本文關(guān)鍵詞：毛蘭素調(diào)控IDO誘導(dǎo)的小鼠Lewis肺癌細(xì)胞血管生成研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：腫瘤血管生成是腫瘤生長轉(zhuǎn)移過程中的重要環(huán)節(jié),為實體腫瘤的生長輸送必需的營養(yǎng)物質(zhì)。目前抑制腫瘤血管生成已經(jīng)成為臨床上治療非小細(xì)胞肺癌的一個重要手段,并取得了一定的療效。毛蘭素是從石斛中分離得到的聯(lián)芐類天然產(chǎn)物,其抗腫瘤血管生成活性已被報道。IDO在癌癥發(fā)病機制中調(diào)節(jié)異常。雖然目前對于IDO的研究主要圍繞其免疫學(xué)功能,但IDO在血管生成等非免疫學(xué)方面也起到了相當(dāng)重要的作用。因此本課題旨在將毛蘭素與IDO聯(lián)系起來,探討毛蘭素能否通過調(diào)控IDO的表達來發(fā)揮其抗血管生成作用,為肺癌的抗血管生成治療提供理論依據(jù)。我們首先檢測了IDO過表達對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。研究表明IDO能夠增加2LL細(xì)胞的貼壁性,促進2LL細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移及血管生成擬態(tài),并增強血管內(nèi)皮細(xì)胞依賴性的血管生成。接下來我們通過Western blot、Real-time PCR及HPLC實驗研究了毛蘭素對IDO的調(diào)控作用,發(fā)現(xiàn)毛蘭素可以明顯下調(diào)細(xì)胞中IDO在蛋白及mRNA水平的表達,并抑制了IDO的酶活性。在明確了毛蘭素對IDO的作用效果后,我們進行了Transwell實驗,結(jié)果顯示毛蘭素顯著抑制了IDO誘導(dǎo)的2LL細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移能力。血管生成實驗表明毛蘭素不僅能夠抑制IDO引起的內(nèi)皮細(xì)胞血管生成,還能抑制2LL-IDO細(xì)胞的血管生成擬態(tài)。最后,我們檢測了毛蘭素對IDO誘導(dǎo)的血管生成過程中關(guān)鍵信號分子表達的影響,發(fā)現(xiàn)毛蘭素可能是通過阻斷JAK2/STAT3的磷酸化,下調(diào)其下游靶基因MMP-2和MMP-9的表達,并減少IDO介導(dǎo)的炎癥介質(zhì)COX-2、HIF-1α及IL-6的表達,從而對IDO誘導(dǎo)的血管生成產(chǎn)生抑制作用。綜上所述,毛蘭素可能是通過下調(diào)IDO的表達來抑制IDO誘導(dǎo)的血管生成,從而發(fā)揮其抗腫瘤血管生成的功效。本研究為有效切斷腫瘤血供奠定了基礎(chǔ),為癌癥治療提供了方向。
【關(guān)鍵詞】：血管生成 毛蘭素 吲哚胺2 3-雙加氧酶(IDO) 肺癌
【學(xué)位授予單位】：華東理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-11
• 第1章 緒論11-22
• 1.1 研究背景11
• 1.2 鼓槌石斛研究概況11-13
• 1.2.1 鼓槌石斛的生藥學(xué)研究11
• 1.2.2 鼓槌石斛的化學(xué)成分11-12
• 1.2.3 鼓槌石斛的藥理學(xué)作用12-13
• 1.2.4 鼓槌石斛中有效成分毛蘭素的藥理學(xué)研究13
• 1.3 腫瘤血管生成概述13-18
• 1.3.1 腫瘤與血管生成13-16
• 1.3.2 腫瘤血管生成擬態(tài)16
• 1.3.3 腫瘤血管生成抑制劑研究16-18
• 1.4 IDO概述18-20
• 1.4.1 IDO的生物學(xué)特性18
• 1.4.2 癌癥發(fā)病機制中IDO調(diào)節(jié)異常18-20
• 1.5 研究目標(biāo)、內(nèi)容、創(chuàng)新點和意義20-22
• 1.5.1 研究目標(biāo)20
• 1.5.2 研究內(nèi)容20-21
• 1.5.3 創(chuàng)新點21
• 1.5.4 研究意義21-22
• 第2章 實驗材料與方法22-32
• 2.1 實驗材料22-24
• 2.1.1 細(xì)胞株22
• 2.1.2 實驗藥物22
• 2.1.3 實驗試劑22-24
• 2.2 儀器與設(shè)備24-25
• 2.3 常用試劑的配制25-28
• 2.4 實驗方法28-32
• 2.4.1 細(xì)胞傳代、凍存與復(fù)蘇28
• 2.4.2 細(xì)胞計數(shù)28-29
• 2.4.3 細(xì)胞總蛋白的提取及定量29
