PRRX1誘導(dǎo)乳腺癌MCF-7細(xì)胞發(fā)生多藥耐藥的研究
發(fā)布時(shí)間:2024-11-03 02:40
目的:探討PRRX1基因在乳腺癌MCF-7細(xì)胞MDR發(fā)生中的作用及其潛在分子機(jī)制。方法:1.通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的方法使PRRX1在乳腺癌MCF-7細(xì)胞中過表達(dá)。轉(zhuǎn)染攜帶PRRX1基因質(zhì)粒的MCF-7細(xì)胞標(biāo)記為PRRX1過表達(dá)組(PRRX1+組)。轉(zhuǎn)染空白載體的MCF-7細(xì)胞標(biāo)記為陰性對(duì)照組(N.C組),未作任何處理的MCF-7細(xì)胞標(biāo)記為空白對(duì)照組(B.C組)。2.轉(zhuǎn)染48小時(shí)后,于倒置熒光顯微鏡下觀察三組細(xì)胞的形態(tài)變化及轉(zhuǎn)染情況。通過Rt-qPCR和WES蛋白印跡定量分析系統(tǒng)檢測三組細(xì)胞PRRX1的mRNA及蛋白表達(dá)水平,以驗(yàn)證轉(zhuǎn)染是否成功。3.通過Rt-qPCR和WES蛋白印跡定量分析系統(tǒng)檢測各組細(xì)胞EMT相關(guān)蛋白波形蛋白(Vimentin)和N-鈣粘蛋白(N-cadherin)的mRNA及蛋白表達(dá)水平,驗(yàn)證PRRX1+組是否發(fā)生EMT。4.用CCK8試劑盒評(píng)估各組細(xì)胞對(duì)多西他賽和順鉑的耐藥情況。5.通過Rt-qPCR和WES蛋白印跡定量分析系統(tǒng)檢測各組細(xì)胞MDR相關(guān)蛋白P-gp的mRNA及蛋白表達(dá)水平,進(jìn)一步驗(yàn)證PRRX1過表達(dá)對(duì)MDR的作用。6.通過Rt-qPCR和WES蛋白印跡定量分析...
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號(hào):4010551
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