本文關(guān)鍵詞：微RNA-375通過(guò)抑制YAP基因表達(dá)調(diào)控CIK細(xì)胞對(duì)宮頸癌SiHa細(xì)胞的體外殺傷效應(yīng)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討微RNA-375(microRNA-375,miR-375)參與細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷(cytokine-induced killer,CIK)細(xì)胞殺傷宮頸癌SiHa細(xì)胞過(guò)程的調(diào)控作用,并確定miR-375發(fā)揮功能的靶基因及其分子機(jī)制。方法:分離健康者外周血單個(gè)核細(xì)胞,在體外用多種細(xì)胞因子培養(yǎng)14 d后誘導(dǎo)成CIK細(xì)胞。收集CIK細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞,FCM法分析其表型特征,并采用CCK-8法測(cè)定CIK細(xì)胞對(duì)宮頸癌SiHa細(xì)胞的殺傷效應(yīng)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)前后宮頸癌SiHa細(xì)胞中miR-375的表達(dá)水平。CCK-8法檢測(cè)miR-375模擬物轉(zhuǎn)染后SiHa細(xì)胞的活性變化,以及CIK細(xì)胞共培養(yǎng)對(duì)轉(zhuǎn)染miR-375抑制子后SiHa細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用。細(xì)胞免疫熒光法和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)后,轉(zhuǎn)染miR-375抑制子的SiHa細(xì)胞中Yes相關(guān)蛋白(Yes-associated protein,YAP)的表達(dá)情況。結(jié)果:與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)24、48和72 h后,SiHa細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率分別為(22.97±3.54)%、(37.48±3.64)%和(54.32±4.25)%,SiHa細(xì)胞中miR-375的相對(duì)表達(dá)量分別約為共培養(yǎng)前的1.39、1.57和2.68倍。轉(zhuǎn)染miR-375模擬物后,SiHa細(xì)胞的活性顯著降低(P0.001)。轉(zhuǎn)染miR-375抑制子后,CIK細(xì)胞抑制SiHa細(xì)胞生長(zhǎng)的效應(yīng)顯著降低(P0.001)。YAP蛋白在SiHa細(xì)胞中大量表達(dá),且主要集中于細(xì)胞核。與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)后,轉(zhuǎn)染miR-375抑制子的SiHa細(xì)胞中YAP蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P0.01)。結(jié)論:CIK可有效殺傷宮頸癌SiHa細(xì)胞。miR-375作為一種抑癌因子,在CIK細(xì)胞殺傷宮頸癌SiHa細(xì)胞過(guò)程中可能通過(guò)下調(diào)YAP基因的表達(dá)來(lái)發(fā)揮作用。
【作者單位】： 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬青島市立醫(yī)院婦科;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬青島市立醫(yī)院腫瘤干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 子宮頸腫瘤 細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞 微RNAs 基因表達(dá)調(diào)控 MiRNA- Yes相關(guān)蛋白
【分類號(hào)】：R737.33
【正文快照】： 目前,針對(duì)宮頸癌主要采用手術(shù)和放療為主、近年來(lái),隨著分子生物學(xué)及腫瘤免疫學(xué)的發(fā)化療為輔的聯(lián)合治療方案。其中,根治性手術(shù)僅展,腫瘤免疫治療在控制腫瘤生長(zhǎng)及改善患者生局限于ⅡA期及以下的早期患者,而ⅡB期及以存方面具有潛在的優(yōu)勢(shì)。最新研究顯示,細(xì)胞因上的中晚期患者由

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：410764