隨著生存環(huán)境的不斷惡化,重大流行病毒爆發(fā)和癌癥發(fā)病率的不斷提高,給社會造成巨大的恐慌與經(jīng)濟(jì)損失。由于病毒侵染與癌癥發(fā)病機(jī)制尚不清楚,相關(guān)藥物開發(fā)相對滯后,迫切需要發(fā)展一種有效的病毒研究工具來揭示病毒侵染機(jī)制,并研究新型的腫瘤治療手段,突破癌癥治療的瓶頸。近年來,基于代謝工程的生物正交靶向技術(shù)憑借其無損、高效、特異的靶向標(biāo)記能力,已廣泛應(yīng)用于生物體的活體標(biāo)記、示蹤及腫瘤靶向性治療等方面,并不斷在拓寬納米生物醫(yī)學(xué)研究的應(yīng)用領(lǐng)域。本文即以典型的囊膜病毒(假型流感病毒,H5N1p)與非囊膜病毒(腸道病毒,EV71)為研究對象,針對病毒侵染過程中的關(guān)鍵事件,通過細(xì)胞代謝工程與生物正交化學(xué)建立一種普適性的病毒體內(nèi)原位標(biāo)記技術(shù),將其用于捕獲病毒并追蹤其體內(nèi)的動態(tài)侵染行為。同時,本研究基于T細(xì)胞糖代謝工程與生物正交靶向技術(shù),開發(fā)一種安全、高效的T細(xì)胞病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù),為臨床CAR-T細(xì)胞的制備提供了新思路。主要研究內(nèi)容包括以下三個方面:1.假型流感病毒H5N1p的疊氮化脂類代謝修飾與活體原位生物正交熒光標(biāo)記。(1)利用細(xì)胞脂類代謝將疊氮-膽堿衍生物(AE-Cho)嵌合到細(xì)胞膜中,子代病毒出芽時囊膜表面即可...

【文章頁數(shù)】：141 頁

【學(xué)位級別】：博士

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圖1.2生物發(fā)光成像（Bioluminescenceimaging）動態(tài)示蹤IAV-Luc病毒在小鼠體內(nèi)的感染過程（Nat.Comm.,2013）

目前，研究病毒在體內(nèi)的侵染行為方法主要通過在不同驗(yàn)動物,獲得間斷的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，其操作非常繁瑣，結(jié)果穩(wěn)定性差術(shù)是在不傷害實(shí)驗(yàn)動物的前提下對同一實(shí)驗(yàn)對象進(jìn)行實(shí)時、連續(xù)析，是一種理想的可視化研究策略。目前在活體熒光成像研究中光（Bioluminescence）、熒光報告基因（熒光蛋白、....

圖1.3細(xì)胞糖類代謝標(biāo)記在成像示蹤與靶向藥物遞送方面的應(yīng)用（Molecules,2013）

圖1.3細(xì)胞糖類代謝標(biāo)記在成像示蹤與靶向藥物遞送方面的應(yīng)用（Molecules,2013）。.1.4生物正交化學(xué)在標(biāo)記領(lǐng)域中的應(yīng)用生物正交化學(xué)(BioorthogonalChemistry)，這個概念最早由美國斯坦福大CarolynR.Bertozzi教授在200....

圖1.4基于生物代謝工程的生物正交標(biāo)記原理（Nat.Chem.Biol.,2005）

圖1.4基于生物代謝工程的生物正交標(biāo)記原理（Nat.Chem.Biol.,2005）。鑒于病毒外部結(jié)構(gòu)成分，如病毒囊膜、衣殼均來源于宿主細(xì)胞的糖類、蛋白與脂類成分，因此，病毒在進(jìn)行復(fù)制與組裝時，可通過細(xì)胞代謝工程將攜帶報告基團(tuán)的代謝衍生物嵌入到病毒的衣殼、囊膜等結(jié)構(gòu)中....

圖1.5主要化學(xué)報告基團(tuán)間的生物正交化學(xué)反應(yīng)

圖1.5主要化學(xué)報告基團(tuán)間的生物正交化學(xué)反應(yīng)。上述研究，本研究可以利用細(xì)胞代謝修飾與生物正交反應(yīng)所異、穩(wěn)定等諸多優(yōu)勢，合成并制備具有生物正交報告基團(tuán)的細(xì)展針對宿主體內(nèi)活病毒的熒光標(biāo)記與示蹤技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對宿主體記與可視化研究，從而揭示病毒粒子在細(xì)胞與活體內(nèi)的侵染行（圖1.6）。....

本文編號：3968141