhǎng)期使用使腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性增強(qiáng)。鑒于MCPH1是一個(gè)腫瘤抑制基因,本課題通過將MCPH1作為增強(qiáng)化療藥物敏感性的因子,將MCPH1過表達(dá)體系和順鉑結(jié)合處理宮頸癌Caski細(xì)胞,檢測(cè)Caski細(xì)胞增殖、凋亡效應(yīng)的改變,并初步探討其機(jī)制。采用的主要實(shí)驗(yàn)方法如下：1.經(jīng)重組慢病毒Lent-MCPH1和慢病毒空載體Lent-vector轉(zhuǎn)染并篩選的宮頸癌Caski細(xì)胞,即過表達(dá)組(Lent-MCPH1)和陰性對(duì)照組(Lent-vector),分別用順鉑處理,MTT法檢測(cè)生長(zhǎng)抑制效率,制定增殖抑制曲線。2.將Lent-MCPH1組和Lent-vector組分別用順鉑處理后,DAPI染色法觀察細(xì)胞凋亡形態(tài),用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。3.Real-time PCR檢測(cè)相關(guān)基因Bax、Caspase-3和p53 mRNA表達(dá)水平。通過以上試驗(yàn),得出以下結(jié)果和結(jié)論：1. Lent-vector組細(xì)胞經(jīng)順鉑處理后,其增殖明顯受到抑制；而在順鉑處理的兩組細(xì)胞中,與Lent-vector對(duì)照組相比,Lent-MCPH1組細(xì)胞受到的生長(zhǎng)抑制作用更加明顯。2. DAPI染色形態(tài)學(xué)顯示,Lent-vector組細(xì)胞經(jīng)順鉑處理后,細(xì)胞凋亡明顯增多；而在順鉑處理的兩組細(xì)胞中,Lent-MCPH1組的凋亡小體的量比Lent-vector組明顯增多,可見致密強(qiáng)熒光。同樣,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率結(jié)果為,順鉑處理Lent-vector細(xì)胞后,其早期和晚期凋亡率均明顯升高,與順鉑處理前相比其總凋亡率升高了44.84%；而在順鉑處理的兩組細(xì)胞中,Lent-MCPH1組的總凋亡率比Lent-vector組高13.21%,其中晚期凋亡更明顯,Lent-MCPH1組比Lent-vector組高17.16%。3. Real-time PCR檢測(cè)凋亡相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平顯示為：Lent-vector組細(xì)胞經(jīng)順鉑處理前后相比,處理后的細(xì)胞Bax、Caspase-3、 p53的mRNA表達(dá)分別上升0.61、0.93和1.85倍；而在順鉑處理的兩組細(xì)胞中,Lent-MCPH1組細(xì)胞Bax、Caspase-3、p53的mRNA表達(dá)比Lent-vector組分別高出1.96、0.78、0.12倍。MCPH1可通過抑制增殖和促進(jìn)凋亡等機(jī)制,來增強(qiáng)宮頸癌Caski細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：MCPH1 順鉑 宮頸癌 化療敏感性
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對(duì)照5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-13
• 前言13-14
• 1 材料與方法14-19
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果19-23
• 3 討論23-26
• 全文總結(jié)26-27
• 參考文獻(xiàn)27-29
• 文獻(xiàn)綜述29-39
• 參考文獻(xiàn)33-39
• 致謝39-40
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文40

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