研究目的:腎細(xì)胞癌是泌尿系統(tǒng)中常見的惡性腫瘤,起病隱匿,早期沒有明顯典型的臨床癥狀,部分患者在確診的時(shí)候癌細(xì)胞就已經(jīng)發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移,而晚期腎癌對(duì)放化療均不敏感,靶向治療易產(chǎn)生耐藥,所以早診斷早治療是目前有效防治腎癌的最佳手段。ncRNA作為一大類廣泛存在而不轉(zhuǎn)錄成蛋白質(zhì)的RNA,其作用機(jī)制及生物學(xué)功能正越來越多的被發(fā)掘和研究,microRNA作為一類分子量為18到24核苷酸的微小ncRNA,在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起到至關(guān)重要的作用,而完整的miRNA從產(chǎn)生到發(fā)揮作用、自上而下的調(diào)控通路在腎細(xì)胞癌中罕有詳細(xì)報(bào)道。因此,我們以此為契機(jī),探索特異性轉(zhuǎn)錄因子/microRNA/關(guān)鍵作用蛋白通路在腎細(xì)胞癌中的促癌/抑癌作用以及其詳細(xì)機(jī)制,尋找關(guān)鍵分子標(biāo)志物,為腎癌有效診斷及治療奠定理論基礎(chǔ)。研究方案:1.腎細(xì)胞癌中高表達(dá)microRNA的篩選及檢測(cè)搜索TCGA、GEO等網(wǎng)上公共數(shù)據(jù)庫,篩選在腎細(xì)胞癌中高表達(dá)的miRNA,挑選表達(dá)豐度高、上調(diào)明顯、未被研究過的miRNA。從標(biāo)本庫中隨機(jī)選取92例病理診斷明確的腎細(xì)胞癌病例,提取癌組織及癌旁組織的總RNA,利用PCR技術(shù)檢測(cè)miRNA表達(dá)趨勢(shì)。培養(yǎng)各腎癌細(xì)胞系...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

利用TCGA數(shù)據(jù)庫下載腎細(xì)胞癌miRNA表達(dá)庫，篩選出前100個(gè)高NA；繼續(xù)搜索OncomiR網(wǎng)站挑選腎細(xì)胞癌，篩選在腎細(xì)胞癌中高表達(dá)miRNA；條件性選擇GEO數(shù)據(jù)庫中腎細(xì)胞癌的miRNA表達(dá)庫共四個(gè)，編E34981，GSE41282，GSE23085，....

種腎癌細(xì)胞系及永生化腎小管上皮細(xì)胞系HKC中miR-93的種腎癌細(xì)胞系中miR-93的表達(dá)量明顯高于正常腎小管上皮細(xì)胞影響腎癌細(xì)胞增殖與凋亡-93對(duì)腎癌細(xì)胞增殖與凋亡等細(xì)胞功能的影響。首先，／抑制物及其陰性對(duì)照，并在ACHN／786-O腎癌細(xì)其干擾效果，確定了....

性對(duì)照組（圖1.9），綜上體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)，說明miR-93均可促進(jìn)腎癌細(xì)胞增殖，制凋亡。圖1.3轉(zhuǎn)染miR-93模擬物／抑制物及其對(duì)照組后兩種腎癌細(xì)胞系CCK-8增殖曲線A圖為786-O細(xì)胞系，B圖為ACHN細(xì)胞系，圖中黃色、紅色、藍(lán)色、綠色分別為轉(zhuǎn)....

圖1.5流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染miR-93模擬物／抑制物及其對(duì)照后凋亡上圖為流式細(xì)胞儀檢測(cè)AnnexinV染色后細(xì)胞的凋亡情況，下圖為統(tǒng)計(jì)計(jì)算凋亡細(xì)百分率后的統(tǒng)計(jì)圖

本文編號(hào)：4008782