目的:研究自噬核心蛋白ATG4B在維持急性T淋巴細(xì)胞白血病(T-ALL)細(xì)胞生長中的作用,并探討其作用機(jī)制。方法:(1)比較正常骨髓和T-ALL患者CD3⁺細(xì)胞中若干自噬相關(guān)基因的表達(dá)并利用熒光探針檢測正常骨髓和T-ALL患者細(xì)胞自噬水平;(2)研究ATG4B沉默對T-ALL細(xì)胞體外生長、集落生成能力、凋亡和體內(nèi)誘發(fā)白血病能力的影響;(3)采用細(xì)胞計數(shù)和集落生成檢測ATG4B沉默對正常骨髓CD3⁺和CD34⁺細(xì)胞生長的影響;(4)檢測ATG4B抑制劑(LV-320)對Jurkat細(xì)胞和正常對照細(xì)胞體外生長和凋亡等的影響,以及LV-320對Jurkat細(xì)胞體內(nèi)誘發(fā)白血病能力的影響;(5)通過檢測凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)、利用熒光探針染色和使用小分子化合物干預(yù)等方式解析靶向ATG4B誘發(fā)T-ALL細(xì)胞凋亡的機(jī)制。結(jié)果:(1)T-ALL患者CD3⁺細(xì)胞中ATG4A/B/C/D和ATG5表達(dá)較正常骨髓CD3⁺細(xì)胞顯著上調(diào),在白血病細(xì)胞中ATG4B的相對表達(dá)(相對于BECLIN-1)高于其它自噬...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.T-ALL細(xì)胞自噬高度活化

結(jié)果靶向ATG4B抑制急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞生長的研究14結(jié)果1、T-ALL細(xì)胞自噬高度活化我們首先檢測正常骨髓（Normalbonemarrow,NBM）和T-ALL患者CD3+細(xì)胞中若干自噬相關(guān)基因的表達(dá)，結(jié)果顯示T-ALL患者細(xì)胞中自噬相關(guān)基因ATG4A/B/C/D和AT....

圖3.ATG4B沉默抑制T-ALL細(xì)胞體外增殖a)和b)比較ATG4B沉默和對照J(rèn)urkat&MOLT-4細(xì)胞的體外生長與集落生成能力

靶向ATG4B抑制急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞生長的研究結(jié)果17圖3.ATG4B沉默抑制T-ALL細(xì)胞體外增殖a)和b)比較ATG4B沉默和對照J(rèn)urkat&MOLT-4細(xì)胞的體外生長與集落生成能力。*，P<0.05；**，P<0.01；***，P<0.001。圖4.ATG4B沉默誘....

圖4.ATG4B沉默誘發(fā)T-ALL細(xì)胞凋亡a)7-AAD/AnnexinV法檢測ATG4B沉默和對照J(rèn)urkat&MOLT-4細(xì)胞凋亡；b)WesternBlot

靶向ATG4B抑制急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞生長的研究結(jié)果17圖3.ATG4B沉默抑制T-ALL細(xì)胞體外增殖a)和b)比較ATG4B沉默和對照J(rèn)urkat&MOLT-4細(xì)胞的體外生長與集落生成能力。*，P<0.05；**，P<0.01；***，P<0.001。圖4.ATG4B沉默誘....

圖6.ATG4B沉默抑制T-ALL細(xì)胞對臟器的浸潤流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)病小鼠骨髓、脾臟和外周血中的白血病細(xì)胞浸潤比例并進(jìn)行統(tǒng)計分析

靶向ATG4B抑制急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞生長的研究結(jié)果

本文編號：3993222