目的:為了探討NAC1/HMGB1信號(hào)通路在肺癌細(xì)胞EMT及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。方法:利用人肺癌細(xì)胞A549進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)分為:空白對(duì)照組、干擾空載組、表達(dá)空載組、NAC1干擾組、NAC1過(guò)表達(dá)組。qRT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞中NAC1、HMGB1的表達(dá),篩選干擾效率較好的序列進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖;流式檢測(cè)胞周期;Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲;qRT-PCR和Western blot檢測(cè)E-cadherin、N-cadherin、NAC1、HMGB1的表達(dá)。結(jié)果:與對(duì)照組相比,NAC1-shRNA組的NAC1的表達(dá)明顯下降,細(xì)胞增值能力減弱,G1期明顯升高,S期明顯下降,E-cadherin表達(dá)升高,N-cadherin、HMGB1、Vimentin表達(dá)降低;過(guò)表達(dá)的NAC1的組的NAC1表達(dá)明顯升高,細(xì)胞增值能力增強(qiáng),G1期明顯下降,S期明顯升高,E-cadherin表達(dá)降低,N-cadherin、Vimentin、HMGB1表達(dá)升高。結(jié)論:肺癌細(xì)胞中NAC1和HMGB1的表達(dá)可能會(huì)影響EMT的發(fā)生,即NAC1/HMGB1信號(hào)通路與肺癌細(xì)胞EMT和侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)。

【文章頁(yè)數(shù)】：41 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1轉(zhuǎn)染效率的驗(yàn)證（與對(duì)照組相比*P＜0.05）

室溫孵育1h，吸去二抗后，置于TBST溶液中震蕩清洗3次，10min/次。14.成像：濾紙吸干PVDF膜后置于蠟板上，加入ECL顯影液，于化學(xué)發(fā)光上顯影照相。用“Quantityone”軟件分析各抗體條帶灰度值。1.2.8統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)均采用SPSS....

圖2各組細(xì)胞增值情況（與對(duì)照組相比*P＜0.05）

圖2各組細(xì)胞增值情況（與對(duì)照組相比*P＜0.05）Fig2.Cellproliferationindifferentgroups(*P＜0.05vscontrol)細(xì)胞周期示，與對(duì)照組相比，高表達(dá)NAC1，G1期明顯下降，S期低，G1期明顯升高，S期....

圖3細(xì)胞周期的結(jié)果（與對(duì)照組相比*P＜0.05）

圖3細(xì)胞周期的結(jié)果（與對(duì)照組相比*P＜0.05）Fig3.Cellcycleindifferentgroups(*P＜0.05vscontrol)2.4Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲如圖4所示，與對(duì)照組相比，高表達(dá)NAC1，細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng)，NAC....

圖4各組細(xì)胞侵襲情況（與對(duì)照組相比*P＜0.05）

圖3細(xì)胞周期的結(jié)果（與對(duì)照組相比*P＜0.05）Fig3.Cellcycleindifferentgroups(*P＜0.05vscontrol).4Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲如圖4所示，與對(duì)照組相比，高表達(dá)NAC1，細(xì)胞侵襲能力增強(qiáng)，NAC1....

本文編號(hào)：3983327