• 2.4.4 蛋白免疫印跡(Western Blot)29-30
• 2.4.5 細(xì)胞總RNA的提取30
• 2.4.6 瓊脂糖凝膠電泳30-32
• 第3章 IDO過表達對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響32-42
• 3.1 前言32
• 3.2 實驗材料32-33
• 3.2.1 細(xì)胞株32
• 3.2.2 主要試劑32-33
• 3.2.3 主要設(shè)備33
• 3.3 實驗方法33-36
• 3.3.1 生長曲線的測定33
• 3.3.2 Transwell遷移實驗33-34
• 3.3.3 Transwell侵襲實驗34
• 3.3.4 血管生成實驗34
• 3.3.5 血管生成擬態(tài)實驗34
• 3.3.6 Western blot實驗34
• 3.3.7 總RNA反轉(zhuǎn)錄34-35
• 3.3.8 PCR擴增目的基因35-36
• 3.3.9 統(tǒng)計學(xué)分析36
• 3.4 實驗結(jié)果36-41
• 3.4.1 2LL-IDO細(xì)胞中IDO過表達的驗證36-37
• 3.4.2 IDO過表達對2LL細(xì)胞形態(tài)的影響37-38
• 3.4.3 IDO過表達對2LL細(xì)胞增殖能力的影響38
• 3.4.4 IDO過表達對2LL細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移能力的影響38-39
• 3.4.5 IDO過表達對HUVEC細(xì)胞血管生成能力的影響39-40
• 3.4.6 IDO過表達對2LL細(xì)胞血管生成擬態(tài)的影響40-41
• 3.5 討論41-42
• 第4章 毛蘭素對IDO過表達小鼠Lewis肺癌細(xì)胞中IDO的調(diào)控作用42-49
• 4.1 前言42
• 4.2 實驗材料42-43
• 4.2.1 細(xì)胞株42
• 4.2.2 主要試劑42
• 4.2.3 主要設(shè)備42-43
• 4.3 實驗方法43-45
• 4.3.1 MTT實驗43
• 4.3.2 Western blot實驗43
• 4.3.3 Real-time PCR實驗43-44
• 4.3.4 高效液相色譜44-45
• 4.3.5 統(tǒng)計學(xué)分析45
• 4.4 實驗結(jié)果45-48
• 4.4.1 毛蘭素對2LL-IDO及正常LO2細(xì)胞存活率的影響45
• 4.4.2 毛蘭素對2LL-IDO細(xì)胞中IDO表達的影響45-47
• 4.4.3 毛蘭素對2LL-IDO細(xì)胞中IDO酶活性的影響47-48
• 4.5 討論48-49
• 第5章 毛蘭素調(diào)控IDO誘導(dǎo)的浸潤轉(zhuǎn)移及血管生成49-54
• 5.1 前言49
• 5.2 實驗材料49
• 5.2.1 細(xì)胞株49
• 5.2.2 主要試劑49
• 5.2.3 主要設(shè)備49
• 5.3 實驗方法49-50
• 5.3.1 Transwell遷移實驗49-50
• 5.3.2 Transwell侵襲實驗50
• 5.3.3 血管生成實驗50
• 5.3.4 血管生成擬態(tài)實驗50
• 5.3.5 統(tǒng)計學(xué)分析50
• 5.4 實驗結(jié)果50-53
• 5.4.1 毛蘭素抑制IDO誘導(dǎo)的2LL細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移50-51
• 5.4.2 毛蘭素抑制IDO誘導(dǎo)的HUVEC細(xì)胞血管生成51-52
• 5.4.3 毛蘭素抑制IDO誘導(dǎo)的2LL細(xì)胞血管生成擬態(tài)52-53
• 5.5 討論53-54
• 第6章 毛蘭素調(diào)控IDO誘導(dǎo)的血管生成研究54-60
• 6.1 前言54
• 6.2 實驗材料54-55
• 6.2.1 細(xì)胞株54
• 6.2.2 主要試劑54-55
• 6.2.3 主要設(shè)備55
• 6.3 實驗方法55
• 6.3.1 Western blot實驗55
• 6.3.2 Real-time PCR實驗55
• 6.3.3 統(tǒng)計學(xué)分析55
• 6.4 實驗結(jié)果55-59
• 6.4.1 毛蘭素調(diào)控IDO誘導(dǎo)的腫瘤血管生成過程中關(guān)鍵分子的表達55-57
• 6.4.2 毛蘭素調(diào)控IDO誘導(dǎo)的炎性微環(huán)境中關(guān)鍵分子的表達57-59
• 6.5 討論59-60
• 第7章 結(jié)論60-61
• 參考文獻61-70
• 致謝70-71
• 發(fā)表論文情況71

