目的探討腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)通過JAK2/STAT3途徑對肝癌細(xì)胞凋亡的影響。方法培養(yǎng)人單核巨噬細(xì)胞(THP1),加入佛波酯(PMA)及白介素4(IL-4)誘導(dǎo)分化為TAMs,RT-PCR檢測TAMs表面分子標(biāo)記物CD206和CD163的表達(dá);TAMs與肝癌細(xì)胞(Hep G2、SMMC7721)在Transwell小室內(nèi)共培養(yǎng)48h,通過western blot方法檢測凋亡相關(guān)蛋白Caspase 3、抗凋亡蛋白Bcl-2、信號通路JAK2/STAT3以及p-STAT3的表達(dá);加入JAK2/STAT3通路特異性阻斷劑AG490進(jìn)行阻斷后,檢測相關(guān)凋亡蛋白、抗凋亡蛋白表達(dá)情況以及JAK/STAT信號通路活化情況。結(jié)果人單核巨噬細(xì)胞(THP1)經(jīng)PMA及IL-4分化誘導(dǎo)72h,RT-PCR檢測其細(xì)胞表面CD206和CD163的表達(dá)顯著增加(P<0.05);肝癌細(xì)胞(Hep G2、SMMC7721)與TAMs共培養(yǎng)48h,Western Blot檢測腫瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Caspase3、Bax表達(dá)明顯降低,抗凋亡蛋白Bcl-2以及信號通路JAK2、STAT3、p-STAT3表達(dá)顯...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑及儀器
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)
    1.4 RT-PCR檢測巨噬細(xì)胞表面分子標(biāo)記物CD206及CD163的表達(dá)水平
    1.5 Transwell實驗
    1.6 Western Blot檢測凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)情況
    1.7 JAK2/STAT3信號通路的特異性阻斷及檢測凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)
    1.8 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 THP1分化誘導(dǎo)TAMs細(xì)胞的檢測
    2.2 TAMs抑制肝癌細(xì)胞凋亡的檢測
    2.3 TAMs激活肝癌細(xì)胞JAK2/STAT3信號途徑
    2.4 TAMs激活JAK2/STAT3通路調(diào)控肝癌細(xì)胞凋亡的情況
3 討論



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