C1GALT1穩(wěn)定過表達人胃癌細胞株的構建及其生物學特性的初步觀察
發(fā)布時間:2025-05-01 09:48
目的:構建C1GALT1穩(wěn)定過表達的MGC-803人胃癌細胞株,觀察其生物學特性,旨在探討C1GALT1基因過表達對人胃癌細胞株體外增殖、遷移、侵襲能力及細胞周期的影響。方法:以人胃癌MGC803細胞株為研究對象,構建pHBLV-CMV-EF1-Zsgreen1-T2A-puro-h-C1GALT1慢病毒包裝載體,包裝慢病毒,感染MGC803細胞,Puromycin篩選過表達h-C1GALT1的MGC-803細胞株,運用Realtime PCR法及Western-blot法檢測C1GALT1 mRNA和C1GALT1蛋白的表達情況,以轉染空載體的胃癌細胞株為對照,CCK8法檢測C1GALT1過表達對胃癌細胞株MGC-803增殖能力的影響,劃痕實驗分析對胃癌細胞株的遷移能力影響,Transwell實驗分析對胃癌細胞株侵襲能力的影響,流式細胞術檢測細胞周期的變化。結果:1、擴大培養(yǎng)后,運用有限稀釋法最終挑取出MGC803-C1GALT1-1、MGC803-C1GALT1-2、MGC803-C1GALT1-3三株細胞。2、Realtime PCR法檢測到h-C1GALT1在MGC803細胞中有...
【文章頁數】:57 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 緒論
第2章 材料與方法
2.1 實驗材料
2.2 實驗方法
第3章 實驗結果
3.1 h-C1GALT1 過表達慢病毒載體的構建
3.2 pHBLV-CMV-EF1-Zsgreen1-T2A-puro-h-C1GALT1 慢病毒載體的轉染
3.3 Realtime PCR法檢測h-C1GALT1 表達結果
3.4 Western-blot法檢測h-C1GALT1 表達結果
3.5 細胞增殖實驗結果
3.6 細胞遷移實驗結果
3.7 細胞侵襲實驗結果
3.8 流式細胞術實驗結果
第4章 討論
第5章 結論
參考文獻
文獻綜述
參考文獻
致謝
本文編號:4042070
【文章頁數】:57 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 緒論
第2章 材料與方法
2.1 實驗材料
2.2 實驗方法
第3章 實驗結果
3.1 h-C1GALT1 過表達慢病毒載體的構建
3.2 pHBLV-CMV-EF1-Zsgreen1-T2A-puro-h-C1GALT1 慢病毒載體的轉染
3.3 Realtime PCR法檢測h-C1GALT1 表達結果
3.4 Western-blot法檢測h-C1GALT1 表達結果
3.5 細胞增殖實驗結果
3.6 細胞遷移實驗結果
3.7 細胞侵襲實驗結果
3.8 流式細胞術實驗結果
第4章 討論
第5章 結論
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本文編號:4042070
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