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王淑美,徐曉玉,張文亮;調(diào)控血管生成中藥的研究現(xiàn)狀[J];時珍國醫(yī)國藥;2004年09期

2 王國慶,易成,周宏遠;因特網(wǎng)上的血管生成研究資源[J];中國微循環(huán);2004年04期

3 練燕;抑制血管生成:第五類抗癌療法?[J];國外醫(yī)學(xué).護理學(xué)分冊;2004年10期

4 金艷,王秀琴;血管生成與抗血管生成策略[J];食品與藥品;2005年09期

5 賈林,袁世珍;腫瘤抗血管治療現(xiàn)狀與血管生成抑制-細(xì)胞毒療法[J];廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2000年02期

6 方全;血管生成素與腫瘤新生血管生成[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);2001年05期

7 曹健,郭德玉,張恩娟;血管生成與疾病治療[J];中國藥房;2001年07期

8 王國慶,易成;血管形成新方式——擬血管生成[J];國外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊);2003年04期

9 鄒戈;腫瘤血管生成與抗血管生成研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).泌尿系統(tǒng)分冊;2003年01期

10 張?zhí)祜w,蔣登金,郭光金;血管內(nèi)皮生長因子與血管生成的研究進展[J];局解手術(shù)學(xué)雜志;2003年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬強;陳剛;徐曉玉;;中藥對血管生成影響研究進展[A];全國第3屆臨床中藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

2 林秀坤;;新生血管生成與靶向抗腫瘤海洋藥物的研制策略[A];2007年全國生化與生物技術(shù)藥物學(xué)術(shù)年會論文集[C];2007年

3 戰(zhàn)忠利;孫蕾娜;孫慧;賈春實;;肺癌血管生成與血管生成抑制物之間相互關(guān)系的研究[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

4 戰(zhàn)忠利;;肺癌血管生成與血管生成抑制物之間相互關(guān)系的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2006年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

5 劉麗華;易愛純;;抗血管生成與血管依賴性實體瘤的治療[A];2009年中國藥學(xué)大會暨第九屆中國藥師周論文集[C];2009年

6 劉麗華;易愛純;;抗血管生成與血管依賴性實體瘤的治療[A];2010年中國藥學(xué)大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

7 李平;王國慶;;血管靶向及抗血管生成聯(lián)合放射治療的研究進展[A];第一屆中國腫瘤靶向治療技術(shù)大會論文集[C];2003年

8 卞修武;;癌癥和慢性炎癥血管生成的調(diào)控差異及其治療學(xué)意義[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會教育論文集[C];2004年

9 李龍江;溫玉明;王昌美;陳江;;抑制血管生成誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的實驗研究[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

10 沈明秀;王凱;蔡連香;岳開琴;張樹成;李巧風(fēng);陳秋梅;;試探中醫(yī)血足則子宮易于容物的內(nèi)涵實驗之一血管生成[A];全國第六屆中西醫(yī)結(jié)合婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)會議論文及摘要集[C];2002年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王迪;血管生成藥等待發(fā)力[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2007年

2 丁志山 沃興德;中藥對血管生成影響的研究進展[N];中國醫(yī)藥報;2003年

3 徐蓓;血管生成：從藥用植物到血管的研究 Angiogenesis:From Plants to Blood Vessels[N];中國醫(yī)藥報;2006年

4 白冰　編譯;癌細(xì)胞血管生成學(xué)說有新變化[N];中國醫(yī)藥報;2008年

5 劉道安;抑制肺癌血管生成“餓死”癌細(xì)胞[N];中國醫(yī)藥報;2002年

6 徐峰;腫瘤與血管生成息息相關(guān)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2001年

7 記者劉道安;中藥對肺癌血管生成有抑制作用[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

8 記者 白毅;miRNA在多糖介導(dǎo)的血管生成抑制中起重要作用[N];中國醫(yī)藥報;2014年

9 漁陽;抗血管生成類藥物：有前瞻性的暴利領(lǐng)域[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

10 徐峰;腫瘤與血管生成息息相關(guān)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2001年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王付海;T7肽通過下調(diào)Ang-2表達及聯(lián)合3-MA發(fā)揮其抗血管生成的實驗研究[D];山東大學(xué);2015年

2 劉建昆;IL-17在結(jié)直腸癌血管生成中的作用及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2011年

3 王心華;力達霉素和大黃素的抗血管生成和抗轉(zhuǎn)移作用及其機制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

4 張彥民;塔斯品堿抑制血管生成的作用及初步機制研究[D];西安交通大學(xué);2008年

5 董豪杰;血管生成素對miR-141的調(diào)控作用及其在血管生成中的功能[D];浙江大學(xué);2014年

6 王婷;咖啡酸苯乙酯抗氧化、促氧化及抗血管生成相關(guān)機制的研究[D];蘭州大學(xué);2007年

7 房長存;基質(zhì)金屬蛋白酶8在血管生成中的作用機制研究[D];山東大學(xué);2013年

8 甄紅英;抗腫瘤抗生素C1027抑制血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移及其作用機制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1997年

9 朱珂;ATF4調(diào)節(jié)骨血管生成的作用和機制的研究[D];南開大學(xué);2013年

10 孟繁平;Raf-1在胃癌及其血管生成中的作用及分子機制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉玉芝;含硒復(fù)合物對犬乳腺腫瘤細(xì)胞CTM1211的生長抑制和血管生成相關(guān)因子的調(diào)節(jié)作用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 榮倩倩;參芪抑瘤方對荷瘤小鼠H_(22)肝癌的抑制作用及抗血管生成機制研究[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué)(原名：甘肅中醫(yī)學(xué)院);2015年

3 閆鍇;血管生成素-2（Angiopoietin-2）調(diào)節(jié)小鼠下肢缺血血管生成的研究[D];四川醫(yī)科大學(xué);2015年

4 于玲;遠隔預(yù)處理對大鼠腦缺血后血管生成及其相關(guān)因子表達影響的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

5 陳士雯;MiR-494調(diào)控蛻膜MSCs影響子癇前期發(fā)病的機制研究[D];南京大學(xué);2015年

6 丁s，

本文編號：414529